SiHa细胞——为宫颈癌研究指明方向
SiHa细胞是一种广泛应用于生物医学研究的宫颈癌细胞系。它们是极佳的转染宿主,因此非常适合用于基因表达研究。由于其源自人类且与宫颈癌密切相关,这些细胞主要用于癌症生物学、病毒学以及药物研发研究。
- 培养基
- 为确保 SiHa 细胞的理想生长,应使用含有 10% 胎牛血清(FBS)、2 mM L-谷氨酰胺、2.2 g/L NaHCO₃ 以及厄尔平衡盐溶液(EBSS)的鹰氏最低必需培养基(EMEM)。 培养基每周更换 2 至 3 次。
- 倍增时间
- SiHa细胞的倍增时间约为17小时。
- 生长类型
- SiHa 是一种贴壁细胞系。
- 生物安全等级
- BSL-1
- 可从以下处获取
- Cytion — 订购 SiHa
SiHa细胞的一般特征与来源
了解细胞系的来源和一般特性至关重要,因为这会影响其在您研究中的应用。在本节中,您将了解SiHa细胞系的来源、独特特征以及更多信息:什么是SiHa癌细胞系? SiHa细胞是否与HPV相关?SiHa细胞系的来源是什么?SiHa的形态特征如何?
- SiHa是一种宫颈癌细胞系,源自一名患有鳞状细胞癌的亚洲女性(55岁)的原发性子宫活检组织碎片[1]。
- SiHa细胞系表现为超三倍体核型。大多数细胞的平均染色体数在69至72之间。然而,约24%的细胞具有71条染色体的模态数。
- SiHa细胞对人乳头瘤病毒16型呈阳性。每细胞内约整合有1至2份HPV基因组[2]。
- 这些宫颈癌细胞呈现上皮形态。
SiHa细胞系:培养信息
除非掌握了培养该细胞系的所有关键要点,否则维持细胞系培养并非易事。您需要了解:SiHa细胞的倍增时间是多少?SiHa细胞培养基是什么?如何培养SiHa细胞系?
SiHa细胞培养的关键要点
倍增时间:
SiHa细胞的倍增时间约为17小时。
贴壁型还是悬浮型:
SiHa是一种贴壁细胞系。
传代倍数:
SiHa细胞的传代倍数为1:2至1:4。传代时,先用1×PBS冲洗贴壁细胞。加入Accutase溶液,并在室温下孵育8至10分钟。 随后加入培养基,并将细胞离心。将细胞沉淀重新悬浮,然后将细胞倒入新的培养瓶中进行培养。
生长培养基:
为使SiHa细胞获得最佳生长,应使用含10%胎牛血清(FBS)、2 mM L-谷氨酰胺、2.2 g/L NaHCO₃及Earle平衡盐溶液(EBSS)的Eagle最小必需培养基(EMEM)。 每周更换培养基2至3次。
培养条件:
SiHa细胞在37°C、加湿且通入5% CO₂的培养箱中维持培养。
保存:
冷冻的SiHa宫颈癌细胞系小瓶应储存在-150°C以下的电冻柜中,或长期保存在液氮的汽相中。
冷冻过程与培养基:
SiHa细胞的冷冻使用CM-1或CM-ACF冷冻培养基。采用慢速冷冻法进行冷冻,温度每分钟仅下降1°C,以保护细胞的存活率。
解冻过程:
将冷冻细胞置于37°C水浴中40至60秒,直至仅剩一小块冰团。随后加入新鲜培养基,并对细胞进行离心处理以去除冷冻培养基成分。将细胞沉淀重新悬浮,并分装至培养瓶中进行培养。
生物安全等级:
处理和维护SiHa细胞培养物需在1级生物安全实验室中进行。
SiHa细胞系的优缺点
与其他人类癌细胞系一样,SiHa 细胞系也具有一些与特定优缺点相关的显著特征。本文将讨论其中几个重要的方面。
SiHa宫颈癌细胞系的优点
- 宫颈癌模型
- 源自宫颈鳞状细胞癌。
- 用于研究宫颈癌的发病机制、生长和进展。
- 表达与DNA修复、细胞周期调节和肿瘤抑制相关的p53+和pRB+基因。
- 致瘤性
- SiHa细胞具有致瘤性,可在裸鼠体内诱导出分化不良的III级鳞状细胞肿瘤。
- 用于体内癌症研究和抗癌治疗的测试。
SiHa细胞的缺点
- 增殖率
- SiHa 细胞增殖迅速,会导致过度增殖。
- 需要频繁传代,从而增加了遗传不稳定的风险,这可能会随着时间的推移影响细胞的行为。
SiHa细胞的研究应用
SiHa细胞系在宫颈癌研究中得到广泛应用。本文将讨论该细胞系的若干具体应用。
