PC-12 细胞 - PC-12 细胞在神经生物学和神经研究中的影响
PC-12是一种用于神经生物学研究的永生化大鼠神经细胞系。它是研究神经细胞分化和增殖的重要研究工具。此外,研究人员还利用这些细胞研究神经生理学、细胞信号通路和神经毒性。此外,它们还被用于药物测试和开发研究。
PC-12 细胞系的一般信息和起源
在开始工作之前,了解细胞系的一般属性和起源至关重要。本节将帮助您了解有关 PC12 细胞系的重要信息。在这里,您将了解嗜铬细胞瘤中的 PC12 细胞系是什么?PC12 细胞是如何分化的?PC12 的起源是什么?PC12 细胞的大小是多少?
- PC12 神经元细胞类似于胎儿神经元的原代培养。它们取自大鼠肾上腺髓质的嗜铬细胞瘤。这些细胞起源于胚胎,类似于嗜酸性细胞和神经母细胞的混合物[1]。
- PC12 细胞具有儿茶酚胺细胞的功能。它们能合成、储存和分泌多巴胺和去甲肾上腺素。
- 嗜铬细胞瘤(PC12)细胞直径为 10 到 12 µm。
- PC-12 细胞的形态呈多边形。
- PC-12 细胞的染色体数目均匀且接近二倍体(n=40)。
培养 PC-12 细胞
PC12 细胞系神经元模型广泛用于神经科学研究。您应了解以下要点,以便轻松有效地进行培养。本节将介绍 PC-12 培养基、倍增时间、播种密度、细胞培养方案和条件。
PC-12 细胞培养要点
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群体倍增时间: |
PC-12 细胞的倍增时间约为 40 小时。 |
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粘附或悬浮: |
PC12 神经元细胞在悬浮液中呈小团块生长。它们在无涂层表面的附着力很差,在胶原蛋白上会形成斑块。 |
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播种密度: |
PC12 细胞系的细胞播种密度保持在 1 x104 个细胞 /平方厘米 。悬浮时,用移液管将细胞从基质中移出,并加入新鲜的培养液。要获得单细胞,可将细胞穿过 22 号针头,然后倒入新的烧瓶中。对于生长在胶原上的细胞,用 PBS 冲洗细胞,并在传代溶液(TrypleExpress)中培养 10 分钟。然后,加入新鲜培养基并离心细胞。然后,小心重悬细胞团,并将细胞分装到培养皿中。 |
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生长培养基: |
PC 12 细胞系的培养基为 RPMI 1640,含 10%胎牛血清、2.1 mM 稳定谷氨酰胺和 2.0 g/L NaHCO3。培养基每周更新 2 至 3 次。 |
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生长条件: |
PC-12 培养物在 37°C 加湿培养箱中培养,提供 5% 的二氧化碳。 |
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储存: |
PC-12 细胞在液氮气相或低于 -150°C 的温度下储存,以长期保持细胞活力。 |
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冷冻过程和培养基: |
PC12 细胞冷冻使用 CM-1 或 CM-ACF。采用缓慢冷冻法,使温度下降 1°C。这可防止细胞受到任何冲击,并保持其活力。 |
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解冻过程: |
将冷冻的 PC-12 细胞在 37°C 水浴中解冻。然后,将细胞加入新鲜培养基并离心。这有助于去除冷冻培养基成分。收集的细胞重新悬浮并分配到装有新鲜生长培养基的烧瓶中。冷冻恢复需要近 24 小时。 |
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生物安全等级: |
