KGN-solut — steroidogeeninen, ihmisen granulosasolujen kaltainen kasvainsolulinja lisääntymis- ja hormonitutkimukseen

Johdanto

KGN-solulinja on steroidogeeninen ihmisen munasarjan granulosasolujen kaltainen kasvainsolulinja, jota käytetään laajalti lisääntymisbiologiassa, endokrinologiassa ja munasarjasyövän tutkimuksessa. Nishi, Yanase ja kollegat perustivat KGN-solulinjan vuonna 2001. Se on peräisin potilaalta, jolla oli invasiivinen munasarjojen granulosasolukarsinooma, ja siitä tuli nopeasti yksi arvokkaimmista in vitro -malleista granulosasolujen toiminnan, steroidogeneesin sekä esimerkiksi munasarjojen monirakkulataudin (PCOS). Solulinja säilyttää ihmisen granulosasolujen keskeiset fysiologiset ominaisuudet, mukaan lukien toiminnallisen follikkelia stimuloivan hormonin (FSH) reseptorin ilmentymisen ja mitattavissa olevan aromataasiaktiivisuuden. Nämä ominaisuudet tekevät KGN-soluista välttämättömän työkalun hormonaalisen säätelyn, munasarjojen follikkeligenesin, insuliiniresistenssin sekä endokriinisten häiritsevien aineiden aiheuttamien soluvasteiden tutkimiseen. Tutkijat ympäri maailmaa käyttävät KGN-soluja granulosasolujen toimintahäiriöiden mallintamiseen, mitokondriobiologian tutkimiseen sekä lisääntymislääketieteen kannalta merkittävien terapeuttisten yhdisteiden seulontaan.

Keskeiset johtopäätökset

• KGN on ihmisen munasarjojen granulosasolujen kaltainen kasvainsolulinja, joka on peräisin invasiivisesta granulosasolukarsinoomasta ja jolle on ominaista steroidogeeninen aktiivisuus.
• KGN-solut ilmentävät toiminnallista FSH-reseptoria ja niillä on FSH:n ja cAMP:n stimuloima aromataasiaktiivisuus.
• Solulinjalla on aikuistyyppisissä munasarjojen granulosasolukasvaimissa esiintyvä tyypillinen FOXL2 p.Cys134Trp (c.402C>G) -somaattinen mutaatio.
• KGN-soluja käytetään laajasti PCOS:n patofysiologian, granulosasolujen apoptoosin, mitokondrioiden toimintahäiriöiden ja hormonaalisten häiritsijöiden vaikutusten mallintamiseen.
• Elinkelpoisuus sulatuksen jälkeen on yli 99 %, ja linja säilyttää vakaat kasvun ominaisuudet useiden siirtojen ajan.
• KGN:stä on julkisesti saatavilla kattavat omiikka-aineistot – mukaan lukien proteomiikka-, transkriptomiikka-, koko eksomin sekvensointi- ja lääkeaineiden seulontatiedot.

Mikä on KGN?

KGN (Cellosaurus-rekisterinumero CVCL_0375) on peräisin 63-vuotiaan naispotilaan munasarjan granulosasolukerroksesta, jolla oli diagnosoitu pahanlaatuinen munasarjan granulosasolukasvain. Nishi et al. perustivat solulinjan vaihdevuosien jälkeen uusiutuneesta granulosasolukarsinoomasta, mikä tekee siitä yhden harvoista tutkijoiden käytettävissä olevista todennetuista ihmisen granulosasolun kaltaisista solulinjoista [1]. Solulinjalla on epänormaali karyotyyppi 45,XX, 7q-, -22, ja se kantaa heterotsygoottista FOXL2 p.Cys134Trp (c.402C>G) -somaattista mutaatiota, joka on aikuistyyppisten munasarjan granulosasolukasvainten tunnusmerkki [2] [3]. Sen populaation kaksinkertaistumisaika on noin 46–47 tuntia. KGN-solut kuuluvat COSMIC-solulinjaprojektiin ja Cancer Dependency Map (DepMap) -karttaan, ja kattavat omiikka-aineistot – jotka käsittävät DNA-metylaation, koko eksomin sekvensoinnin, proteomiikan, transkriptomiikan, SNP-array-analyysin ja lääkeaineiden seulonnan – ovat julkisesti saatavilla [4] [5] [6].

