HaCaT-Zellen

Das Gefriermedium CM-1 von Cytion ist ein hochmodernes Kryokonservierungsmedium, das ein Höchstmaß an Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen gewährleistet. Dieses vielseitige Medium eignet sich für ein breites Spektrum von Zelltypen, einschließlich menschlicher und tierischer Zellen, was es zu einem unverzichtbaren Werkzeug für verschiedene Forschungsanwendungen macht. Freeze Medium CM-1 enthält eine sorgfältig ausgewogene Kombination von Kryoprotektoren und essentiellen Nährstoffen und minimiert die Bildung von Eiskristallen und den zellulären Stress während des Einfriervorgangs, so dass die zelluläre Integrität erhalten bleibt.
Zu den wichtigsten Eigenschaften von Freeze Medium CM-1 gehören:

Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit von Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige Versuchsergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-1 ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.


Verwendung von CM-1 zum Einfrieren von Zellen

Gehen Sie wie folgt vor, um CM-1 für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden

Bei adhärenten Zellen waschen Sie diese und lösen sie vom Kultursubstrat. Bei Suspensionszellen fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zählen Sie die Zellen, um sicherzustellen, dass sie die richtige Konzentration haben.
Zentrifugieren Sie die Zellen, um sie zu pelletieren, und resuspendieren Sie sie dann in CM-1-Gefriermedium.
Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryogefäße.
Verwenden Sie eine langsame Gefriermethode, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen





Methode
Beschreibung
Schritte





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Manuelles Einfrieren

Eine schrittweise Methode, bei der die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten

1️⃣ Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten in einen 4°C Gefrierschrank legen.
2️⃣ Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C transferieren.
3️⃣ Lagern Sie die Zellen zur langfristigen Konservierung in flüssigem Stickstoff



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Verwendung von Mr. Frosty

Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht

1️⃣ Zellen in Kryo-Gefäßen mit Gefriermedium vorbereiten.
2️⃣ Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen.
3️⃣ Lagern Sie die Zellen bei -80°C für 24 Stunden, bevor Sie sie in flüssigen Stickstoff umfüllen



❄️
Controlled-Rate Freezer

Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist

1️⃣ Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird.
2️⃣ Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank.
3️⃣ Überführen Sie die Zellen nach dem Gefrierzyklus in flüssigen Stickstoff









Lagern Sie die Kryoflaschen bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff zur langfristigen Aufbewahrung.


Inhaltsstoffe

Enthält FBS, DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6


Cytion's Freeze Medium CM-1 bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) ist ein äußerst vielseitiges und weit verbreitetes Basismedium, das für das Wachstum einer Vielzahl von Säugetierzellen in der biologischen Forschung entwickelt wurde. Es dient als ideales Medium für die Kultivierung von primären Fibroblasten, Neuronen, Gliazellen, HUVECs, glatten Muskelzellen sowie beliebten Zelllinien wie HeLa, 293, Cos-7 und PC-12.
Was DMEM von anderen Medien unterscheidet, ist seine einzigartige Zusammensetzung. Es enthält eine beeindruckende Vervierfachung der Aminosäure
- und Vitaminkonzentration im Vergleich zum ursprünglichen Eagle's Minimal Essential Medium. Ursprünglich mit niedrigem Glukosegehalt (1 g/L) und Natriumpyruvat entwickelt, wird DMEM häufig mit höherem Glukosegehalt verwendet, entweder mit oder ohne Natriumpyruvat. DMEM enthält keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren, so dass eine Supplementierung erforderlich ist. Um ein optimales Wachstum zu erreichen, wird DMEM häufig mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt. Außerdem enthält DMEM ein Natriumbicarbonat-Puffersystem, das zur Aufrechterhaltung eines physiologischen pH-Werts eine 5-10%ige CO2-Umgebung erfordert.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ist ein hoch angesehenes Medium für die Zell
- und Gewebekultur, das den Wachstumsanforderungen verschiedener adhärenter Zellphänotypen gerecht wird. Es übertrifft das ursprüngliche Eagle's Medium, das in den 1950er Jahren für die Kultivierung von Hühnerzellen entwickelt wurde, durch eine verbesserte Zusatzformulierung, die als Dulbecco's Modifikation bekannt ist. Diese Modifikation erhöht den Gehalt an ausgewählten Aminosäuren und Vitaminen im Vergleich zum Originalmedium um das bis zu Vierfache.
Im Bereich der Zellkultur spielt DMEM eine wichtige Rolle als Wachstumsmedium für verschiedene Zelltypen, darunter Primärzellen, Stammzellen und transformierte Zellen. Forscher setzen die modifizierte Version von DMEM auch für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen ein, z. B. in der Arzneimittelforschung, im Tissue Engineering und bei der Untersuchung von Zellsignalwegen.

