NCI-H460细胞——借助NCI-H460研究成果推进肺癌研究

NCI-H460 细胞培养信息

为正确处理和维护 NCI-H460 细胞系，您应了解以下要点。本文将介绍 NCI-H460 的倍增时间、NCI-H460 培养基以及 NCI-H460 肺癌细胞的基本培养流程。

NCI-H460细胞培养要点

倍增时间：

NCI-H460细胞的倍增时间约为33小时。

贴壁型还是悬浮型：

NCI-H460肺癌细胞为贴壁型。

传代比例：

NCI-H460细胞系推荐的分传比例为1:2和1:4。清除旧培养基后，用1×磷酸盐缓冲盐水冲洗贴壁细胞。 随后，将细胞在室温下用Accutase传代溶液孵育8至10分钟。将解离后的细胞重新悬浮于培养基中并离心。收集到的细胞再次悬浮后，倒入新的培养瓶中进行培养。

生长培养基：

RPMI 1640用作NCI-H460细胞培养基。其中添加10%胎牛血清、2.1 mM稳定谷氨酰胺和2.0 g/L NaHCO₃。培养基应每周更换2至3次。

培养条件：

NCI-H460细胞培养在37°C的加湿培养箱中进行，并持续供应5%的二氧化碳。

保存：

NCI-H460肺癌细胞可长期保存在液氮的蒸汽相中，或存放在温度低于-150°C的电动超低温冷冻柜中。

冷冻过程与培养基：

使用 CM-1 或 CM-ACF 培养基对 NCI-H460 细胞进行冷冻保存。建议采用慢速冷冻法，以最大限度地保护细胞存活率。

解冻过程：

将冷冻的 NCI-H460 细胞置于预热的水浴中（37°C）解冻 40 至 60 秒，直至仅剩一小块冰块。 向解冻后的细胞中加入新鲜培养基，并进行离心以去除冷冻培养基中的成分。收集细胞沉淀后重新悬浮，并将细胞分装至装有培养基的新培养瓶中进行培养。NCI-H460细胞可能需要近24小时才能附着在培养瓶表面。

生物安全等级：

NCI-H460肺癌细胞在生物安全1级实验室中进行操作和培养。

发布日期：2023年 | 最后审阅日期：2026年5月

NCI-H460细胞的优缺点

NCI-H460是肺癌研究中广泛使用的细胞系。本节将介绍与NCI-H460肺癌细胞相关的总体优缺点。

优点

NCI-H460非小细胞肺癌细胞系的优点包括：

• 肿瘤来源

  NCI-H460细胞系源自一名大细胞肺癌患者，代表了这一特定类型的肺癌。该细胞系被用作研究肺癌生物学及开发新型有效治疗方法的模型。 NCI-H460细胞具有致瘤性，可注射到免疫缺陷小鼠体内，以建立体内肿瘤模型，用于研究肿瘤的生长、发展以及潜在药物的疗效。

• 高增殖率

  与其他非小细胞肺癌细胞系（如 A549）相比，NCI-H460 表现出更高的增殖速率。这一优势提高了其可用性，并有助于研究人员开展可重复且对时间敏感的实验。

缺点

NCI-H460肺癌细胞的缺点包括：

• 同质性

  由于 NCI-H460 细胞源自单一患者的肿瘤，因此具有高度同质性。正因如此，它们通常缺乏患者肿瘤中常见的复杂性和异质性。

NCI-H460细胞的研究应用

NCI-H460肺癌细胞被广泛应用于与肺癌相关的研究中。以下是NCI-H460细胞的一些重要研究应用：

• 肺癌研究：NCI-H460细胞是探究肿瘤发生、生长和转移过程中相关细胞及分子机制的宝贵模型。此外，它还被用于研究与肺癌进展相关的关键信号通路、分子靶点以及各种基因突变。 已有多项针对 NCI-H460 细胞的研究，旨在有效探究这些因素。 2019年的一项研究提出，过表达的核泛素化酪蛋白和周期蛋白依赖性激酶底物（NUCKS）通过调节PI3K/AKT信号通路参与肿瘤细胞的生长[1]。 同样，一项体外和体内研究利用NCI-H460细胞探讨了eIF4E基因的作用。研究结果表明，eIF4E基因参与肺癌的生长和血管生成，可作为开发有前景的抗肺癌药物的靶点[2]。
• 药物发现与开发：NCI-H460作为一种人肺癌细胞系，被广泛应用于药物发现与开发研究中。研究人员利用这些细胞来评估新型候选药物、靶向疗法以及主要针对NCI-H460 KRAS突变的治疗方案的毒性和疗效。 2023年，胡浩月及其同事开展的一项研究利用NCI-H460细胞，探讨了安洛替尼（anlotinib）的抗癌效应。 结果表明，安洛替尼通过抑制MEK/ERK信号级联反应，部分影响了KRAS突变型肺癌细胞的生长[3]。同样，研究人员还利用NCI-H460细胞对酚类化合物——肉豆蔻酸进行了抗增殖和促凋亡活性的筛选[4]。
• 耐药性：NCI-H460细胞系是研究肺癌耐药机制的理想模型。研究人员利用这些细胞构建耐药模型，以鉴定相关的基因、分子因子和信号通路。 例如，一项研究利用对培美曲塞（一种多靶点抗叶酸药物）产生耐药性的NCI-H460细胞，探讨了非小细胞肺癌细胞中培美曲塞耐药性的潜在分子机制[5]。

