P19 Zellen

Das Gefriermedium CM-1 von Cytion ist ein hochmodernes Kryokonservierungsmedium, das ein Höchstmaß an Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen gewährleistet. Dieses vielseitige Medium eignet sich für ein breites Spektrum von Zelltypen, einschließlich menschlicher und tierischer Zellen, was es zu einem unverzichtbaren Werkzeug für verschiedene Forschungsanwendungen macht. Freeze Medium CM-1 enthält eine sorgfältig ausgewogene Kombination von Kryoprotektoren und essentiellen Nährstoffen und minimiert die Bildung von Eiskristallen und den zellulären Stress während des Einfriervorgangs, so dass die zelluläre Integrität erhalten bleibt.
Zu den wichtigsten Eigenschaften von Freeze Medium CM-1 gehören:

Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit von Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige Versuchsergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-1 ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.


Verwendung von CM-1 zum Einfrieren von Zellen

Gehen Sie wie folgt vor, um CM-1 für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden

Bei adhärenten Zellen waschen Sie diese und lösen sie vom Kultursubstrat. Bei Suspensionszellen fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zählen Sie die Zellen, um sicherzustellen, dass sie die richtige Konzentration haben.
Zentrifugieren Sie die Zellen, um sie zu pelletieren, und resuspendieren Sie sie dann in CM-1-Gefriermedium.
Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryogefäße.
Verwenden Sie eine langsame Gefriermethode, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen





Methode
Beschreibung
Schritte





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Manuelles Einfrieren

Eine schrittweise Methode, bei der die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten

1️⃣ Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten in einen 4°C Gefrierschrank legen.
2️⃣ Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C transferieren.
3️⃣ Lagern Sie die Zellen zur langfristigen Konservierung in flüssigem Stickstoff



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Verwendung von Mr. Frosty

Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht

1️⃣ Zellen in Kryo-Gefäßen mit Gefriermedium vorbereiten.
2️⃣ Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen.
3️⃣ Lagern Sie die Zellen bei -80°C für 24 Stunden, bevor Sie sie in flüssigen Stickstoff umfüllen



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Controlled-Rate Freezer

Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist

1️⃣ Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird.
2️⃣ Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank.
3️⃣ Überführen Sie die Zellen nach dem Gefrierzyklus in flüssigen Stickstoff









Lagern Sie die Kryoflaschen bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff zur langfristigen Aufbewahrung.


Inhaltsstoffe

Enthält FBS, DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6


Cytion's Freeze Medium CM-1 bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.

DMEM:Ham's F12 ist ein weithin anerkanntes und häufig verwendetes Basismedium in der Zellkultur für die biologische Forschung. Es dient als grundlegende Nährstoffquelle für das Wachstum verschiedener Säugetierzelllinien, insbesondere wenn es mit fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt wird.

Diese einzigartige Formulierung kombiniert Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) und Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in einem präzisen 1:1-Verhältnis. Durch den Zusatz von L-Glutamin wird die Zusammensetzung weiter verbessert.

DMEM, das von Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM) abgeleitet ist, bietet im Vergleich zu seinem Vorgänger eine höhere Konzentration an Aminosäuren und Vitaminen. Im Gegensatz dazu basiert Ham's F-12 auf dem Medium Ham's F-10 und bietet eine ergänzende Reihe von essentiellen Komponenten.

Um ein optimales Zellwachstum zu unterstützen, ist es üblich, DMEM:Ham's F12 mit FBS in einer typischen Konzentration von 5-10 % zu ergänzen. Dieser Zusatz ist notwendig, da dem Medium Wachstumshormone, Lipide und Proteine fehlen, die für die zelluläre Entwicklung entscheidend sind.

DMEM:Ham's F12 enthält ein pH-Puffersystem und wird häufig mit Phenolrot, einem pH-Indikator, ergänzt. Zellen, die in DMEM:Ham's F12 oder einem anderen Medium mit Bikarbonatpuffer kultiviert werden, benötigen eine kontrollierte CO2-Umgebung von 5-10%, um einen angemessenen pH-Wert zu erhalten.


Qualitätskontrolle

Steril gefiltert


Lagerung und Haltbarkeit

Vor Licht geschützt bei +2°C bis +8°C lagern.
Nach dem Öffnen bei 4°C lagern und innerhalb von 6-8 Wochen aufbrauchen.


Versandbedingungen

Umgebungstemperatur


Pflege

Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Vermeiden Sie Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37°C, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
Erwärmen Sie das Medium nicht über 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellengeräte.
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, entnehmen Sie die erforderliche Menge und erwärmen Sie sie vor der Verwendung auf Raumtemperatur.