Qualitätskontrolle

Steril gefiltert


Lagerung und Haltbarkeit

Vor Licht geschützt bei +2°C bis +8°C lagern.
Nach dem Öffnen bei 4°C lagern und innerhalb von 6-8 Wochen verbrauchen.


Versandbedingungen

Umgebungstemperatur


Pflege

Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Vermeiden Sie Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37°C, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
Erwärmen Sie das Medium nicht über 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellengeräte.
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, entnehmen Sie die erforderliche Menge und erwärmen Sie sie vor der Verwendung auf Raumtemperatur.


Zusammensetzung



Kategorie
Bestandteile
Konzentration (mg/L)


Aminosäuren
Glycin
30.00



L-Arginin HCl
84.00



L-Cystin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-Histidin HClH2O
42.00



L-Isoleucin
105.00



L-Leucin
105.00



L-Lysin HCl
146.00



L-Methionin
30.00



L-Phenylalanin
66.00



L-Serin
42.00



L-Threonin
95.00



L-Tryptophan
16.00



L-Tyrosin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valin
94.00


Vitamine
Cholinchlorid
4.00



D-Calciumpantothenat
4.00



Folsäure
4.00



myo-Inositol
7.20



Nicotinamid
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Thiamin HCl
4.00


Anorganische Salze
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Sonstige Bestandteile
D-Glucose
4500.00



Phenolrot Natriumsalz
15.90



Natriumpyruvat
110.00

Accutase-Zellablösungslösung mit EDTA und Phenolrot – 100 ml

Accutase ist eine gebrauchsfertige, steril gefilterte Zellablösungslösung, die als schonende Alternative zu Trypsin/EDTA entwickelt wurde, um adhärente Säugetierzellen von Standard-Gewebekultur-Kunststoffgefäßen und adhäsionsbeschichteten Oberflächen zu lösen. Sie kombiniert proteolytische und kollagenolytische Enzymaktivität in einer ausgewogenen Salzlösung, um eine effektive und dennoch kontrollierte Dissoziation zu ermöglichen, wobei die Zelloberflächenproteine erhalten bleiben und eine hohe Lebensfähigkeit nach der Passagierung sowie eine schnelle Wiederanhaftung unterstützt werden.

Die Accutase-Formulierung basiert auf Dulbecco’s phosphatgepufferter Kochsalzlösung (DPBS) mit EDTA und Phenolrot als visuellem pH-Indikator. Die Enzyme sind nicht-säugetierischen und nicht-bakteriellen Ursprungs, wodurch sich Accutase besonders gut für die Stammzellenforschung, Impfstoff-Workflows und alle Anwendungen eignet, bei denen Kontaminationen tierischen oder mikrobiellen Ursprungs minimiert werden müssen. Die Lösung hemmt sich bei 37 °C selbst, sodass nach der Ablösung kein Neutralisationsreagenz oder serumhaltiges Medium erforderlich ist – die Zellen können direkt in frisches Medium überführt werden.

Hauptmerkmale

Gebrauchsfertige 1x steril gefilterte Flüssigkeit – keine Verdünnung oder Rekonstitution erforderlich
Kombinierte proteolytische und kollagenolytische Enzymaktivität für eine schonende Dissoziation
Jede Charge ist auf eine definierte Dissoziationsaktivität standardisiert, um eine Chargenkonsistenz zu gewährleisten
Enzyme nicht-mammalierischer und nicht-bakterieller Herkunft
Autoinhibiert bei 37 °C – keine Neutralisationslösung erforderlich
Formuliert in Dulbecco’s PBS mit EDTA
Phenolrot als visueller pH-Indikator enthalten
pH 6,8 – 7,8


Typische Anwendungen
Accutase löst eine Vielzahl von adhärenten und empfindlichen Zelltypen schonend auf, darunter humane embryonale Stammzellen (hESCs), humane induzierte pluripotente Stammzellen (iPSCs), neurale Stammzellen, primäre Neuronen sowie routinemäßig kultivierte adhärente Zelllinien wie HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 und A549. Typische Anwendungsfälle sind:

