LLC-MK2 (originale) celler

Cytions Freeze Medium CM-1 er et topmoderne kryopræserveringsmedium, der er designet til at sikre det højeste niveau af cellelevedygtighed og funktionalitet efter optøning. Dette alsidige medium er velegnet til et bredt spektrum af celletyper, herunder både humane og animalske celler, hvilket gør det til et vigtigt værktøj til forskellige forskningsapplikationer. Freeze Medium CM-1 er formuleret med en omhyggeligt afbalanceret kombination af kryobeskyttelsesmidler og essentielle næringsstoffer og minimerer dannelsen af iskrystaller og cellulær stress under fryseprocessen, så den cellulære integritet bevares.
De vigtigste funktioner i Freeze Medium CM-1 omfatter:

Bred kompatibilitet: Effektivt til en lang række celletyper, herunder primære celler, stamceller og etablerede cellelinjer.
Høj levedygtighed: Optimeret til at maksimere gendannelse og levedygtighed af celler efter optøning, hvilket sikrer pålidelige eksperimentelle resultater.
Klar til brug: Praktisk forberedt og steriliseret til øjeblikkelig anvendelse, hvilket reducerer forberedelsestiden og risikoen for kontaminering.
Forbedret stabilitet: Opretholder en ensartet ydeevne under standard kryopræserveringsforhold, hvilket sikrer reproducerbare resultater.
Lang holdbarhed: CM-1 er et serumholdigt kryopræserveringsmedium, der er klar til brug, og som kan opbevares i køleskabet i op til et år.


Brug af CM-1 til nedfrysning af celler

Følg disse trin for at bruge CM-1 til nedfrysning af både adhærente og suspenderede celler

For adhærente celler skal de vaskes og adskilles fra kultursubstratet. For suspensionsceller skal du fortsætte direkte til næste trin.
Tæl cellerne for at sikre, at de har den rette koncentration.
Centrifuger cellerne for at pelleter dem, og resuspender dem derefter i CM-1-frysemedium.
Overfør de resuspenderede celler til cryovials.
Brug en langsom nedfrysningsmetode, før du overfører cellerne til langtidsopbevaring





Metode
Beskrivelse
Skridt





❄️
Manuel nedfrysning

En trinvis metode, der involverer gradvis temperatursænkning for at sikre cellernes levedygtighed

1️⃣ Anbring cellerne i frysemediet i en fryser på 4 °C i 40 minutter.
2️⃣ Overfør til en fryser på -80 °C i 24 timer.
3️⃣ Opbevar cellerne i flydende nitrogen til langtidsopbevaring



❄️
Brug af Mr. Frosty

En praktisk anordning, der giver mulighed for kontrollerede frysehastigheder uden elektrisk strøm

1️⃣ Forbered celler i kryovialer med frysemedium.
2️⃣ Placer kryovials i Mr. Frosty-beholderen.
3️⃣ Opbevar ved -80 °C i 24 timer, før de overføres til flydende nitrogen



❄️
Fryser med kontrolleret hastighed

En højpræcisionsfryser fra Thermo Fisher eller andre producenter, der er designet til kontrolleret temperatursænkning

1️⃣ Programmer enheden til gradvist at sænke temperaturen.
2️⃣ Placer de forberedte celler i fryseren.
3️⃣ Efter frysecyklussen overføres cellerne til flydende nitrogen









Opbevar kryovialerne ved temperaturer under -130 °C eller i flydende kvælstof til langtidsopbevaring.


Ingredienser

Indeholder FBS, DMSO, glukose, salte
Bufferkapacitet: pH = 7,2 til 7,6


Cytions Freeze Medium CM-1 er en pålidelig løsning til kryopræservering, der sikrer høj cellelevedygtighed og funktionalitet efter optøning til en lang række forskningsformål.