Soluviljelytiedot

KGN – Alhainen konfluenssi

KGN – korkea konfluenssi

KGN-solujen edut

KGN-solut tarjoavat ainutlaatuisen ja hyvin validoidun in vitro -alustan, joka jäljittelee tarkasti ihmisen granulosasolujen fysiologiaa. Toisin kuin ikuistetut ei-steroidogeeniset solulinjat, KGN-solut säilyttävät kykynsä erittää pregnenolonia ja progesteronia, ja niiden aromataasiaktiivisuutta voidaan edelleen indusoida FSH:n ja syklisen AMP:n stimulaatiolla [1]. Tämä tekee niistä erityisen sopivia steroidogeneesin, hormonaalisten takaisinkytkentämekanismien ja munasarjojen follikkelien kypsymisen taustalla olevien biokemiallisten reittien tutkimiseen. Toimivan FSH-reseptorin läsnäolo erottaa KGN-solut useimmista muista kirjallisuudessa tarkastelluista granulosasolujen kaltaisista solulinjoista [7]. Niiden kiinnittyvä, epiteelin kaltainen morfologia helpottaa myös tavanomaisia mikroskopiaan perustuvia määrityksiä.

KGN-solut osoittavat poikkeuksellista vakautta useiden passagointien ajan. Tuotetietojen mukaan elinkyky on yli 99 % sekä sulatuksen jälkeen että ennen pakastamista, ja aliviljelyn elinkyky on pysynyt johdonmukaisesti yli 98 %:n tasolla viiden passagointikerran ajan. Tämä kestävyys tukee toistettavia pitkäaikaisia kokeellisia ohjelmia. Kanta on osa merkittäviä moni-omiksen hankkeita, jotka tarjoavat tutkijoille laajan valikoiman julkisesti saatavilla olevia genomi-, transkriptomi- ja proteomi-vertailutietoja [6] [8]. Heterotsygoottinen FOXL2 p.Cys134Trp-mutaatio tekee KGN-soluista myös geneettisesti määritellyn mallin aikuistyyppisen granulosasolukasvaimen biologian tutkimiseen [3].

KGN-solujen rajoitukset

Monista vahvuuksistaan huolimatta KGN-soluissa on tärkeitä varauksia, jotka tutkijoiden on otettava huomioon. Koska KGN-solut ovat kasvaimesta peräisin oleva linja, jolla on epänormaali karyotyyppi (45,XX, 7q-, -22), ne eivät välttämättä jäljittele täysin normaalien, muuntumattomien primaaristen granulosasolujen käyttäytymistä. Niiden steroidien tuotantoprofiili on epätäydellinen: vaikka ne erittävät pregnenolonia ja progesteronia ja niillä on aromataasiaktiivisuutta, ne tuottavat vain vähän tai eivät lainkaan 17α-hydroksyloituja steroideja, dehydroepiandrosteronia, androsteenidionia tai estradiolia perusviljelyolosuhteissa [1]. Tutkijoiden, jotka tutkivat koko steroidien tuotantoketjua, tulisi täydentää KGN-kokeita primaarisolu- tai eläinmalleilla.

Lisäksi Imai ym. dokumentoivat, että KGN-solut voivat käydä läpi spontaanin fenotyyppisen transformaation korkeammilla passageluvuilla, jolloin ne saavat invasiivisemman, metastaasimaista luonnetta [9]. Tämä passageluvuista riippuva käyttäytymisen muutos tarkoittaa, että huolellinen passageluukojen seuranta on välttämätöntä kokeiden johdonmukaisuuden varmistamiseksi. Suhteellisen pitkä populaation kaksinkertaistumisaika, noin 46–47 tuntia, pidentää myös kokeiden kestoa verrattuna nopeammin jakautuviin solulinjoihin. Koska kyseessä on geneettisesti itäaasialaisperäinen solulinja, tuloksia tulisi tulkita ottaen huomioon mahdolliset populaatiokohtaiset geneettiset vaihtelut [8].

