Hep-56.1D-celler
800,00 €*
Produkterne leveres frosne på tøris i kryorør. Hvert kryorør indeholder typisk 3 × 10 6 celler til adhærente linjer eller 5 × 106 celler til suspensionslinjer (se batch-COA for detaljer).
Generel information
| Beskrivelse | Hep-56.1D-hepatomcellelinjen stammer fra en muselevertumor, specifikt fra C57BL/6J-musestammen. Denne cellelinje er kendetegnet ved en bemærkelsesværdig mutation i p53-genet, der er identificeret ved forskellige passager under in vitro-opformering. Specifikt udviser Hep-56.1D en C:G til G:C-transversion ved codon 132 i exon 5, hvilket resulterer i en aminosyreændring fra cystein til tryptofan. Denne mutation blev opdaget ved passage nummer 17, hvilket tyder på en selektiv vækstfordel, som mutationen giver, og som fører til dens overvægt i cellepopulationen. Hep-56.1D-cellelinjen har en overvejende epitelial morfologi, som afspejler dens hepatocytiske oprindelse. Dette er i overensstemmelse med dens intermediære filamentproteinprofil, som omfatter de simple keratiner K8 og K18 samt vimentin og keratin K19 i varierende grad. Tilstedeværelsen af disse proteiner bekræfter cellelinjens hepatocytiske natur og dens klassificering som en hepatomlinje. Yderligere analyse af Hep-56.1D ved hjælp af DNA-fingeraftryk afslørede ingen større strukturelle abnormiteter, selvom der blev observeret nogle ændringer i de relative intensiteter af specifikke bånd med stigende antal passager. Dette indikerer genomisk stabilitet med en vis grad af variabilitet over længere dyrkningsperioder. Analysen af p53-mutationer og ekspressionsmønstre for intermediære filamentproteiner etablerer tilsammen Hep-56.1D som en værdifuld model til undersøgelse af hepatocellulært karcinom og p53-mutationers rolle i tumorgenese i leveren. |
|---|---|
| Organisme | Mus |
| Væv | Lever |
| Sygdom | Hepatocellulært karcinom |
| Synonymer | HEP-56.1D, 56.1D, 56.1d |
Karakteristika
| Race/underart | C57BL/6J |
|---|---|
| Alder | Voksen |
| Køn | Kvinde |
| Morfologi | Epitel-lignende |
| Vækstegenskaber | Vedhæftende |
Regulatoriske data
| Citat | Hep-56.1D (Cytion katalognummer 400204) |
|---|---|
| Biosikkerhedsniveau | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5769 |
Biomolekylære data
| Protein-ekspression | Keratin 8, Keratin 18, Vimentin. |
|---|---|
| Tumorigen | Ja, i C57BL/6J-mus. I den tredje uge udvikles tumorer, som er ca. 5-6 mm i diameter. |
| Ploidi-status | Aneuploid |
| Mutationsprofil | P53mut, C:G -+ G:C-transversion ved codon 132 i musens p53 exon 5, hvilket svarer til en aminosyreændring fra cystein til tryptofan. |
Håndtering
| Kulturmedium | DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a) |
|---|---|
| Kosttilskud | Suppler mediet med 10% FBS |
| Dissociationsreagens | Accutase |
| Fordoblingstid | 25 til 30 timer |
| Subkulturer | Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium. |
| Såtæthed | 1 til 2 x 104 celler/cm2 under rutinemæssig dyrkning |
| Fornyelse af væske | Hver 3. til 4. dag |
| Genopretning efter optøning | >90 % af cellerne blev gendannet fra fryseprocessen inden for 24 til 48 timer |
| Frys medium | Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress. |
| Optøning og dyrkning af celler |
|
| Inkubationsatmosfære | 37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære. |
| Overfladebehandling af flasker | Ingen |
| Fryseprocedure | Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring. |
| Forsendelsesbetingelser | Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring. |
| Opbevaringsforhold | For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen. |
Kvalitetskontrol / Genetisk profil / HLA
| Sterilitet | Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder. For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner. |
|---|
Analysecertifikat (COA)
| Partiets nummer | Certifikatets type | Dato | Katalognummer |
|---|---|---|---|
| 400204-821 | Certifikat for analyse | 23. May. 2025 | 400204 |
Aftale om overførsel af materiale
Hvis du kun vil bruge Cytion-cellelinjer til intern forskning på et enkelt forskningssted, skal du udfylde og underskrive vores materialeoverførselsaftale (MTA) og sende den sammen med din ordre.
Ved kommerciel anvendelse – herunder, men ikke begrænset til, arbejde mod betaling, kvalitetskontrol, produktfrigivelse, diagnostisk brug eller regulatoriske undersøgelser – bedes du udfylde formularen til tilsigtet brug, så vi kan udarbejde en aftale, der er skræddersyet til dit projekt.
Bemærk: MTA gælder kun for visse cellelinjer. Hvis denne meddelelse og MTA-dokumentet vises på en produktside, er aftalen gældende. For cellelinjer, der ikke er omfattet af MTA, vises der ingen henvisning til aftalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vores amerikanske afdeling for at modtage den relevante aftale.