Medium 199 er et alsidigt og meget anvendt cellekulturmedium, der er specielt formuleret til dyrkning af primære eksploranter. Dette omfattende medium kombinerer essentielle vitaminer, aminosyrer og andre faktorer for at give en fuldt defineret næringskilde til en række forskellige celletyper. Det er særligt velegnet til ikke-transformerede celler, hvilket gør det til et uvurderligt værktøj til biologisk forskning.
Medium 199 har en række anvendelsesmuligheder inden for området. Det kan effektivt opretholde cumulus-oocyt-komplekset (COC) og understøtte in vitro-modning af oocytter. Derudover anvendes det til skylning af aspirationsslanger under ægopsamling fra tyske Holstein-køer. Desuden fungerer Medium 199 som et fremragende medium til dyrkning af hjerteendotelceller fra rotter. Disse anvendelser viser Medium 199's alsidighed og tilpasningsevne til forskellige eksperimentelle behov.
Historie
Udviklingen af Medium 199 i 1950'erne markerede et betydeligt fremskridt inden for vævskulturmedier. Før det blev introduceret, var mange dyrkningsmedier afhængige af produkter fra dyr og vævsekstrakter. Men Morgan og hans kolleger revolutionerede området ved at formulere en fuldstændig defineret ernæringskilde til cellekulturer. Gennem deres eksperimenter med forskellige kombinationer af vitaminer, aminosyrer og andre faktorer opdagede de de enestående vækstfremmende egenskaber ved Medium 199.
Kvalitetskontrol

pH = 7,2 +/
- 0,02 ved 20-25 °C.
Hvert parti er testet for sterilitet og fravær af mycoplasma og bakterier.

Vedligeholdelse

Opbevares på køl ved +2°C til +8°C i mørke. Frysning og opvarmning op til +37° C minimerer produktets kvalitet.
Opvarm ikke mediet til mere end 37 °C, og brug ikke ukontrollerbare varmekilder (f.eks. mikrobølgeovne).
Hvis kun en del af mediet skal bruges, skal du tage denne mængde ud af flasken og varme den op ved stuetemperatur.
Holdbarheden for alle medier undtagen basismediet er 8 uger fra fremstillingsdatoen.