培养 PC12 神经元细胞需要 1 级生物安全实验室。 |
PC-12 细胞系:优势与局限
PC-12 细胞系具有一些区别于其他神经元细胞系的显著特征。本节将深入探讨在研究中使用该细胞系的优势和局限性。
优点
- 易于培养:PC-12 细胞生长健壮,相对容易培养,因此可用于各种实验室环境和研究目的。
- 神经元分化:它们可被诱导分化成神经元样细胞,是研究神经发育、分化和神经发生相关过程的绝佳模型。
- 研究用途广泛:PC-12 细胞可用于广泛的神经生物学研究,包括神经毒性、神经保护和神经退行性疾病的机制。
- 转染效率高:PC-12 细胞的转染效率高,便于进行基因操作,因此适用于涉及基因表达和功能的研究。
局限性
- 非人类来源:它们源自大鼠嗜铬细胞瘤,非人类来源限制了它们在某些特定人类研究领域的适用性,而且可能无法完全代表人类神经生理学。
- 异质性:分化后的 PC-12 细胞在形态和功能上会表现出明显的异质性,这可能会使实验结果的解释复杂化。
- 寿命有限:虽然 PC-12 细胞比较容易培养,但其寿命有限,这可能会给长期实验带来挑战。
PC-12 细胞系:神经生物学和癌症研究的多功能工具
PC12 细胞系源自大鼠嗜铬细胞瘤,在神经生物学研究中发挥着举足轻重的作用,因其神经元特征表达(如神经元对神经生长因子(NGF)的反应)而备受赞誉。PC12 细胞的多功能性在神经生物学中被广泛用于探索神经分化、对神经营养因子的反应以及神经毒性评估。PC12 细胞在接触 NGF 后会分化成神经元样细胞,这种独特的分化倾向使它们成为研究人员探索神经系统复杂性不可或缺的资产。
神经再生与细胞分化
有趣的是,一项研究探讨了牙髓干细胞及其衍生因子对PC12细胞分化、存活和扩增的影响,为神经再生揭开了前景广阔的道路[3]。另一项调查强调了骨钙素(一种以钙结合能力著称的骨源性蛋白质)对PC12细胞存活、增殖和分化的促进作用[4],凸显了该蛋白质在增强神经元属性方面的潜力。
药物筛选和神经保护
PC12 细胞的效用延伸到药物筛选,特别是用于评估神经保护和神经退行性化合物,标志着寻求新型神经退行性疾病治疗方法的关键阶段。例如,研究强调了 α-二羟基苯并咪唑在使用 PC12 细胞的帕金森病模型中的神经保护特性,证明 α-二羟基苯并咪唑能够减轻淀粉样蛋白生成和细胞凋亡,同时还能调节 β 淀粉样蛋白的神经毒性效应 [5]。
细胞转化和神经网络
PC-12 细胞向神经元样实体分化的过程始于 NGF,这是一种对神经元生长和存活至关重要的蛋白质。PC-12 细胞暴露于 NGF 会激活复杂的细胞内通路,为其转化奠定基础。这种蜕变是细胞潜能的逐步显现,在显微镜下可以观察到细胞延伸神经元并形成类似神经元网络的连接。
形态变化和神经元表型
分化使 PC-12 细胞的形态和功能发生了重大转变。PC-12 细胞最初呈圆形或略微拉长,在悬浮液或粘附单层中生长,经 NGF 处理后,它们表现出延伸的神经元,标志着向神经元表型的深刻转变。这些神经元突起对细胞间的交流和互动至关重要,反映了神经元组织固有的连通性。
癌症研究与细胞机制
在癌症研究中,PC12 细胞提供的神经元模型因其肿瘤起源而具有相关性。这些细胞有助于研究癌细胞的增殖、侵袭和迁移机制。2020 年的一项研究探讨了阿魏提取物对 PC12 细胞增殖的影响,揭示了其潜在的治疗应用[7]。
中风研究与神经保护策略
此外,PC12 ADH 细胞是一种粘附在培养表面的变异细胞,可以深入分析细胞形态和对缺氧-缺糖等刺激的反应,是脑卒中研究和神经保护剂评估的重要模型。PC12 细胞的快速倍增时间从 24 小时到 48 小时不等,这突显了它们在细胞增殖率至关重要的动态研究中的功效。
PC12 细胞应用结语
从本质上讲,PC12 细胞及其衍生物是一种多功能模型,可广泛应用于神经生物学、药物发现和癌症研究等领域。每种应用都提供了对细胞反应的重要见解,为治疗创新铺平了道路,并增进了我们对复杂生物过程的了解。
获得稳健、多用途的 PC-12 细胞系:神经元研究的理想选择,易于培养
利用 PC-12 细胞进行的重点研究
