HT-29 细胞系
HT-29是一种人类结直肠癌细胞系,具有广泛的癌症和毒理学研究用途。例如,这些细胞对结肠直肠癌的标准化疗敏感。此外,HT-29 细胞系是一种特性良好的体外模型,可用于研究肠上皮细胞对细菌感染的反应。HT-29 细胞模拟了成熟肠细胞(即肠细胞)的特征,因此适用于附着和机理研究。
本文将涵盖在使用 HT-29 细胞系之前需要了解的所有方面。主要包括
1.HT-29 细胞:起源和一般信息
在使用任何细胞系之前,您都应该了解该细胞系的一般特征和起源。本节将帮助您了解:什么是 HT-29 细胞?HT-29 是结直肠癌细胞系吗?HT-29 细胞的形态是怎样的?
什么是 HT-29 细胞系? HT-29 是由 Trempe 和 Fogh 于 1964 年建立的结直肠腺癌细胞系。这种细胞最初来源于一名患有结直肠腺癌的白种女性(44 岁)的原发肿瘤[1]。自建立以来,该细胞系一直被用于研究癌症的生物学特性。
HT-29 细胞的形态: HT-29 细胞系一般具有上皮样形态。分化的细胞呈单层生长,形成紧密的细胞-细胞连接,并具有顶端刷状缘。如果这些细胞在葡萄糖缺乏的培养基中生长,或给予丁酸盐或酸等诱导剂,它们就会表现出肠细胞样特征。
细胞大小: HT-29 大肠癌细胞系的直径为 11 μm。
基因组和倍性: HT-29 细胞系的染色体模数为 71。其范围可能在 68-72 之间。此外,HT-29 细胞的染色体数为超三倍体,其中 2S 成分的比率为 2.4%。
什么是 HT29 MTX? HT29 MTX 是一种耐甲氨蝶呤细胞系,它是从原始 HT-29 人类结肠癌细胞系中通过适应 10 µM 甲氨蝶呤分离出来的。这些细胞具有分泌粘液的成熟鹅口疮细胞的特征。
2.HT-29 细胞系的细胞培养信息
了解细胞系的基本培养要求能让您的工作变得轻松。您应该知道:HT-29 细胞株的倍增时间是多少?HT-29 细胞的播种密度是多少?HT-29 细胞需要什么培养基?
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倍增时间 |
HT-29 细胞株的平均倍增时间为 24 小时。 |
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粘附/悬浮 |
HT-29 是一种粘附细胞系。 |
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播种密度 |
HT-29 细胞的建议播种密度为 3 x104 个细胞/平方厘米。用 1 X PBS 冲洗生长的细胞,用 Accutase 孵育 8-10 分钟后将其分离。加入新鲜培养基,离心细胞。重新悬浮细胞团,然后按建议的细胞密度将细胞分装到新的烧瓶中。 |
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生长培养基 |
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) 补充 2.5 mM L-谷氨酰胺和 10 % FBS,用于最佳培养 HT-29 细胞。培养基应每周更换 2 至 3 次。 |
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生长条件 |
HT-29 细胞的生长需要 37°C 的温度和 5 %CO2的湿化培养箱。 |
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储存 |
这些细胞储存在低于 -195°C 的液氮气相中。 |
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冷冻培养基和过程 |
HT-29 细胞系使用的冷冻培养基是 CM-1 或 CM-ACF。细胞通过缓慢的冷冻过程进行冷冻,使温度下降 1 °C,有效保护细胞的活力。 |
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解冻过程 |
冷冻的 HT-29 细胞在 37°C 水浴中解冻。这些细胞可重新悬浮并直接分配到新鲜的生长培养基瓶中。与此相反,解冻后的细胞可离心去除冷冻培养基成分,重新悬浮在新鲜培养基中,并在烧瓶中培养。 |
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生物安全等级 |
处理和维护 HT-29 细胞系采用生物安全 1 级。 |
3.HT-29 细胞:优势与局限
每种细胞系都有区别于其他细胞系的独特优点和缺点。本节将介绍与 HT-29 细胞相关的主要优点和局限性。
优点
HT-29 细胞的主要优点有
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易于培养
HT-29 细胞系易于处理和维护,没有复杂的培养要求。它在研究实验室中被广泛培养。
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肠细胞体外模型
HT-29 细胞可在特定培养条件下分化为成熟的肠细胞(肠细胞和粘液分泌细胞)。它们被用作研究食物消化和生物利用率的细胞模型。
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转染效率高
HT-29 结肠癌细胞具有高转染效率,适合基因表达和调控研究。可使用多种方法进行瞬时转染和稳定转染实验。
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药物敏感性
HT-29 细胞对结肠癌治疗中常用的氟尿嘧啶和奥沙利铂等化疗药物敏感。它们可用于研究耐药性和筛选潜在的结直肠癌治疗药物。
局限性