Zusammensetzung



Kategorie
Bestandteile
Konzentration (mg/L)


Aminosäuren
Glycin
18.75


L-Alanin
4.45


L-Arginin HCl
147.50


L-Asparagin H₂O
7.50


L-Asparaginsäure
6.65


L-Cystein HCl H₂O
17.56


L-Cystin 2 HCl
31.29


L-Glutaminsäure
7.35


L-Glutamin
365.00


L-Histidin HCl H₂O
31.48


L-Isoleucin
54.47


L-Leucin
59.05


L-Lysin HCl
91.25


L-Methionin
17.24


L-Phenylalanin
35.48


L-Prolin
17.25


L-Serin
26.25


L-Threonin
53.45


L-Tryptophan
9.02


L-Tyrosin-Natriumsalz
48.10


L-Valin
52.85


Vitamine
D-Biotin
0.0035


Cholinchlorid
8.98


D-Calciumpantothenat
2.24


Folsäure
2.66


myo-Inositol
12.60


Nicotinamid
2.02


Pyridoxin HCl
0.031


Pyridoxal HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Thiamin-HCl
2.17


Vitamin B12
0.68


Anorganische Salze
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Andere Bestandteile
D-Glucose
3151.00


Hypoxanthin
2.40


HEPES
3574.50


Linolsäure
0.042


Liponsäure
0.105


Phenolrot Natriumsalz
8.63


Putrescin 2 HCl
0.081


Natriumpyruvat
55.00


Thymidin
0.365

Accutase Zelldissoziationsreagenz
- eine schonende Alternative zu Trypsin
Accutase ist eine Zellablösungslösung, die die Zellkulturindustrie revolutioniert. Es ist eine Mischung aus proteolytischen und kollagenolytischen Enzymen, die die Wirkung von Trypsin und Kollagenase nachahmt. Im Gegensatz zu Trypsin enthält Accutase keine Säugetier
- oder Bakterienbestandteile und ist sehr viel schonender für die Zellen, was es zu einer idealen Lösung für die routinemäßige Ablösung von Zellen von Standardplastikgefäßen für die Gewebekultur und adhäsionsbeschichteten Plastikgefäßen macht. In diesem Blogbeitrag gehen wir auf die Vorteile und Einsatzmöglichkeiten von Accutase ein und zeigen, wie es die Zellkultur verändert.
Vorteile von Accutase
Accutase hat mehrere Vorteile gegenüber herkömmlichen Trypsinlösungen. Erstens kann es immer dann eingesetzt werden, wenn eine sanfte und effiziente Ablösung von adhärenten Zelllinien erforderlich ist, und ist somit ein direkter Ersatz für Trypsin. Zweitens funktioniert Accutase sehr gut bei embryonalen und neuronalen Stammzellen, und es hat sich gezeigt, dass die Lebensfähigkeit dieser Zellen nach der Passage erhalten bleibt. Drittens bewahrt Accutase die meisten Epitope für die anschließende durchflusszytometrische Analyse, was es ideal für die Analyse von Zelloberflächenmarkern macht.
Außerdem muss Accutase bei der Passage von adhärenten Zellen nicht neutralisiert werden. Durch die Zugabe weiterer Medien nach der Zellteilung wird die Accutase verdünnt, so dass sie nicht mehr in der Lage ist, Zellen abzulösen. Dadurch entfällt der Schritt der Inaktivierung, und die Zellkulturtechniker sparen Zeit. Schließlich muss Accutase nicht aliquotiert werden, und eine Flasche ist im Kühlschrank 2 Monate lang haltbar.
Anwendungen von Accutase
Accutase ist ein direkter Ersatz für Trypsinlösung und kann für die Passage von Zelllinien verwendet werden. Darüber hinaus eignet sich Accutase gut zum Ablösen von Zellen für die Analyse vieler Zelloberflächenmarker mittels Durchflusszytometrie und für die Zellsortierung. Andere nachgeschaltete Anwendungen der Accutase-Behandlung umfassen die Analyse von Zelloberflächenmarkern, Viruswachstumstests, Zellproliferation, Tumorzellmigrationsassays, routinemäßige Zellpassage, Produktionsskalierung (Bioreaktor) und Durchflusszytometrie.
Zusammensetzung von Accutase
Accutase enthält keine Bestandteile von Säugetieren oder Bakterien und ist eine natürliche Enzymmischung mit proteolytischer und kollagenolytischer Enzymaktivität. Es ist in einer viel niedrigeren Konzentration als Trypsin und Kollagenase formuliert, wodurch es weniger toxisch und sanfter, aber genauso wirksam ist.
Wirksamkeit von Accutase
Accutase ist nachweislich effizient bei der Ablösung von Primär
- und Stammzellen und erhält die hohe Lebensfähigkeit der Zellen im Vergleich zu Enzymen tierischen Ursprungs wie Trypsin. 100 % der Zellen werden nach 10 Minuten zurückgewonnen, und dank der Selbstverdauung von Accutase ist es unbedenklich, Zellen bis zu 45 Minuten in Accutase zu belassen.
Zusammenfassung
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Accutase eine leistungsstarke Lösung ist, die das Spiel in der Zellkultur verändert. Mit seiner sanften Natur, Effizienz und Vielseitigkeit ist Accutase die ideale Alternative zu Trypsin. Wenn Sie nach einer zuverlässigen und effizienten Lösung für die Zellablösung suchen, ist Accutase die richtige Lösung für Sie.