Sovellukset

PCOS ja granulosasolujen toimintahäiriö

KGN-soluista on tullut yksi laajimmin käytetyistä in vitro -työkaluista monirakkulatautiin (PCOS) liittyvän molekyylitason mekanismien tutkimuksessa. Tutkijat käsittelevät KGN-soluja rutiininomaisesti dihydrotestosteronilla (DHT), lipopolysakkaridilla (LPS) tai vapailla rasvahapoilla jäljitelläkseen PCOS-granulosasolulle ominaista androgeenien ylimäärää ja tulehdusympäristöä. Zhou ym. suorittivat PCOS-potilaiden granulosasolujen transkriptiomin sekvensoinnin ja käyttivät KGN-soluja vahvistaakseen, että FN1 on keskeinen solujen lisääntymistä säätelevä geeni, joka toimii PI3K-Akt-, MAPK- ja TGF-beeta-signalointireittien kautta; FN1:n ilmentymisen vaimentaminen KGN-soluissa hillitsi solujen lisääntymistä merkittävästi [10].

Useissa tutkimuksissa on hyödynnetty KGN-soluja PCOS:n solukuolemareittien selvittämiseksi. Cai ym. osoittivat, että WTAP:n välittämä TRAF6:n N6-metylaatio edistää ferroptosia KGN-soluissa, mikä yhdistää m6A-RNA-modifikaation PCOS:n patogeneesiin [11]. Zhang ym. käyttivät IFN-γ:llä käsiteltyjä KGN-soluja yhdessä potilaista peräisin olevien granulosasolujen kanssa osoittaakseen, että AIM2:n välittämä PANoptoosi – ohjelmoidun solukuoleman konvergentti muoto, jossa yhdistyvät pyroptosi, apoptoosi ja nekroptoosi – aiheuttaa ovulaatiohäiriöitä PCOS:ssa [12]. Shen ym. käyttivät KGN-soluja myös tutkiakseen, kuinka hyperhomokysteinemia heikentää granulosasolujen toimintaa ja vähentää korkealaatuisten alkioiden osuutta IVF/ICSI-hoitoa saavilla PCOS-potilailla [13].

KGN-soluja on käytetty myös alustana ehdolla olevien hoitomenetelmien testaamiseen. Zhang ym. osoittivat, että resveratroli lievittää PCOS:aan liittyvää tulehdusta LPS:llä käsitellyissä KGN-soluissa tukahduttamalla AIM2:n ilmentymistä ja vähentämällä tulehdussytokiinien, kuten IL-6:n, IL-1β:n, MCP-1:n ja COX2:n, pitoisuuksia [14]. Lian ym. käyttivät KGN-soluja todentaakseen, että follikulaarisen nesteen eksosomaalinen miR-143-5p kohdistuu RASAL2:een ja ajaa granulosasolujen poikkeavaa proliferaatiota PCOS:ssa, mikä vahvisti eksosomien välittämän viestintäakselin merkityksen ovulaatiotoiminnan häiriöissä [15]. Yao ym. käyttivät DHT:llä ja vapailla rasvahapoilla käsiteltyjä KGN-soluja osana integroivaa tutkimusta, jossa FCGBP tunnistettiin PCOS-NAFLD-komorbiditeetin yhteiseksi molekyylitason tekijäksi [16].