Sammensætning




Komponenter
mg/L


Uorganiske salte
Calciumchlorid x 2H2O
264,92



Jern(III)-nitrat x 9H2O
0,72



Magnesiumsulfat
97,67



Kaliumklorid
400,00



Natriumacetat x 3H2O
82,95



Natriumklorid
6,800.00



Natriumdihydrogenfosfat x H2O
140,00


Andre komponenter
Adeninsulfat
10,00



AMP
0,20



ATP
1,00



Kolesterol
0,20



2'-Deoxyribose
0,50



D(+)-Glucose vandfri
1,000.00



Glutathion (rød)
0,05



Guanin x HCl
0,30



Hypoxanthin
0,30



Fenol rød
10,00



D-Ribose
0,50



Thymin
0,30



Tween 80
4,90



Uracil
0,30



Xanthin
0,30



NaHCO3
2,200.00


Aminosyrer
L-Alanin
25,00



L-Arginin x HCl
70,00



L-Asparaginsyre
30,00



L-Cystein x HCl x H2O
0,10



L-Cystein
20,00



L-Glutamin stabil
149,00



L-glutaminsyre
67,00



Glycin
50,00



L-Histidin x HCl x H2O
21,88



L-Hydroxyprolin
10,00



L-Isoleucin
20,00



L-Leucin
60,00



L-Lysin x HCl
70,00



L-Methionin
15,00



L-Phenylalanin
25,00



L-prolin
40,00



L-Serin
25,00



L-Threonin
30,00



L-Tryptofan
10,00



L-Tyrosin
40,00



L-Valin
25,00


Vitaminer
4-Amino benzoesyre
0,05



Ascorbinsyre
0,05



D(+)-Biotin
0,01



Calciferol
0,10



D-Calcium pantothenat
0,01



Cholinklorid
0,50



Folinsyre
0,01



myo-Inositol
0,05



Menadion
0,01



Nikotinsyre
0.025



Nikotinamid
0.025



Pyridoxal x HCl
0.025



Pyridoxol x HCl
0.025



Riboflavin
0,01



DL-α-tocopherolphosphat dinatriumsalt
0,01



Thiamin x HCl
0,01



Vitamin A-acetat
0,14

Accutase Cell Dissociation Reagent
- et skånsomt alternativ til Trypsin
Accutase er en celledissociationsopløsning, der er ved at revolutionere cellekulturindustrien. Det er en blanding af proteolytiske og kollagenolytiske enzymer, der efterligner virkningen af trypsin og kollagenase. I modsætning til trypsin indeholder Accutase ingen pattedyrs
- eller bakteriekomponenter og er meget mere skånsom mod cellerne, hvilket gør den til en ideel løsning til rutinemæssig løsrivelse af celler fra standard vævskultur-plasticware og plasticware med adhæsionsbelægning. I dette blogindlæg ser vi nærmere på fordelene og anvendelserne af Accutase, og hvordan det ændrer spillet inden for celledyrkning.
Fordele ved Accutase
Accutase har flere fordele i forhold til traditionelle trypsinopløsninger. For det første kan den bruges, når der er behov for skånsom og effektiv løsrivelse af en hvilken som helst klæbende cellelinje, hvilket gør den til en direkte erstatning for trypsin. For det andet fungerer Accutase ekstremt godt på embryonale og neuronale stamceller, og det har vist sig, at den opretholder disse cellers levedygtighed efter passage. For det tredje bevarer Accutase de fleste epitoper til efterfølgende flowcytometrianalyse, hvilket gør den ideel til analyse af celleoverflademarkører.
Derudover behøver Accutase ikke at blive neutraliseret, når adhærente celler passeres. Tilsætning af mere medie, når cellerne er delt, fortynder Accutase, så den ikke længere er i stand til at løsne cellerne. Dette eliminerer behovet for et inaktiveringstrin og sparer tid for cellekulturteknikerne. Endelig behøver Accutase ikke at blive alikvoteret, og en flaske er stabil i køleskabet i 2 måneder.
Anvendelser af Accutase
Accutase er en direkte erstatning for trypsinopløsning og kan bruges til passage af cellelinjer. Derudover fungerer Accutase godt, når man løsner celler til analyse af mange celleoverflademarkører ved hjælp af flowcytometri og til cellesortering. Andre downstream-anvendelser af Accutase-behandling omfatter analyse af celleoverflademarkører, virusvækstassay, celleproliferation, tumorcellemigrationsassays, rutinemæssig cellepassage, produktionsopskalering (bioreaktor) og flowcytometri.
Sammensætning af Accutase
Accutase indeholder ingen pattedyrs
- eller bakteriekomponenter og er en naturlig enzymblanding med proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet. Det er formuleret i en meget lavere koncentration end trypsin og kollagenase, hvilket gør det mindre giftigt og mere skånsomt, men lige så effektivt.
Effektiviteten af Accutase
Accutase har vist sig at være effektiv til at løsne primære celler og stamceller og opretholde en høj cellelevedygtighed sammenlignet med enzymer af animalsk oprindelse som trypsin. 100 % af cellerne gendannes efter 10 minutter, og det er ikke skadeligt at lade cellerne ligge i Accutase i op til 45 minutter takket være Accutases selvfordøjelse.
For at opsummere
Konklusionen er, at Accutase er en kraftfuld løsning, der ændrer spillet inden for cellekultur. Med sin skånsomme natur, effektivitet og alsidighed er Accutase det ideelle alternativ til trypsin. Hvis du er på udkig efter en pålidelig og effektiv løsning til cellefjernelse, er Accutase løsningen for dig.

