BxPC-3 sejtvonal
A BxPC-3 egy emberi eredetű hasnyálmirigyrákos sejtvonal. Széles körben alkalmazzák a rákkutatásban. A kutatók elsősorban a hasnyálmirigyrák biológiájának tanulmányozására, terápiás célpontok azonosítására és rákellenes gyógyszerek fejlesztésére használják ezeket a sejteket.
- Növekedési táptalaj
- A BxPC-3 sejtvonal tenyésztéséhez RPMI 1640 táptalajt használnak. Az ideális sejtnövekedés elérése érdekében 10% borjúszérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal és 2,0 g/l NaHCO3-mal egészítik ki. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
- Duplázódási idő
- A BxPC-3 sejtek duplázódási ideje 48 és 60 óra között mozog.
- Növekedési típus
- A BxPC-3 adhezív sejtvonal.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-3
- Kapható
- Cytion — BxPC-3 megrendelése
Ez a cikk a BxPC-3 sejtvonalról tartalmaz fontos információkat, amelyek jelentősen segíthetnek a vele való munkában. Főként a következőket tárgyalja:
- Általános információk és a BxPC-3 sejtvonal eredete
- A BxPC-3 sejtek tenyésztése
- BxPC-3 sejtvonal: Előnyök és korlátozások
- A BxPC-3 sejtek alkalmazása a kutatásban
- A BxPC-3 sejtekről szóló kutatási publikációk
- Források a BxPC-3 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
Általános információk és a BxPC-3 sejtvonal eredete
A sejtvonal eredetének ismerete elengedhetetlen a kutatásban való alkalmazhatóságához. A jellemzőinek, beleértve a morfológiát, a sejtméretet és a ploidiát, ismerete egyszerűbbé és kényelmesebbé teszi a használatát. Itt megismerheti a BxPC-3 sejtek eredetét és általános tulajdonságait: Mik a BxPC-3 sejtek? Mi a BxPC-3 sejtvonal? Mi a BxPC-3 sejtvonal eredete? Mi a BxPC-3 morfológiája?
- A BxPC-3, az emberi hasnyálmirigy-karcinóma sejtek 1986-ban egy 61 éves, hasnyálmirigy-adenokarcinómában szenvedő európai nőből származnak. Ezek a sejtek tumorigenikusnak bizonyultak még azután is, hogy a beteg több sugár- és kemoterápiás kezelésen esett át. Így a létrehozott sejtvonal felbecsülhetetlen értékű modell a rák kialakulásának és progressziójának tanulmányozásához.
- A BxPC-3 sejtek epiteliális sejtekhez hasonló morfológiával rendelkeznek.
- A BxPC-3 modális kromoszómaszáma 59. Ezeknek a sejteknek homozigóta deléciója van a 18q kromoszómán, amely a SMAD4/DPC4 fehérjét kódolja. Ezenkívül a sejtvonalból hiányzik a hasnyálmirigy-daganatokban gyakori BxPC-3 kras mutáció. Ezekben a hasnyálmirigyrákos sejtekben BxPC-3 BRAF-deléció is található.
Mi a különbség a BxPC3 és a PANC-1 között?
A BxPC-3 PADC (hasnyálmirigy-duktális adenokarcinóma) és a PANC-1 sejtek epiteliális morfológiájú primer hasnyálmirigyrákos sejtvonalak. Az előbbiek inkább epiteliális tulajdonságokkal rendelkeznek, míg az utóbbiak inkább mezenchimális jellemzőket mutatnak [1].
A BxPC-3 sejtek tenyésztése
A BxPC-3 sejtvonalat széles körben használják a rákkutató laboratóriumokban. A hasnyálmirigyrákos sejtvonal hatékony tenyésztéséhez ismernie kell a következő fontos szempontokat. Megtudhatja: Mennyi a BxPC-3 sejtvonal duplázódási ideje? Hogyan tenyésztik a BxPC-3 sejtvonalat?
A BxPC-3 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
A populáció duplázódási ideje:
A BxPC-3 sejtek duplázódási ideje 48 és 60 óra között mozog.
Adherens vagy szuszpenziós:
A BxPC-3 egy adhezív sejtvonal.
Osztási arány:
A BxPC-3 sejteket 1:2 és 1:4 közötti arányban szubkultiválják. A sejteket 1 x PBS-sel mossák, majd accutase nevű átültető oldattal inkubálják. 8–10 perc elteltével friss táptalajt adnak a sejtekhez, majd a sejteket centrifugálják. A pelletet ismét táptalajban reszuszpendálják, majd a sejteket új tenyésztőedénybe öntik a növekedéshez.