Routinemäßige Subkultur und Passagierung von adhärenten Säugetierzellen
Schonende Einzelzell-Dissoziation von hESCs, iPSCs und anderen empfindlichen Zelllinien
Probenvorbereitung für Durchflusszytometrie und FACS-Analyse
Analyse von Zelloberflächenmarkern, bei denen die Epitopintegrität entscheidend ist
Assays zur Zellmigration, Proliferation und Apoptose
Quieszenztests durch Serumentzug und Onkogen-Transfektionsstudien
Migrationsassays für Tumorzellen und Neuralleistenzellen
Produktionsskalierung in Bioreaktor-Workflows

Für Routinearbeiten etwa 10 ml Accutase pro 75 cm² Kulturfläche auftragen und 5–10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren. Die optimale Inkubationszeit sollte für jede Zelllinie bestimmt werden und eine Stunde nicht überschreiten. Vor der Zugabe die Zellschicht mit einer Ca²⁺/Mg²⁺-freien Salzlösung wie DPBS ohne Calcium und Magnesium spülen, um Serumrückstände und zweiwertige Kationen zu entfernen.

Handhabung und Lagerung
Lagern Sie die ungeöffnete Flasche tiefgefroren bei -15 °C oder darunter. Tauen Sie das Produkt entweder bei Raumtemperatur oder über Nacht bei +2 °C bis +8 °C auf. Tauen Sie Accutase nicht in einem 37 °C warmen Wasserbad auf, da erhöhte Temperaturen die Enzymaktivität verringern. Nach dem Auftauen kann die Lösung bis zu 2 Monate bei +2 °C bis +8 °C gelagert werden; lagern Sie sie nicht bei Raumtemperatur. Das Reagenz vor der Anwendung nicht auf 37 °C vorwärmen – es direkt bei Raumtemperatur zu den gewaschenen Zellen geben. Für eine lange Haltbarkeit wird die Aufteilung in Einmalaliquots empfohlen, um wiederholte Auftauzyklen zu vermeiden. Arbeiten Sie stets unter aseptischen Bedingungen.

Qualität
Hergestellt unter strengen Qualitätsstandards. Jede Charge von Accutase wird steril gefiltert und auf Sterilität, pH-Wert, Aussehen und Dissoziationsaktivität geprüft, um eine konsistente, reproduzierbare Leistung von Charge zu Charge zu gewährleisten.

Produktspezifikationen



Spezifikation
Detail



ProdukttypReagenz zur Zellablösung/Dissoziation
FormatSteril gefilterte Flüssigkeit, gebrauchsfertig
Volumen100 ml
Arbeitskonzentration1x (gebrauchsfertig)
EnzymaktivitätKombiniert proteolytisch und kollagenolytisch
EnzymherkunftNicht-säugetierisch und nicht-bakteriell
PuffersystemDulbecco’s PBS mit EDTA
pH-IndikatorPhenolrot
pH-Bereich6,8 – 7,8
AussehenKlare, hellrote bis orangefarbene Lösung
Lagertemperatur-15 °C oder darunter
Haltbarkeit nach dem AuftauenBis zu 2 Monate bei +2 °C bis +8 °C
Empfohlenes Verwendungsvolumen~10 ml pro 75 cm² Kulturfläche
Typische Inkubationszeit5 – 10 Minuten bei Raumtemperatur
VersandbedingungenGefroren auf Trockeneis
VerwendungszweckNur für Forschungszwecke und zur Weiterverarbeitung



Formulierung (Zusammensetzung pro Liter)



Komponente
Konzentration (mg/l)




Anorganische Salze

Natriumchlorid (NaCl)8000,00
Dinatriumhydrogenphosphat (Na₂HPO₄)1150,00
Kaliumchlorid (KCl)200,00
Kaliumdihydrogenphosphat (KH₂PO₄)200,00

Sonstige Bestandteile

EDTA · 4Na (Tetranatrium-EDTA)220,00
Phenolrot3,00
Proprietäre Enzymmischung (proteolytische und kollagenolytische Aktivität)1x



Accutase ist eine eingetragene Marke von Innovative Cell Technologies, Inc.