Produktübersicht
Volumen: 100 ml Lagerung: ≤-15°C Sterilität: Steril-gefiltert
Antibiotika-/Antimykotika-Lösung (100x) ist ein steriles, gebrauchsfertiges Konzentrat zur Verringerung des Risikos einer mikrobiellen Kontamination in Zellkulturen und ähnlichen Laboranwendungen. Diese 100-fache Lösung enthält eine bewährte Kombination aus Penicillin, Streptomycin und Amphotericin B, die ein breites antimikrobielles Wirkungsspektrum gegen grampositive und gramnegative Bakterien, Hefen und filamentöse Pilze bietet. Die Formulierung eignet sich für den Einsatz in eukaryotischen Zellkulturen, bakteriellen Medien und anderen kontaminationsanfälligen Systemen und unterstützt saubere und konsistente Laborabläufe.
Anwendung und Vorteile Diese Lösung wurde für routinemäßige Forschungsprotokolle optimiert und wird häufig zur Aufrechterhaltung aseptischer Bedingungen in Zellkultur-Workflows verwendet. Sie bietet zuverlässige Leistung in kontaminationsanfälligen Umgebungen und hilft Forschern, das Risiko einer mikrobiellen Überwucherung zu reduzieren, ohne die Gesundheit der Zellen oder die Reproduzierbarkeit der Experimente zu beeinträchtigen. Die steril gefilterte Formulierung macht zusätzliche Solubilisierungsschritte überflüssig, unterstützt eine rationalisierte Medienvorbereitung und reduziert die Variabilität in den täglichen Laborabläufen.
Verwendung und Kompatibilität Um Standard-Arbeitskonzentrationen zu erreichen, verdünnen Sie die Lösung 1:100 in Ihr komplettes Kulturmedium. Das Produkt ist mit einer breiten Palette von Säugetierzelllinien und Basalmedien kompatibel. Dank der konstanten Verfügbarkeit der Vorräte profitieren Forscher von einer zuverlässigen Lieferkontinuität und einer vereinfachten Logistikplanung. Die Lösung sollte bei ≤ -15 °C gelagert und vor wiederholten Gefrier-Auftau-Zyklen geschützt werden, um die Stabilität zu erhalten. Nur für den Forschungsgebrauch. Nicht zur Verwendung in diagnostischen oder therapeutischen Verfahren. Nicht zur Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) ist eine weit verbreitete Pufferlösung in der biologischen und chemischen Forschung. Sie spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung des pH-Gleichgewichts und der Osmolarität während verschiedener experimenteller Verfahren, einschließlich Gewebeverarbeitung und Zellkultur. Unsere PBS-Lösung wird sorgfältig mit hochreinen Inhaltsstoffen formuliert, um Stabilität und Zuverlässigkeit bei jedem Experiment zu gewährleisten. Die Osmolarität und die Ionenkonzentration unserer PBS-Lösung sind denen des menschlichen Körpers sehr ähnlich, so dass sie isotonisch und für die meisten Zellen ungiftig ist.

Zusammensetzung unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist eine pH-angepasste Mischung aus hochreinen Phosphatpuffern und Kochsalzlösungen. Bei einer 1fachen Arbeitskonzentration enthält sie:

8000 mg/L Natriumchlorid (NaCl)
200 mg/L Kaliumchlorid (KCl)
1150 mg/L Natriumphosphat dibasisch wasserfrei (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumphosphat einbasig wasserfrei (KH2PO4)

Diese Zusammensetzung gewährleistet ein optimales pH
- und Ionengleichgewicht und eignet sich für eine breite Palette biologischer Anwendungen.

Anwendungen unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist ideal für verschiedene Anwendungen in der biologischen Forschung. Aufgrund ihrer isotonischen und ungiftigen Eigenschaften eignet sie sich für die Verdünnung von Substanzen und die Spülung von Zellbehältern. PBS-Lösungen, die EDTA enthalten, sind wirksam, um anhaftende und verklumpte Zellen abzulösen. Zweiwertige Metalle wie Zink sollten jedoch nicht zu PBS hinzugefügt werden, da dies zu Ausfällungen führen kann. In solchen Fällen werden Good's Puffer empfohlen. Außerdem ist unsere PBS-Lösung eine akzeptable Alternative zu viralen Transportmedien für den Transport und die Lagerung von RNA-Viren, einschließlich SARS-CoV-2.

Qualitätskontrolle

Steril gefiltert


Lagerung und Haltbarkeit

Vor Licht geschützt bei +2°C bis +25°C lagern.
Nach dem Öffnen bei 2°C bis 25°C lagern und innerhalb von 24 Monaten verbrauchen.


Versandbedingungen

Umgebungstemperatur


Pflege

Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Vermeiden Sie Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37°C, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
Erwärmen Sie das Medium nicht über 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellengeräte.
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, entnehmen Sie die erforderliche Menge und erwärmen Sie sie vor der Verwendung auf Raumtemperatur.

Zusammensetzung



Kategorie
Bestandteile
Konzentration (mg/L)


Salze
Kaliumchlorid
200



Kaliumphosphat monobasisch wasserfrei
200



Natriumchlorid
8000



Natriumphosphat zweibasisch wasserfrei
1150