Növekedési tápközeg:
A BxPC-3 sejtvonal tenyésztéséhez RPMI 1640 táptalajt használnak. Az ideális sejtnövekedés elérése érdekében 10% borjúszérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal és 2,0 g/l NaHCO3-mal egészítik ki. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
A BxPC-3 sejtkultúrákat 37 °C-os, párásított inkubátorban tartják, amely 5%-os CO2-ellátáshoz van csatlakoztatva.
Tárolás:
A fagyasztott sejteket általában -150 °C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják a sejtek életképességének megőrzése érdekében.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
A BxPC-3 sejtkultúrák fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF használható. A sejtek sokkhatásának elkerülése érdekében lassú fagyasztási eljárást alkalmaznak, amelynek során a hőmérséklet csupán 1 °C-kal csökken.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott BxPC-3 sejteket előre beállított 37 °C-os vízfürdőben 40–60 másodpercig felolvasztják. Miután egy kis jégdarab marad vissza, a sejteket friss tenyészközeggel keverjük össze, majd centrifugáljuk, hogy eltávolítsuk a fagyasztó közeg elemeit. Ezután a sejtpelletet újra szuszpendáljuk, és a sejteket a növekedéshez a lombikba adagoljuk.
Biológiai biztonsági szint:
A BxPC-3 sejtkultúrákat 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumokban tartják.
A BxPC-3 sejtvonal: Előnyök és korlátok
A BxPC-3 egy jól ismert hasnyálmirigy-adenokarcinóma sejtvonal, amelynek számos előnye és korlátja van. A sejtvonal legfontosabb előnyeit és hátrányait itt soroljuk fel.
Előnyök
A BxPC-3 sejtek fő előnyei a következők:
-
A hasnyálmirigyrák in vitro modellje
A hasnyálmirigy-adenokarcinómás betegektől származó BxPC-3 sejtek releváns jellemzőket mutatnak, ami alkalmassá teszi őket a hasnyálmirigyrák viselkedésének in vitro vizsgálatára.
-
Tumorképző sejtvonal
A BxPC-3 sejtek tumorigenikus tulajdonságokkal rendelkeznek, és tumorokat képezhetnek, ha meztelen vagy immunhiányos egerekbe injekciózzák őket. Ezek a tumorok nagyon hasonlítanak az elsődleges hasnyálmirigy-adenokarcinóma tumorokhoz, így a BxPC-3 xenotranszplantációs modell ideális a rák növekedésének és progressziójának tanulmányozására.
Korlátozások
A BxPC-3 sejtvonalhoz kapcsolódó korlátozások a következők:
-
Keresztfertőzés
A BxPC-3 sejtvonal, mint bármely más sejtvonal, keresztfertőzés kockázatával jár. A kutatóknak óvatosan kell eljárniuk, és szigorú fertőzésmegelőzési protokollokat kell betartaniuk ezeknek a sejteknek a kezelése során.
-
Lassú növekedési sebesség
A BxPC-3 sejtek viszonylag lassú szaporodási sebességet mutatnak, a duplázódási idő 48 és 60 óra között mozog. Ez a tulajdonság bizonyos kísérletek esetében hosszabb inkubációs időt igényelhet, ami késleltetheti a kutatás előrehaladását.
A BxPC-3 sejtek alkalmazása a kutatásban
A BxPC-3 sejtek számos alkalmazási lehetőséget kínálnak a rákkutatásban. A leggyakoribb alkalmazások a következők:
- Hasnyálmirigyrák-kutatás: A BxPC-3 sejtek utánozzák a hasnyálmirigy-adenokarcinómát, ezért a tumor kialakulásának és növekedésének genetikai és molekuláris mechanizmusainak feltárására használják őket. Ezenkívül a kutatók ezeknek a sejteknek a segítségével fedeznek fel új biomarkereket és terápiás célpontokat. Továbbá a BxPC-3 sejtek jelentősen expresszálnak angiogén faktorokat, azaz interleukin-8-at (IL-8), prosztaglandin E2-t (PGE2) és vaszkuláris endoteliális növekedési faktort (VEGF), ami alkalmassá teszi őket az angiogenezis tanulmányozására. Az angiogenezis a rák növekedésével és metasztázisával kapcsolatos kulcsfontosságú folyamat. Egy 2022-ben publikált tanulmány kimutatta, hogy a laminin-5 gamma-2 (LAMC2) túltermelése a BxPC3 PDAC-ban (hasnyálmirigy-duktális adenokarcinóma) fokozza a tumorogenezist a BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR jelátviteli út szabályozásán keresztül fokozza a tumorogenezist [2].