Hormonitoiminnan häiriöt ja ympäristömyrkyllisyys

KGN-solut ovat vakiintunut malli ympäristöperäisten hormonaalisten häiritsijöiden granulosasolukohtaisille vaikutuksille. Niiden toimiva FSH-reseptori ja indusoituva aromataasiaktiivisuus tekevät niistä erityisen herkkiä indikaattoreita yhdisteille, jotka häiritsevät estrogeenin biosynteesiä. Tutkimuksissa on käytetty KGN-soluja osoittamaan, että bisfenoli A (BPA) indusoi apoptoosia GPER-riippuvaisen ROS/Ca²⁺-ASK1-JNK-reitin aktivoinnin kautta, mikä vahvistaa mekanistisen yhteyden yleisesti käytetyn pehmittimen ja granulosasolujen kuoleman välillä [25]. Vastaavasti bisfenoli AF:n (BPAF) on osoitettu indusoivan pitoisuudesta riippuvaa KGN-solujen apoptoosia estrogeenireseptori beeta (ERβ):n ja ROS-ASK1-JNK-MAPK-kaskadin välityksellä, mikä korostaa granulosasolujen herkkyyttä rakenteellisesti samankaltaisille bisfenolianalogeille [26].

KGN-soluja on käytetty myös uusien nanomateriaalien lisääntymistoksisuuden arviointiin. Liang ym. osoittivat, että rikki-kvanttipisteet (SQD:t) – raskasmetalleista vapaat nanomateriaalit, joilla on laaja-alaisia teollisia sovelluksia – aiheuttavat ferroptosia sekä ihmisen istukan trofoblasteissa että munasarjojen KGN-granulosasoluissa ja johtavat haitallisiin raskauden lopputuloksiin hiirillä [17]. Tämä tutkimus vahvisti KGN-solujen aseman kriittisenä ihmisen solumittarina monitasoisessa toksikologisessa viitekehyksessä, joka kattaa molekyyli-, solu- ja koko organismin tason päätepisteet. KGN-solujen johdonmukainen herkkyys oksidatiivista stressiä aiheuttaville aineille useissa kemiallisissa luokissa korostaa niiden arvoa lisääntymistoksikologian seulontaohjelmissa.

Mitokondriobiologia ja munasarjojen ikääntyminen

Yhä useammissa tutkimuksissa käytetään KGN-soluja granulosasolujen ikääntymisen ja munasarjojen ikääntymisen taustalla olevien mitokondriaalisten mekanismien tutkimiseen. Shim ym. tutkivat, voisiko prostaglandiini D2 (PGD2) palauttaa munasarjojen toimintakyvyn koordinoidun mitokondriaalisen uudelleenmuodostumisen kautta käyttäen KGN-soluja yhdessä ikääntyneiden hiirten primaaristen munasarjasolujen ja implantaatiota edeltävien alkioiden kanssa. PGD2 paransi KGN-solujen elinkelpoisuutta, heikensi ikääntymiseen liittyvää β-galaktosidaasiaktiivisuutta, palautti mitokondrioverkoston eheyden, lisäsi mitokondrioiden kalvopotentiaalia ja nosti ATP:n tuotantoa [18]. Nämä havainnot asettavat PGD2:n ehdokkaaksi mitokondrioiden laadunvalvonnan välittäjäksi ikääntyvissä granulosasoluissa.

Teng ym. tutkivat, miten konneksiini 43:n (CX43) välittämä gap junction -viestintä häiriintyy munasarjojen ikääntymisen aikana, ja käyttivät KGN-soluja vahvistaakseen peptidin ZP123:n mekanistisen vaikutuksen CX43:n välittämän kytkennän palauttamisessa [19]. Zhu ym. käyttivät KGN-soluja ja syklofosfamidilla indusoitua munasarjojen varannon heikkenemistä kuvaavaa hiirimallia osoittaakseen, että Qilin-pillerit suojaavat granulosasoluja estämällä PINK1/Parkin-välitteisen mitofagian patologista yliaktivaatiota [20]. Nämä tutkimukset osoittavat yhdessä, että KGN-solut tarjoavat helppokäyttöisen ihmisen solumallin mitofagian, kalvopotentiaalin dynamiikan ja muiden naisten lisääntymiskykyyn liittyvien mitokondriaalisten parametrien analysoimiseksi.