- 人乳头瘤病毒(HPV)相关研究:SiHa细胞为HPV 16阳性,因此是研究人乳头瘤病毒感染、其分子机制以及其在宫颈癌发生和发展中的作用的宝贵模型。研究人员还利用这些细胞研究病毒的复制、整合及其对宿主细胞过程的影响。 2020年的一项研究利用SiHa细胞系,通过CRISPR技术靶向HPV E6/E7致癌蛋白,以探究其在宫颈癌发生发展中的作用。研究结果表明,敲低E6/E7基因会导致SiHa细胞生长受抑制并发生凋亡。 因此,这些病毒基因可能成为开发针对HPV相关宫颈癌疗法的重要药物靶点[3]。
- 癌症生物学:SiHa细胞是研究宫颈癌生物学(包括癌症发生、进展、转移和侵袭)的宝贵模型。 研究人员利用这些细胞探索导致宫颈癌发生和生长的基因突变及潜在分子通路,例如,一项研究利用 SiHa 细胞发现,上调的 SEC61G(SEC61 转运体 γ 亚基)通过激活 MAPK 级联反应促进宫颈癌细胞增殖 [4]。
- 药物筛选与测试:SiHa是一种广泛用于评估针对HPV相关宫颈癌的潜在抗癌药物疗效的宫颈癌细胞系。 研究人员利用这些细胞探索药物的抗增殖、诱导凋亡和抗转移潜力。例如,2019年进行的一项研究调查了Vatica diospyroides Symington Type SS果实提取物对SiHa宫颈癌细胞系的细胞毒性潜力[5]。
SiHa细胞,助您开展研究!
以SiHa细胞为研究对象的科研论文
一些重要且被广泛引用的研究论文以SiHa宫颈鳞状细胞癌细胞系为研究对象。
芦荟大黄素对宫颈癌细胞的抗肿瘤作用与人乳头瘤病毒E6/E7及葡萄糖代谢相关
发表于《OncoTargets and Therapy》(2019年)的这篇论文提出,天然化合物芦荟大黄素在SiHa宫颈癌细胞中通过与HPV E6/E7及葡萄糖代谢相关的机制发挥凋亡作用。
Excoecaria agallocha (L.) 叶提取物对人宫颈癌(SiHa)细胞系的抗癌潜力评价及其作用机制研究
该文章于2022年发表在《未来药学杂志》(Future Journal of Pharmaceutical Sciences)上。本研究探讨了Excoecaria agallocha (L.)植物叶提取物在SiHa宫颈癌细胞系中的抗肿瘤活性。
1,10-菲啰啉与硫酸化ZnO纳米颗粒偶联后对SiHa宫颈癌细胞系的抗增殖作用
这项发表于《溶胶-凝胶科学与技术杂志》(2022年)的研究提出,1,10-菲啰啉分子与硫酸锌纳米颗粒结合后,在SiHa细胞中表现出显著的抗增殖作用。
黄芪苷IV通过TGF-β1介导的PI3K和MAPK通路抑制SiHa宫颈癌细胞的侵袭和转移
该研究于2019年发表在《肿瘤学报告》上。研究表明,天然产物黄芪苷IV通过调节TGF-β1介导的PI3K和MAPK信号通路,抑制SiHa细胞的迁移和侵袭。
IFI16通过STING-TBK1-NF-κB通路在免疫微环境中上调PD-L1,从而促进宫颈癌进展
发表于《生物医学与药理治疗》(Biomedicine & Pharmacotherapy,2020年)的这项研究表明,IFI16(干扰素-γ诱导蛋白16)通过激活STING-TBK1-NF-kB通路来调控PD-L1基因,从而促进SiHa宫颈癌细胞的生长。
SiHa宫颈癌细胞常见问题解答
参考文献
- Melzer, C., J. von der Ohe 和 R. Hass,《简要综述:间充质基质/干细胞样细胞与癌细胞之间的相互作用具有治疗潜力》。《干细胞》,2018年,36(7):第951-968页。
- Ostrowska, K.M. 等,利用振动光谱法研究高危型人乳头瘤病毒对宫颈癌细胞生化组成的影响。《分析家》,2010,135(12):第3087-3093页。
- 陈,Y. 等,CRISPR/Cas13a系统通过剪切人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA抑制人宫颈癌细胞的体外和体内增殖。《抗病毒研究》,2020年,178期:第104794页。
- 范,Y. 等,SEC61G 通过激活 MAPK 信号通路促进宫颈癌增殖。《疾病标志物》,2022。2022。
- Chothiphirat, A. 等,Vatica diospyroides symington type SS 果实提取物的抗癌潜力及其对宫颈癌细胞系程序性细胞死亡的影响。《科学世界杂志》,2019。2019。