- Gyógyszerkutatás és -fejlesztés: A BxPC-3 sejtvonal felbecsülhetetlen értékű modellként szolgál a rákellenes gyógyszerek teszteléséhez. A kutatók a potenciális gyógyszerek citotoxikus, metasztázisgátló és apoptotikus hatásait vizsgálják a BxPC3 PDAC-on. Alexandria Turner és munkatársai által 2020-ban végzett tanulmány az Elaeocarpus reticulatus gyümölcs kivonatok apoptotikus tulajdonságait vizsgálta BxPC-3 hasnyálmirigyrákos sejtekben [3]. Hasonlóképpen, 2020-ban kutatást végeztek, amely meghatározta az Oxialis obtriangulata nevű növény metanolos kivonatának rákellenes potenciálját BxPC-3 sejtekben. Emellett a kutatók azt a sejtmechanisztikus útvonalat is tanulmányozták, amelyen keresztül a növényi kivonat terápiás hatást fejtett ki [4].
5. A BxPC-3 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
Ez a szakasz felsorolja a BxPC-3 sejtvonalat bemutató leggyakrabban hivatkozott és legérdekesebb publikációkat.
A licokumarón a DYRK1A gátlásával indukálja a BxPC-3 hasnyálmirigy-adenokarcinóma sejtek halálát
A Chemico-Biological Interactions (2020) folyóiratban megjelent publikáció egy természetes anyag, a licokumarón apoptotikus hatásait vizsgálta a BxPC-3 hasnyálmirigy-rákos sejtekre.
Ez a kutatási cikk az Anticancer Research (2022) folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt állította, hogy a hidroxiklorokin a BCL-XL gén gátlásával okoz BxPC3 sejtek halálát.
Ezt a kutatást 2020-ban publikálták a Journal of Cellular Biochemistry című folyóiratban. A tanulmány megállapítja, hogy egy természetes vegyület, a salidrosid, rákellenes hatást fejt ki a BxPC-3 sejtekben a HIF-1α (hipoxia-indukálható faktor) és a LOXL2 jelátviteli kaszkád szabályozásával.
A Biomedicine & Pharmacotherapy folyóiratban megjelent cikk szerint az ibrutinib kiváló sugárérzékenyítőként alkalmazható hasnyálmirigyrákos betegeknél. In vitro, BxPC-3 sejtekben végzett vizsgálatok azt mutatják, hogy csökkenti a BxPC3 EGFR foszforilációját, valamint a pAKT és a sugárterápiával felfokozott downstream gének expresszióját.
Az Integrative Cancer Therapies folyóiratban megjelent tanulmány szerint a chelidonin nevű természetes anyag a BxPC3 p53 és GADD45a jelátvitel szabályozása révén apoptotikus hatást fejt ki az emberi hasnyálmirigy-sejtekben (BxPC-3).
Források a BxPC-3 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
A BxPC-3 sejtvonal számos vonzó előnnyel rendelkezik, amelyek alkalmassá teszik kutatási célokra. A BxPC-3 sejtvonalról szóló számos online forrás említi a kezelési, fenntartási és transzfekciós protokollokat.
- BxPC3 transzfekció: Ez a videó lépésről lépésre bemutatja a BxPC-3 sejtek transzfekciós protokollját.
A cikk ezen része néhány linket tartalmaz, amelyek a BxPC3 sejtkultúra protokolljait ismertetik.
- BxPC3 sejtkultúra: Ez a weboldal segít megtanulni a krioprezervált és proliferatív BxPC-3 kultúrák szubkultiválásának és kezelésének protokolljait.
Hivatkozások
- Kim, Y. és munkatársai, A hasnyálmirigy-vezeték adenokarcinóma sejtvonalak összehasonlító proteomikai profilozása. Mol Cells, 2014. 37(12): 888–98. o.
- Kirtonia, A., et al., A laminin-5 gamma-2 túltermelése elősegíti a hasnyálmirigy-csatorna adenokarcinóma tumorogenezisét az EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR kaszkádon keresztül. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): 362. o.
- Turner, A. és munkatársai, Az Elaeocarpus reticulatus gyümölcs kivonatai csökkentik a hasnyálmirigy-rákos sejtek életképességét és apoptózist indukálnak in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: 2073–2084. o.
- An, E.-J. és munkatársai: Az Oxialis obtriangulata rákellenes hatása hasnyálmirigyrákos sejtekben az ERK/Src/STAT3 által közvetített útvonal szabályozása révén. Molecules, 2020. 25(10): 2301. o.