Birkebæk ym. käyttivät KGN-soluja arvioidakseen, miten N-karbamoyyli-L-glutamiini (NCG), mitokondriaalisen CPS1:n allosteerisen aktivaattorin analogi, vaikuttaa granulosasolujen proliferaatioon, arginiinipitoisuuksiin ja mTORC1-signalointiin follikkelien aktivaation aikana [21]. Shin ym. käyttivät KGN-soluja osana laajempaa tutkimusta, jossa selvitettiin, suojaako istukasta peräisin olevien mesenkymaalisten kantasolujen erittämä istukan kasvutekijä (PlGF) munasarjojen granulosasoluja oksidatiiviselta vaurioitumiselta, ja osoittivat munasarjojen vajaatoimintaan liittyviä antioksidanttisia ja soluja suojaavia vaikutuksia [22].

Granulosasolukasvaimen biologia ja onkologia

Suoraan invasiivisesta granulosasolukarsinoomasta peräisin olevana solulinjana KGN toimii ensisijaisena mallina munasarjojen granulosasolukasvainten (GCT) molekyylibiologian ymmärtämisessä. Nishin ym. uraauurtavassa perustamisartikkelissa kuvattiin yksityiskohtaisesti solulinjan perustavat ominaisuudet: KGN:n populaation kaksinkertaistumisaika oli noin 46,4 tuntia, sillä oli epänormaali karyotyyppi ja granulosasolujen erilaistumista vastaava steroidogeeninen profiili [1]. Ratkaisevasti Nishi ym. osoittivat, että KGN-solut ilmentävät toiminnallista FSH-reseptoria ja niissä havaittiin stimuloituva aromataasiaktiivisuus, mikä teki solulinjasta fysiologisesti merkittävän mallin sekä kasvainbiologian että normaalin granulosasolujen endokrinologian tutkimukselle [1].

Myöhemmät tutkimukset vahvistivat, että FOXL2-geenin c.402C>G-mutaatio – jota esiintyy valtaosassa aikuistyyppisistä GCT-kasvaimista – löytyy myös KGN-soluista, mikä antaa geneettisen vahvistuksen solulinjan kasvaimelliselle alkuperälle [2] [3]. Imai ym. kuvasivat KGN-solujen ainutlaatuisen kyvyn muuttua spontaanisti aggressiivisemmaksi ja invasiivisemmaksi fenotyypiksi korkeammilla passageluvuilla, mikä vakiinnutti solulinjan malliksi GCT:n etenemisen ja etäpesäkkeiden tutkimukselle [9]. Jiang ym. käyttivät CRISPR/Cas9-tekniikkaa filamiini A:n (FLNA) poistamiseen KGN-soluista ja osoittivat, että FLNA säätelee proliferaatiota, solusyklin etenemistä, migraatiota ja sytoskeletonin organisoitumista mekaanisen rasituksen alaisena, millä on merkitystä GCT-kasvaimen kasvulle [23].

Kaikkia syöpiä koskevalla tasolla KGN-solut ovat edistäneet laajamittaisia farmakogenomiikka- ja proteomiikkatutkimuksia. Iorio ym. sisällyttivät KGN:n 1 001 syöpäsolulinjan farmakogenomisten vuorovaikutusten kokonaiskuva-analyysiin, jossa kartoitettiin syövän aiheuttamia muutoksia lääkeherkkyysprofiileissa [5]. Gonçalves ym. sisällyttivät KGN-solut 949 ihmisen solulinjaa kattavaan syöpien kokonaiskuvaan, jossa kvantifioitiin 8 498 proteiinia ja integroitiin moni-omiksetiedot lääkevaste- ja CRISPR-Cas9-geenien välttämättömyystutkimuksiin [6]. Nämä laajamittaiset aineistot laajentavat KGN-solujen käyttökelpoisuutta huomattavasti lisääntymisbiologian ulkopuolelle.