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异质性
HT-29 细胞与其他癌细胞系一样,具有异质性,可能无法形成统一的细胞群。这可能会影响某些检测结果的可重复性,并导致实验结果出现微小差异。
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分化能力有限
HT-29 细胞的分化潜力有限。它们不能完全分化为肠或结肠细胞,只能表现出一些特征。这一局限性可能会限制它们用于研究更复杂的生物过程。
4.HT-29 细胞:应用
HT-29 细胞系因其广泛的应用而被研究实验室广泛培养。本节将仅介绍 HT-29 细胞的几个重要应用。
癌症研究: HT-29 是一种结直肠腺癌细胞系,因此可用于研究癌症的进展、发展和潜在的分子机制。2018 年进行的一项研究利用 HT-29 细胞系研究了导致转移的细胞分子。这项研究观察到,波形蛋白和CXCR4基因调控细胞转移。而转染microRNA-193a-5p模拟物可以降低这些基因的mRNA水平,成功减少癌细胞转移[2]。
毒理学研究: HT-29 细胞系被广泛用于毒理学研究。这些结直肠癌细胞被用来通过不同的检测方法评估不同候选药物的毒性。例如,一项研究探讨了一种植物茜草乙醇提取物对 HT-29 细胞系的毒性潜力。结果显示,该提取物能明显抑制 HT-29 细胞的生长,表明其具有良好的抗癌特性[3]。
微生物学: HT-29 可作为宿主细胞系统,用于研究潜在微生物(即细菌和病毒)的致病机理。研究人员可以用微生物感染 HT-29 细胞,研究它们的毒性和宿主反应。例如,一项研究利用 HT-29 细胞探索乳酸菌的益生特性 [4]。另一项研究利用 HT-29 细胞评估噬菌体治疗的有效性和安全性[5]。
5.有关 HT-29 细胞的研究论文
本节将介绍一些有关 HT-29 细胞的著名论文,这些论文将有助于您开展研究。
这项研究提出了一种潜在的抗癌剂--茜草乙醇提取物,可用于抗击结直肠癌细胞株 HT-29。该提取物能明显抑制癌细胞的生长。
四氢化苦参碱通过 Bcl-2/Caspase 3/PARP 通路和 G1/S 期抑制结肠癌 HT-29 细胞的生长
这篇发表在《生物科学报告》(Bioscience Reports)上的文章测试了化合物四氢化苦参碱对 HT-29 细胞的抗癌活性。结果表明,四氢萘啶可通过调节细胞信号通路抑制癌细胞的增殖和生长。
microRNA-193a-5p 通过抑制转移途径抑制人 HT-29 结肠癌细胞的迁移
这项研究提出,miRNA-193a-5p 有可能通过调节转移相关基因来调控 HT-29 细胞的转移。
噬菌体在人体细胞中对细菌的毒性比在细菌培养中更强;来自 HT-29 细胞的启示
这篇论文发表在2018年的《自然科学报告》(Nature Scientific Reports)上。这项研究利用HT-29肿瘤细胞系作为肠道细胞模型来评估拟议的噬菌体治疗的疗效。
乳酸菌的益生特性及其抑制肠道致病菌粘附Caco-2和HT-29细胞的能力
在这项研究中,研究人员使用 HT-29 细胞来研究乳酸菌的益生活性。有趣的是,研究表明乳酸菌能阻止致病菌粘附到结肠细胞上。
6.HT-29 细胞资源:方案、视频及更多
本节将介绍一些有关 HT-29 细胞的在线资源,以帮助学习其维护、培养和转染方案。
细胞培养方案
以下资源将指导您进行 HT-29 细胞的亚培养。
- 培养 HT-29 细胞: 该链接将提供有关 HT-29 细胞的生长培养基、解冻和亚培养的基本知识。
- 维护 HT-29 培养物: 本文包含有关 HT-29 细胞培养和维护的所有有用信息。
转染方案
HT-29 细胞系转染效率高,常用于基因表达研究。以下资源介绍了这些细胞可能的转染方案。
- 转染 HT-29:该网站链接包含转染 HT-29 细胞的详细方案。
- 转染 HT-29 细胞系:该文件介绍了用质粒 DNA 转染 HT-29 细胞系的方案。
与 HT-29 细胞系相关的视频
以下是一些有关该肿瘤细胞系培养和维护的视频。
- 传代细胞: 该视频展示了粘附细胞系的细胞传代方案。
- 转染 HT-29 细胞: 本视频将指导您如何转染 HT-29 细胞。
我们希望本文中的信息对您处理和维护 HT-29 细胞系有价值且足够。如果您计划在研究中使用 HT-29 细胞,请向我们订购。
参考文献
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio,HT29 细胞系。食品生物活性成分对健康的影响:体外和体内模型》,2015 年:第 113-124 页。
- Shirafkan, N., et al.,microRNA-193a-5p inhibits migration of human HT-29 colon cancer cells via suppression of metastasis pathway.细胞生物化学杂志》,2019.120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh,Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line.胃肠癌杂志》,2021 年,第 52 期:第 575-581 页。52: p. 575-581.
- Fonseca, H.C. 等人,乳酸菌的益生特性及其抑制肠道致病菌粘附 Caco-2 和 HT-29 细胞的能力。Probiotics and antimicrobial proteins, 2021.13: p. 102-112.
- Shan, J., et al.,噬菌体对带有人体细胞的细菌比在细菌培养中更具毒性;来自 HT-29 细胞的启示。科学报告,2018。8(1): p. 5091.
