DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham’s F12 on laajalti tunnustettu ja laajasti käytetty perusviljelyalusta soluviljelyssä biologisessa tutkimuksessa. Se toimii keskeisenä ravinteiden lähteenä erilaisten nisäkässolulinjojen kasvulle, erityisesti kun siihen lisätään sikiön naudan seerumia (FBS).
Tämä ainutlaatuinen koostumus yhdistää Dulbeccon modifioidun Eagle-alustan (DMEM) ja Ham's F-12:n (Ham's Nutrient Mixture F-12) tarkassa 1:1-suhteessa. L-glutamiinin lisääminen parantaa sen koostumusta entisestään.
Eagle's Minimal Essential Mediumista (EMEM) johdettu DMEM tarjoaa edeltäjäänsä verrattuna suuremman pitoisuuden aminohappoja ja vitamiineja. Sen sijaan Ham's F-12 perustuu Ham's F-10 -kasvatusliuokseen ja tarjoaa täydentävän joukon välttämättömiä komponentteja.
Optimaalisen solujen kasvun tukemiseksi on yleistä täydentää DMEM:Ham's F12 -seosta FBS:llä, jonka tyypillinen pitoisuus on 5–10 %. Tämä lisäys on välttämätön, koska elatusaineesta puuttuvat solujen kehitykselle välttämättömät kasvuhormonit, lipidit ja proteiinit.
DMEM:Ham’s F12 sisältää pH-puskurointijärjestelmän, ja siihen lisätään usein pH-indikaattorina fenolipunainen. DMEM:Ham’s F12:ssa tai missä tahansa bikarbonaattipuskurointijärjestelmää käyttävässä elatusaineessa viljellyt solut vaativat kontrolloitua 5–10 %:n CO₂-ympäristöä asianmukaisten pH-tasojen ylläpitämiseksi.
Laadunvalvonta
- Steriilisuodatettu
Säilytys ja säilyvyysaika
- Säilytä +2–+8 °C:ssa, valolta suojattuna.
- Avatun pakkauksen säilytyslämpötila on 4 °C, ja se on käytettävä 6–8 viikon kuluessa.
Kuljetusolosuhteet
- Ympäristön lämpötila
Säilytys
- Säilytä jääkaapissa +2 °C – +8 °C:ssa pimeässä. Vältä jäätymistä ja toistuvaa lämmittämistä +37 °C:een, sillä se heikentää tuotteen laatua.
- Älä lämmitä elatusainetta yli 37 °C:n lämpötilaan tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltouuneja.
- Jos vain osa elatusaineesta käytetään, ota tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpötilaan ennen käyttöä.
Koostumus
| Luokka | Ainesosat | Pitoisuus (mg/l) |
| Aminohapot | Glysiini | 18,75 |
| L-alaniini | 4,45 | |
| L-arginiini-HCl | 147,50 | |
| L-asparagiini H₂O | 7,50 | |
| L-asparagiinihappo | 6,65 | |
| L-kysteiini-HCl-H₂O | 17,56 | |
| L-kystiini 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamiinihappo | 7,35 | |
| L-glutamiini | 365,00 | |
| L-histidiini-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-isoleusiini | 54,47 | |
| L-leusiini | 59,05 | |
| L-lysiini-HCl | 91,25 | |
| L-metioniini | 17,24 | |
| L-fenyylialaniini | 35,48 | |
| L-proliini | 17,25 | |
| L-seriini | 26,25 | |
| L-treoniini | 53,45 | |
| L-tryptofaani | 9,02 | |
| L-tyrosiini 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valiini | 52,85 | |
| Vitamiinit | D-biotiini | 0,0035 |
| Koliinikloridi | 8,98 | |
| D-kalsiumpantotenaatti | 2,24 | |
| Foolihappo | 2,66 | |
| myo-inositoli | 12,60 | |
| Nikotiiniamidi | 2,02 | |
| Pyridoksiini-HCl | 0,031 | |
| Pyridoksaali-HCl | 2,00 | |
| Riboflaviini | 0,219 | |
| Tiamiini-HCl | 2,17 | |
| B12-vitamiini | 0,68 | |
| Epäorgaaniset suolat | CaCl₂·2H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5 H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2 H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Muut komponentit | D-glukoosi | 3151,00 |
| Hypoksaantiini | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolihappo | 0,042 | |
| Lipoiinihappo | 0,105 | |
| Fenolipunaisen natriumsuola | 8,63 | |
| Putreskiini-2-HCl | 0,081 | |
| Natriumpyruvaatti | 55,00 | |
| Tymidiini | 0,365 |