Steroidogeneesi ja hormonaalinen signalointi

KGN-soluilla on säilynyt steroidien tuotantokyky, minkä ansiosta ne soveltuvat follikkeligenoosia ja munasarjojen endokriinistä toimintaa säätelevien hormonaalisten signalointireittien tutkimiseen. Havelock ym. tarkastelivat granulosasolulinjojen, mukaan lukien KGN-solujen, käyttökelpoisuutta ja korostivat FSH-reseptorin ilmentymisen ja aromataasiaktiivisuuden merkitystä granulosasolubiologian mallintamisen määrittävinä toiminnallisina ominaisuuksina [7]. KGN-soluja on käytetty tutkimaan, miten fytokemikaalit moduloivat steroidogeneesiä PCOS:ssa. Ikrar ym. käyttivät integroivaa lähestymistapaa, jossa yhdistettiin transkriptomiikka, metabolomiikka, verkostofarmakologia ja KGN-pohjainen in vitro -validointi osoittaakseen, että Cinnamomum burmannii- ja Myristica fragrans -lajeista peräisin olevat yhdisteet voivat moduloida steroidogeneettisiä ja insuliinisignalointireittejä PCOS:aan liittyvissä yhteyksissä [24].

KGN-soluja on käytetty myös steroidogeneesin ja ohjelmoidun solukuoleman välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen. Kyseinen solulinja reagoi androgeenien ylimäärään: salidrosidin osoitettiin lievittävän DHT:n aiheuttamaa oksidatiivista stressiä ja apoptoosia KGN-soluissa AMPK/Nrf2-reitin välityksellä, mikä osoittaa KGN-solujen hyödyllisyyden soluja suojaavien aineiden arvioinnissa hyperandrogeenisissä ympäristöissä [27]. PCOS-potilaiden follikulaarisessa nesteessä runsaasti esiintyvän arakidonihapon osoitettiin indusoivan oksidatiivista stressiä ja säätelevän GDF15-ilmentymistä ylöspäin KGN-soluissa, mikä yhdistää follikulaarisen mikroympäristön lipidivälittäjäaineet granulosasolujen toimintahäiriöön [28]. Yhteenvetona nämä tutkimukset havainnollistavat, kuinka KGN-solut yhdistävät steroidien tuotantoon, aineenvaihduntaan ja stressivasteeseen liittyvät signalointireitit yhdessä ihmisen in vitro -järjestelmässä.

Johtopäätös

KGN-solut ovat ainutlaatuisessa ja välttämättömässä asemassa lisääntymisbiologiassa ja munasarjojen endokrinologiassa. Siitä lähtien, kun Nishi ym. perustivat ja karakterisoivat solulinjan vuonna 2001, siitä on tullut laajimmin käytetty ihmisen granulosasolujen kaltainen solumalli PCOS:n patofysiologian, granulosasolujen apoptoosin ja ohjelmoidun solukuoleman, steroidogeneesin, mitokondrioiden toimintahäiriön sekä hormonihäiritsijöiden lisääntymistoksisuuden tutkimiseen. Toimivan FSH-reseptorin säilyminen, stimuloitava aromataasiaktiivisuus ja tunnusomainen FOXL2 p.Cys134Trp-mutaatio antavat KGN-soluille poikkeuksellisen fysiologisen ja geneettisen merkityksen. Niiden erinomaiset elinkelpoisuusominaisuudet – johdonmukaisesti yli 98 % soluviljelyjen välillä – yhdistettynä laajoihin, julkisesti saatavilla oleviin moni-omiksetietokantoihin tekevät niistä erittäin käytännöllisen ja hyvin tuetun tutkimusvälineen. Riippumatta siitä, keskitytkö tutkimuksessasi munasarjojen monirakkulatautiin, munasarjojen granulosasolukasvaimen biologiaan, mitofagiaan, insuliiniresistenssiin vai ympäristöaineiden vaikutuksiin munasarjojen toimintaan, KGN-solut tarjoavat vankan ja toistettavan ihmisen solualustan. Käy osoitteessa cytion.com tutustuaksesi tuotteen täydellisiin teknisiin tietoihin, tarkastellaksesi aitoustodentamistietoja ja tilataksesi KGN-soluja tutkimusohjelmaasi varten.