以NCI-H460细胞为研究对象的科研论文

以下是一些关于NCI-H460肺癌细胞系的有趣研究论文。

黑豆中的一种天然葡聚糖通过PI3K-Akt和MAPK通路抑制癌细胞增殖

发表于《Molecules》（2023年）的这项研究提出，黑豆中的一种天然α-1,6-葡聚糖BBWPW可通过调节PI3K/AKT/MAPK通路来抑制NCI-H460细胞的增殖。

6′-O-乙酸二奥辛通过诱导细胞周期 arrest 和半胱天冬酶依赖性凋亡抑制肺癌细胞增殖

发表于《植物医学》（Phytomedicine，2019年）的这篇文章研究表明，一种新型天然化合物——迪奥辛-6′-O-乙酸酯，对NCI-H460肺癌细胞具有抗增殖作用。

miRNA-425-5p通过PTEN/PI3K/AKT信号轴促进肺癌生长

《BMC Pulmonary Medicine》（2020年）的研究指出，微RNA-425-5p通过PTEN/PI3K/AKT通路促进肺癌的肿瘤发生。

喹利扎林通过调节Akt、MAPK、STAT3和p53信号通路对A549肺癌细胞发挥抗肿瘤作用

发表于《分子医学报告》（2017年）的这篇文章提出了喹纳利嗪化合物在NCI-H460及其他肺癌细胞中的抗肿瘤潜力及其潜在机制。

Eucalyptus globulus Labill. 煎剂提取物通过提高p53水平并改变细胞周期谱来抑制NCI-H460细胞的生长

发表于《食品与功能》（2019年）的这项研究，以NCI-H460细胞为模型，突出了桉树（Eucalyptus globulus Labill.）提取物的潜在抗癌效应。研究结果表明，该植物提取物通过提高NCI-H460细胞中p53的表达并调节细胞周期谱，从而发挥上述作用。

NCI-H460细胞系相关资源：实验方案、视频等

以下是一些关于NCI-H460肺癌细胞的在线资源。

• NCI-H460细胞转染：本视频教程详细介绍了使用质粒DNA转染NCI-H460细胞的分步操作指南。

以下链接包含关于 H460 细胞的必备细胞培养信息。 

• NCI-H460细胞：该网站将提供有关NCI-H460细胞培养基、传代、冷冻及解冻操作的重要信息。
• NCI-H460细胞传代：本文档将指导您进行NCI-H460细胞系的传代和亚传代。此外，它还将帮助您了解NCI-H460细胞的转染方案。

参考文献

1. Hu, C., et al.，《NUCKS 通过 Pi3k/Akt 信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭》。临床与研究医学》，2021 年。44(2): p. E55-61.
2. Qi, X., et al.，新型 eIF4E/eIF4G 相互作用抑制剂 EGPI-1 通过 Ras/MNK/ERK/eIF4E 信号通路抑制肺癌细胞生长和血管生成。Chemico-Biological Interactions, 2022.352: p. 109773.
3. Hu, H., et al.，Anlotinib通过抑制MEK/ERK通路对KRAS突变肺癌细胞发挥抗癌作用。癌症管理与研究》，2020 年：第 3579-3587 页。
4. Corveloni, A.C., et al.，《卡诺酸在肿瘤NCI-H460和非肿瘤IMR-90肺细胞中表现出抗增殖和促凋亡作用》。毒理学与环境健康杂志》，A 部分，2020 年。83(10): p. 412-421.
5. Xu，Y.-L.等，培美曲塞耐药 NCI-H460/PMT 细胞的建立与表征。药物化学中的抗癌药物》（原《当前药物化学-抗癌药物》），2019.19(6): p. 731-739.