Produktoversigt
Volumen: 100 ml Opbevaring: ≤-15°C Sterilitet: Sterilt filtreret
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) er et sterilt, brugsklart koncentrat, der er designet til at reducere risikoen for mikrobiel kontaminering i cellekulturer og relaterede laboratorieapplikationer. Denne 100x opløsning indeholder en veletableret kombination af penicillin, streptomycin og amfotericin B, der giver bredspektret antimikrobiel aktivitet mod grampositive og gramnegative bakterier, gær og filamentøse svampe. Formuleringen er velegnet til brug i eukaryote cellekulturer, bakteriemedier og andre forureningsfølsomme systemer, hvilket understøtter rene og ensartede laboratorieoperationer.
Anvendelse og fordele Denne løsning er optimeret til rutinemæssige forskningsprotokoller og bruges i vid udstrækning til at opretholde aseptiske forhold i arbejdsgange med cellekulturer. Den giver pålidelig ydeevne i kontamineringsfølsomme miljøer og hjælper forskere med at reducere risikoen for mikrobiel overvækst uden at gå på kompromis med cellernes sundhed eller forsøgets reproducerbarhed. Den sterilt filtrerede formulering eliminerer behovet for yderligere solubiliseringstrin, hvilket understøtter strømlinet medieforberedelse og reducerer variabiliteten i de daglige laboratorieprocedurer.
Anvendelse og kompatibilitet For at opnå standard arbejdskoncentrationer skal opløsningen fortyndes 1:100 i dit komplette kulturmedie. Produktet er kompatibelt med en bred vifte af pattedyrcellelinjer og basalmedier. Med konsekvent lagertilgængelighed drager forskere fordel af pålidelig forsyningskontinuitet og forenklet logistikplanlægning. Opløsningen skal opbevares ved ≤ -15 °C og beskyttes mod gentagne fryse-tø-cyklusser for at bevare stabiliteten. Kun til forskningsbrug. Ikke til brug i diagnostiske eller terapeutiske procedurer. Må ikke anvendes til mennesker eller dyr.

Fosfatbufferet saltopløsning (PBS)
Fosfatbufferet saltvand (PBS) er en meget anvendt bufferopløsning inden for biologisk og kemisk forskning. Den spiller en afgørende rolle i opretholdelsen af pH-balancen og osmolariteten under forskellige eksperimentelle procedurer, herunder vævsbehandling og cellekultur. Vores PBS-opløsning er omhyggeligt formuleret med ingredienser af høj renhed for at sikre stabilitet og pålidelighed i hvert eksperiment. Osmolariteten og ionkoncentrationerne i vores PBS efterligner nøje dem i menneskekroppen, hvilket gør den isotonisk og ugiftig for de fleste celler.

Sammensætning af vores PBS-opløsning
Vores PBS-opløsning er en pH-justeret blanding af ultrarene fosfatbuffere og saltopløsninger. Ved en 1X arbejdskoncentration indeholder den:

8000 mg/L natriumklorid (NaCl)
200 mg/L kaliumklorid (KCl)
1150 mg/L Natriumfosfat dibasisk vandfri (Na2HPO4)
200 mg/L Vandfri monobasisk kaliumfosfat (KH2PO4)

Denne sammensætning sikrer en optimal pH
- og ionbalance, der er velegnet til en lang række biologiske anvendelser.

Anvendelser af vores PBS-opløsning
Vores PBS-opløsning er ideel til forskellige anvendelser inden for biologisk forskning. Dens isotoniske og ikke-toksiske egenskaber gør den velegnet til fortynding af stoffer og skylning af cellebeholdere. PBS-opløsninger, der indeholder EDTA, er effektive til at løsne fastgjorte og sammenklumpede celler. Der bør dog ikke tilsættes divalente metaller som f.eks. zink til PBS, da det kan forårsage udfældning. I sådanne tilfælde anbefales Good's buffere. Derudover er vores PBS-opløsning et acceptabelt alternativ til viralt transportmedium til transport og opbevaring af RNA-vira, herunder SARS-CoV-2.

Kvalitetskontrol

Sterilt filtreret


Opbevaring og holdbarhed

Opbevares ved +2°C til +25°C, beskyttet mod lys.
Når den er åbnet, skal den opbevares ved 2 °C til 25 °C og bruges inden for 24 måneder.


Betingelser for forsendelse

Omgivelsestemperatur


Vedligeholdelse

Opbevares på køl ved +2 °C til +8 °C i mørke. Undgå frysning og hyppig opvarmning til +37 °C, da det forringer produktkvaliteten.
Opvarm ikke mediet til mere end 37 °C, og brug ikke ukontrollerede varmekilder som f.eks. mikrobølgeovne.
Hvis kun en del af mediet skal bruges, skal du fjerne den nødvendige mængde og varme den op til stuetemperatur før brug.

Sammensætning



Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)


Salte
Kaliumklorid
200



Vandfrit monobasisk kaliumfosfat
200



Natriumklorid
8000



Natriumfosfat dibasisk vandfri
1150