DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 on laajalti tunnustettu ja laajasti käytetty perusviljelyalusta soluviljelyssä biologisessa tutkimuksessa. Se toimii keskeisenä ravinteiden lähteenä erilaisten nisäkässolulinjojen kasvulle, erityisesti kun siihen lisätään sikiön naudan seerumia (FBS).
Tämä ainutlaatuinen koostumus yhdistää Dulbeccon modifioidun Eagle-alustan (DMEM) ja Ham's F-12:n (Ham's Nutrient Mixture F-12) tarkassa 1:1-suhteessa. L-glutamiinin lisääminen parantaa sen koostumusta entisestään.
DMEM, joka on johdettu Eagle's Minimal Essential Mediumista (EMEM), tarjoaa edeltäjäänsä suuremman pitoisuuden aminohappoja ja vitamiineja. Sen sijaan Ham's F-12 perustuu Ham's F-10 -alustaan ja tarjoaa täydentävän joukon välttämättömiä komponentteja.
Optimaalisen solujen kasvun tukemiseksi on yleistä täydentää DMEM:Ham's F12:ta FBS:llä tyypillisesti 5–10 %:n pitoisuudella. Tämä lisäys on tarpeen, koska väliaineesta puuttuu solujen kehitykselle välttämättömiä kasvuhormoneja, lipidejä ja proteiineja.
DMEM:Ham's F12 sisältää pH-puskuriin ja siihen lisätään usein fenolipunainen, joka on pH-indikaattori. DMEM:Ham's F12:ssa tai missä tahansa bikarbonaattipuskuriin perustuvassa elatusaineessa viljellyt solut vaativat 5–10 %:n CO2-pitoisuuden, jotta sopiva pH-taso säilyy.
Laadunvalvonta
- Steriilisuodatettu
Säilytys ja säilyvyysaika
- Säilytä +2–+8 °C:ssa, suojattuna valolta.
- Avatun pakkauksen säilytyslämpötila on 4 °C, ja se on käytettävä 6–8 viikon kuluessa.
Kuljetusolosuhteet
- Ympäristön lämpötila
Säilytys
- Säilytä jääkaapissa +2 °C – +8 °C:ssa pimeässä. Vältä jäädyttämistä ja toistuvaa lämmittämistä +37 °C:seen, sillä se heikentää tuotteen laatua.
- Älä lämmitä elatusainetta yli 37 °C:n lämpötilaan tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltouuneja.
- Jos vain osa elatusaineesta käytetään, ota tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpötilaan ennen käyttöä.
Koostumus
| Luokka | Komponentit | Pitoisuus (mg/l) |
| Aminohapot | Glysiini | 18,75 |
| L-alaniini | 4,45 | |
| L-arginiini-HCl | 147,50 | |
| L-asparagiini H₂O | 7,50 | |
| L-asparagiinihappo | 6,65 | |
| L-kysteiini-HCl-H₂O | 17,56 | |
| L-kystiini 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamiinihappo | 7,35 | |
| L-glutamiini | 365,00 | |
| L-histidiini-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-isoleusiini | 54,47 | |
| L-leusiini | 59,05 | |
| L-lysiini-HCl | 91,25 | |
| L-metioniini | 17,24 | |
| L-fenyylialaniini | 35,48 | |
| L-proliini | 17,25 | |
| L-seriini | 26,25 | |
| L-treoniini | 53,45 | |
| L-tryptofaani | 9,02 | |
| L-tyrosiini 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valiini | 52,85 | |
| Vitamiinit | D-biotiini | 0,0035 |
| Koliinikloridi | 8,98 | |
| D-kalsiumpantotenaatti | 2,24 | |
| Foolihappo | 2,66 | |
| myo-inositoli | 12,60 | |
| Nikotiiniamidi | 2,02 | |
| Pyridoksiini-HCl | 0,031 | |
| Pyridoksaali-HCl | 2,00 | |
| Riboflaviini | 0,219 | |
| Tiamiini-HCl | 2,17 | |
| B12-vitamiini | 0,68 | |
| Epäorgaaniset suolat | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Muut komponentit | D-glukoosi | 3151,00 |
| Hypoxantiini | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolihappo | 0,042 | |
| Lipoiinihappo | 0,105 | |
| Fenolipunaisen natriumsuola | 8,63 | |
| Putreskiini-2-HCl | 0,081 | |
| Natriumpyruvaatti | 55,00 | |
| Tymidiini | 0,365 |