PC-12 细胞来源于大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤,是神经生物学中广泛使用的模型,可深入了解神经分化、神经毒性等。以下是一些以这些细胞为研究对象的著名研究:
- 咖啡酸苯乙酯(CAPE)与 PC-12 细胞的神经保护:这项2017年发表在《神经毒性研究》(Neurotoxicity Research)杂志上的研究调查了CAPE如何减轻PC-12细胞中顺铂诱导的神经毒性,提出了一种潜在的外周神经病变治疗方法。
- 磷虾油对 PC-12 细胞的神经保护作用:这项研究发表在2018年的《营养研究》(Nutrition Research)上,探讨了磷虾油针对甲基苯丙胺诱导的PC-12细胞毒性的神经保护特性,强调了磷虾油在对抗氧化应激和细胞凋亡方面的潜力。
- 美洲芹花提取物与PC-12细胞神经毒性》(Apios Americana Medik Flowers Extract and PC-12 Cell Neurotoxicity):这篇2019年《食品与化学毒理学》(Food and Chemical Toxicology)文章展示了美洲芹花提取物如何通过调节自噬过程来保护PC-12细胞免受H2O2诱导的损伤。
- 血管紧张素II在PC-12细胞自噬和凋亡中的作用:脑研究》(Brain Research)杂志2019年发表的这项研究深入探讨了血管紧张素II如何触发PC-12细胞的自噬和凋亡,为阿尔茨海默病研究提供了一个模型。
- 评估单油酸甘油酯纳米颗粒在 PC-12 细胞中的毒性:这项研究于 2018 年在《国际制药学杂志》(International Journal of Pharmaceutics)上发表,评估了单油酸甘油酯纳米颗粒的毒性,为其在神经应用方面的安全性提供了见解。
PC-12 细胞研究的综合资源
访问各种资源,深入了解和操作 PC-12 细胞,包括细胞培养技术、分化方案等:
- PC-12 细胞分化指南》:这篇文章全面概述了 PC12 细胞 NGF 分化方案,包括与分化相关的检测方法。
- PC-12 细胞转染视频教程:通过这个详细的视频指南了解 PC12 细胞转染的复杂性,是新手和有经验的研究人员的理想选择。
- 掌握 PC-12 细胞培养:通过本综合方案深入了解 PC-12 细胞亚培养的细微差别,这对维持健康的细胞培养至关重要。
PC-12 细胞系常见问题解答:关于培养、分化和研究应用的见解
参考文献
- Wu, C., et al.,淫羊藿苷通过抑制内质网应激促进 PC12 细胞的修复。BMC Complement Med Ther, 2021.21(1): p. 69.
- Sultan, N. 等人,牙髓干细胞刺激 PC12 细胞的神经元分化。神经再生研究》,2021 年。16(9): p. 1821.
- Ando, E., et al.,Osteocalcin promotes proliferation, differentiation, and survival of PC12 cells.Biochemical and Biophysical Research Communications, 2021.557: p. 174-179.
- Shanmuganathan, B., et al.,α-二苯酚对 PC12 细胞 Aβ 诱导的神经毒性的抗淀粉样蛋白生成和抗凋亡作用。欧洲药物化学杂志》,2018.143: p. 1196-1207.
- Fujita, K., P. Lazarovici, and G. Guroff,Regulation ofthedifferentiation of PC12 pheochromocytoma cells.Environ Health Perspect, 1989.80: p. 127-42.
- Abroudi, M. 等人,阿魏提取物对 PC12 和 MCF7 癌细胞的抗增殖作用。Int J Biomed Engg Clin Sci,2020.6(3): p. 60-67.