Produktübersicht
Volumen: 100 ml Lagerung: ≤-15°C Sterilität: Steril-gefiltert
Antibiotika-/Antimykotika-Lösung (100x) ist ein steriles, gebrauchsfertiges Konzentrat zur Verringerung des Risikos einer mikrobiellen Kontamination in Zellkulturen und ähnlichen Laboranwendungen. Diese 100-fache Lösung enthält eine bewährte Kombination aus Penicillin, Streptomycin und Amphotericin B, die ein breites antimikrobielles Wirkungsspektrum gegen grampositive und gramnegative Bakterien, Hefen und filamentöse Pilze bietet. Die Formulierung eignet sich für den Einsatz in eukaryotischen Zellkulturen, bakteriellen Medien und anderen kontaminationsanfälligen Systemen und unterstützt saubere und konsistente Laborabläufe.
Anwendung und Vorteile Diese Lösung wurde für routinemäßige Forschungsprotokolle optimiert und wird häufig zur Aufrechterhaltung aseptischer Bedingungen in Zellkultur-Workflows verwendet. Sie bietet zuverlässige Leistung in kontaminationsanfälligen Umgebungen und hilft Forschern, das Risiko einer mikrobiellen Überwucherung zu reduzieren, ohne die Gesundheit der Zellen oder die Reproduzierbarkeit der Experimente zu beeinträchtigen. Die steril gefilterte Formulierung macht zusätzliche Solubilisierungsschritte überflüssig, unterstützt eine rationalisierte Medienvorbereitung und reduziert die Variabilität in den täglichen Laborabläufen.
Verwendung und Kompatibilität Um Standard-Arbeitskonzentrationen zu erreichen, verdünnen Sie die Lösung 1:100 in Ihr komplettes Kulturmedium. Das Produkt ist mit einer breiten Palette von Säugetierzelllinien und Basalmedien kompatibel. Dank der konstanten Verfügbarkeit der Vorräte profitieren Forscher von einer zuverlässigen Lieferkontinuität und einer vereinfachten Logistikplanung. Die Lösung sollte bei ≤ -15 °C gelagert und vor wiederholten Gefrier-Auftau-Zyklen geschützt werden, um die Stabilität zu erhalten. Nur für den Forschungsgebrauch. Nicht zur Verwendung in diagnostischen oder therapeutischen Verfahren. Nicht zur Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) ist eine weit verbreitete Pufferlösung in der biologischen und chemischen Forschung. Sie spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung des pH-Gleichgewichts und der Osmolarität während verschiedener experimenteller Verfahren, einschließlich Gewebeverarbeitung und Zellkultur. Unsere PBS-Lösung wird sorgfältig mit hochreinen Inhaltsstoffen formuliert, um Stabilität und Zuverlässigkeit bei jedem Experiment zu gewährleisten. Die Osmolarität und die Ionenkonzentration unserer PBS-Lösung sind denen des menschlichen Körpers sehr ähnlich, so dass sie isotonisch und für die meisten Zellen ungiftig ist.

Zusammensetzung unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist eine pH-angepasste Mischung aus hochreinen Phosphatpuffern und Kochsalzlösungen. Bei einer 1fachen Arbeitskonzentration enthält sie:

8000 mg/L Natriumchlorid (NaCl)
200 mg/L Kaliumchlorid (KCl)
1150 mg/L Natriumphosphat dibasisch wasserfrei (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumphosphat einbasig wasserfrei (KH2PO4)

Diese Zusammensetzung gewährleistet ein optimales pH
- und Ionengleichgewicht und eignet sich für eine breite Palette biologischer Anwendungen.

Anwendungen unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist ideal für verschiedene Anwendungen in der biologischen Forschung. Aufgrund ihrer isotonischen und ungiftigen Eigenschaften eignet sie sich für die Verdünnung von Substanzen und die Spülung von Zellbehältern. PBS-Lösungen, die EDTA enthalten, sind wirksam, um anhaftende und verklumpte Zellen abzulösen. Zweiwertige Metalle wie Zink sollten jedoch nicht zu PBS hinzugefügt werden, da dies zu Ausfällungen führen kann. In solchen Fällen werden Good's Puffer empfohlen. Außerdem ist unsere PBS-Lösung eine akzeptable Alternative zu viralen Transportmedien für den Transport und die Lagerung von RNA-Viren, einschließlich SARS-CoV-2.

Qualitätskontrolle

Steril gefiltert


Lagerung und Haltbarkeit

Vor Licht geschützt bei +2°C bis +25°C lagern.
Nach dem Öffnen bei 2°C bis 25°C lagern und innerhalb von 24 Monaten verbrauchen.


Versandbedingungen

Umgebungstemperatur


Pflege

Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Vermeiden Sie Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37°C, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
Erwärmen Sie das Medium nicht über 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellengeräte.
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, entnehmen Sie die erforderliche Menge und erwärmen Sie sie vor der Verwendung auf Raumtemperatur.

Zusammensetzung



Kategorie
Bestandteile
Konzentration (mg/L)


Salze
Kaliumchlorid
200



Kaliumphosphat monobasisch wasserfrei
200



Natriumchlorid
8000



Natriumphosphat zweibasisch wasserfrei
1150

Organismus	Menschen
Gewebe	Vorhaut