Tärkeimmät julkaisut

1. Nishi Y, Yanase T, Mu Y (2001) Steroidogeenisen, toiminnallista follikkelia stimuloivaa hormonireseptoria ilmentävän ihmisen granulosasolujen kaltaisen kasvainsolulinjan, KGN:n, perustaminen ja karakterisointi. Endocrinology. PMID: 11145608
2. Schrader KA, Gorbatcheva B, Senz J (2009) FOXL2-geenin c.402C>G-somaattisen mutaation spesifisyys: tutkimus kiinteistä kasvaimista. PloS one. PMID: 19956657
3. Benayoun BA, Caburet S, Dipietromaria A (2010) Aikuisten munasarjojen granulosasolukasvaimiin liittyvän somaattisen FOXL2-mutaation p.Cys134Trp (c.402C>G) toiminnallinen tutkimus. PloS one. PMID: 20098707
4. Bignell GR, Greenman CD, Davies H (2010) Mutaatioiden ja valinnan merkit syöpägenomissa. Nature. PMID: 20164919
5. Iorio F, Knijnenburg TA, Vis DJ (2016) Katsaus syövän farmakogenomisiin vuorovaikutuksiin. Cell. PMID: 27397505
6. Gonçalves E, Poulos RC, Cai Z (2022) 949 ihmisen solulinjan syöpäproteomikartta. Cancer Cell. PMID: 35839778
7. Havelock JC, Rainey WE, Carr BR (2004) Munasarjojen granulosasolulinjat. Molecular and cellular endocrinology. PMID: 15541573
8. Dutil J, Chen Z, Monteiro AN (2019) Interaktiivinen resurssi syöpäsolulinjojen geneettisen monimuotoisuuden ja arvioidun alkuperän tutkimiseen. Cancer research. PMID: 30894373
9. Imai M, Muraki M, Takamatsu K (2008) Ihmisen granulosasolukasvainten spontaani transformaatio aggressiiviseksi fenotyypiksi: metastaasimallisolulinja. BMC Cancer. PMID: 18980698
10. Zhou K, Han W, Wang Q (2026) FN1:n transkriptiomiseulonta ja toiminnallinen validointi granulosasolujen proliferaation säätelyssä munasarjojen monirakkulataudissa. The Korean Journal of Physiology & Pharmacology. PMID: 42027048
11. Cai Z, Liu R, Zhao L (2026) WTAP:n välittämä TRAF6:n N6-metylaatio edistää munasarjojen monirakkulataudin kehittymistä indusoimalla ferroptosia. Reproductive Sciences. PMID: 42115577
12. Zhang Q, Meng Y, Zhao W (2026) IFN-γ:n indusoima AIM2-PANoptoosi granulosasoluissa johtaa ovulaatiotoiminnan häiriöihin munasarjojen monirakkulataudissa. Biochemical pharmacology. PMID: 42114679
13. Shen H, Jia T, Luo X (2026) Hyperhomokysteinemia vähentää korkealaatuisten alkioiden osuutta IVF/ICSI-hoitoa saavilla PCOS-potilailla: kliinistä näyttöä ja alustava selvitys mekanismeista KGN-soluissa. Journal of Ovarian Research. PMID: 42129831
14. Zhang Q, Li H, Meng Y (2026) Resveratroli lievittää tulehdusta munasarjojen monirakkulataudissa estämällä Absent in Melanoma 2 -geenin ilmentymistä. Phytotherapy Research. PMID: 42118129
15. Lian Y, Chen J, Zhang T (2026) Follikulaarisen nesteen eksosomaalisen miR-143-5p:n uusi rooli munasarjojen monirakkulataudissa: RASAL2:n kohdentaminen granulosasolujen proliferaation edistämiseksi. Molecular and cellular endocrinology. PMID: 42208847
16. Yao Y, Si M, Ding H (2026) FCGBP yhdistää hormonaalisen epätasapainon ja maksan rasvoittumisen PCOS-NAFLD-komorbiditeetissa: integroiva bioinformatiikka- ja kokeellinen tutkimus. Frontiers in endocrinology. PMID: 42232754
17. Liang Y, Zhang W, Sun Y (2026) Rikki-kvanttipisteet aiheuttavat ferroptosia ihmisen istukan trofoblasti- ja munasarjan granulosasoluissa ja johtavat haitallisiin raskauden lopputuloksiin hiirillä. Environment international. PMID: 42019120
18. Shim YH, An JY, Ryu JS (2026) Prostaglandiini D2 vahvistaa mitokondrioiden laadunvalvontaa munasarjojen ja alkioiden toimintakyvyn parantamiseksi. Biomedicine & pharmacotherapy. PMID: 42176571
19. Teng H, Xie Q, Zhou C (2026) Vatsaonteloon annettu ZP123 parantaa ikääntyneiden munasolujen laatua palauttamalla granulosasolujen gap-liitokset ja parantamalla mitokondrioiden toimintaa. Journal of Ovarian Research. PMID: 42174667
20. Zhu F, Hu C, Huang S (2026) Qilin-pillerit suojaavat munasarjojen varannon heikkenemiseltä estämällä PINK1/Parkin-välitteisen mitofagian patologista yliaktivaatiota granulosasoluissa. Journal of ethnopharmacology. PMID: 42167661
21. Birkebæk SB, Amoushahi M, Lykke-Hartmann K (2026) Mitokondriaalisen CPS1:n aktivointi edistää lepotilassa olevien munasarjakystien aktivoitumista arginiinipitoisuuden nousun ja mTORC1-reitin kautta. Frontiers in Cell and Developmental Biology. PMID: 42111264
22. Shin JY, Lee DH, Park H (2026) Istukasta peräisin olevista mesenkymaalisista kantasoluista erittyvä istukan kasvutekijä parantaa munasarjojen toimintaa TAA-vaurioituneilla rotilla antioksidanttisten vaikutusten kautta. Antioxidants. PMID: 42193225
23. Jiang Y, Caban KM, Peitzsch M (2026) Filamiini A:n poistaminen KGN-granulosakasvainsoluista heikentää solujen proliferaatiota, solusyklin etenemistä, migraatiota ja sytoskeletonin organisoitumista mekaanisen stressin alaisena. Biological research. PMID: 42163310
24. Ikrar T, Siahaan SC, Hendarto H (2026) Cinnamomum burmannii- ja Myristica fragrans -lajien monikohteinen vaikutus aineenvaihdunta- ja steroidien muodostumisen reitteihin munasarjojen monirakkulataudissa. Nutrients. PMID: 42075118
25. Huang M, Huang M, Li X, Liu S, Fu L, Jiang X, Yang M (2021) Bisfenoli A indusoi apoptoosia GPER-riippuvaisen ROS/Ca²⁺-ASK1-JNK-reitin aktivoinnin kautta ihmisen granulosasolulinjassa KGN. Ekotoksikologia ja ympäristöturvallisuus. PMID: 33039870
26. Huang M, Li X, Jia S, Liu S, Fu L, Jiang X, Yang M (2021) Bisfenoli AF indusoi apoptoosia estrogeenireseptori beeta (ERβ):n ja ROS-ASK1-JNK-MAPK-reitin kautta ihmisen granuloosasolulinjassa KGN. Environmental Pollution. PMID: 33189448
27. Ji R, Jia FY, Chen X, Wang ZH, Jin WY, Yang J (2022) Salidrosidi lievittää oksidatiivista stressiä ja apoptoosia AMPK/Nrf2-reitin kautta DHT:n indusoimassa ihmisen granulosasolulinjassa KGN. Archives of Biochemistry and Biophysics. PMID: 34813774
28. Ma Y, Zheng L, Wang Y, Gao Y, Xu Y (2022) PCOS:n follikulaarisessa nesteessä oleva arakidonihappo indusoi oksidatiivista stressiä ihmisen munasarjan granulosasolulinjassa (KGN) ja säätelee vastauksena GDF15-ilmentymistä ylöspäin. Frontiers in Endocrinology. PMID: 35634503