Tế bào HROHep03

Dung dịch đông lạnh CM-1 của Cytion là một dung dịch bảo quản đông lạnh tiên tiến, được thiết kế để đảm bảo mức độ sống sót và chức năng cao nhất của tế bào sau khi rã đông. Dung dịch đa năng này phù hợp với nhiều loại tế bào khác nhau, bao gồm cả tế bào người và động vật, làm cho nó trở thành công cụ thiết yếu cho các ứng dụng nghiên cứu đa dạng. Được pha chế với sự kết hợp cân bằng kỹ lưỡng giữa các chất bảo vệ đông lạnh và dưỡng chất thiết yếu, Dung dịch đông lạnh CM-1 giảm thiểu sự hình thành tinh thể băng và stress tế bào trong quá trình đông lạnh, từ đó bảo vệ tính toàn vẹn của tế bào.
Các tính năng chính của Freeze Medium CM-1 bao gồm:

Tương thích rộng: Hiệu quả cho nhiều loại tế bào khác nhau, bao gồm tế bào nguyên thủy, tế bào gốc và dòng tế bào đã được thiết lập.
Độ sống cao: Được tối ưu hóa để tối đa hóa khả năng phục hồi và độ sống của tế bào sau khi rã đông, đảm bảo kết quả thí nghiệm đáng tin cậy.
Sẵn sàng sử dụng: Được chuẩn bị và tiệt trùng sẵn sàng cho việc sử dụng ngay lập tức, giảm thời gian chuẩn bị và nguy cơ nhiễm khuẩn.
Ổn định cao: Duy trì hiệu suất ổn định trong điều kiện bảo quản đông lạnh tiêu chuẩn, đảm bảo kết quả tái hiện được.
Tuổi thọ dài: CM-1 là môi trường bảo quản đông lạnh chứa huyết thanh, sẵn sàng sử dụng, có thể bảo quản trong tủ lạnh lên đến một năm.


Sử dụng CM-1 để đông lạnh tế bào

Để sử dụng CM-1 để đông lạnh cả tế bào bám dính và tế bào lơ lửng, hãy thực hiện các bước sau

Đối với tế bào bám dính, rửa và tách chúng khỏi nền nuôi cấy. Đối với tế bào treo lơ lửng, tiến hành trực tiếp đến bước tiếp theo.
Đếm tế bào để đảm bảo nồng độ phù hợp.
Ly tâm tế bào để tạo thành cặn, sau đó tái phân tán trong môi trường bảo quản đông lạnh CM-1.
Chuyển tế bào đã hòa tan vào ống đông lạnh.
Sử dụng phương pháp đông lạnh chậm trước khi chuyển tế bào vào lưu trữ lâu dài





Phương pháp
Mô tả
Các bước





❄️
Đóng băng thủ công

Một phương pháp từng bước bao gồm việc giảm nhiệt độ từ từ để đảm bảo sự sống còn của tế bào

1️⃣ Đặt tế bào vào môi trường đông lạnh trong tủ lạnh 4°C trong 40 phút.
2️⃣ Chuyển sang tủ đông -80°C trong 24 giờ.
3️⃣ Bảo quản tế bào trong nitơ lỏng để bảo quản lâu dài



❄️
Sử dụng Mr. Frosty


Một thiết bị tiện lợi cho phép đông lạnh với tốc độ kiểm soát mà không cần nguồn điện

1️⃣ Chuẩn bị tế bào trong ống cryovial với dung dịch đông lạnh.
2️⃣ Đặt ống cryovials vào hộp chứa Mr. Frosty.
3️⃣ Bảo quản ở -80°C trong 24 giờ trước khi chuyển sang nitơ lỏng



❄️
Tủ đông kiểm soát tốc độ


Máy đông lạnh chính xác cao của Thermo Fisher hoặc các nhà sản xuất khác được thiết kế để giảm nhiệt độ theo tốc độ kiểm soát

1️⃣ Cài đặt thiết bị để giảm nhiệt độ từ từ.
2️⃣ Đặt các tế bào đã chuẩn bị vào tủ đông.
3️⃣ Sau chu kỳ đông lạnh, chuyển tế bào sang nitơ lỏng









Bảo quản ống cryovial ở nhiệt độ dưới -130°C hoặc trong nitơ lỏng để bảo quản lâu dài.


Thành phần

Chứa FBS, DMSO, Glucose, Muối
Khả năng đệm: pH = 7.2 đến 7.6


Dung dịch bảo quản đông lạnh CM-1 của Cytion cung cấp giải pháp đáng tin cậy cho việc bảo quản đông lạnh, đảm bảo độ sống và chức năng cao của tế bào sau khi rã đông cho nhiều ứng dụng nghiên cứu khác nhau.

DMEM:Ham's F12 là một môi trường cơ bản được công nhận rộng rãi và sử dụng phổ biến trong nuôi cấy tế bào phục vụ nghiên cứu sinh học. Nó đóng vai trò là nguồn dinh dưỡng cơ bản cho sự phát triển của các dòng tế bào động vật có vú khác nhau, đặc biệt khi được bổ sung huyết thanh bò thai (FBS).

Công thức độc đáo này kết hợp môi trường Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) và Ham's F-12 (Hỗn hợp Dinh dưỡng Ham's F-12) theo tỷ lệ chính xác 1:1. Việc bổ sung L-glutamine giúp nâng cao thành phần của nó.

DMEM, được phát triển từ Dung dịch Thiết yếu Tối thiểu của Eagle (EMEM), cung cấp nồng độ axit amin và vitamin cao hơn so với phiên bản tiền thân. Ngược lại, Ham's F-12 dựa trên dung dịch Ham's F-10, cung cấp một bộ thành phần thiết yếu bổ sung.

Để hỗ trợ sự phát triển tối ưu của tế bào, thông thường người ta bổ sung FBS vào DMEM:Ham's F12 với nồng độ điển hình là 5-10%. Việc bổ sung này là cần thiết vì môi trường thiếu các hormone tăng trưởng, lipid và protein quan trọng cho sự phát triển của tế bào.

DMEM:Ham's F12 kết hợp hệ thống đệm pH và thường được bổ sung phenol red, một chất chỉ thị pH. Các tế bào nuôi cấy trong DMEM:Ham's F12, hoặc bất kỳ môi trường nào sử dụng hệ thống đệm bicarbonate, đều yêu cầu môi trường CO2 được kiểm soát ở mức 5-10% để duy trì mức pH thích hợp. 


Kiểm soát chất lượng

Lọc vô trùng


Bảo quản và thời hạn sử dụng

Bảo quản ở nhiệt độ +2°C đến +8°C, tránh ánh sáng.
Sau khi mở nắp, bảo quản ở 4°C và sử dụng trong vòng 6–8 tuần.


Điều kiện vận chuyển

Nhiệt độ môi trường


Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ từ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Tránh để đông lạnh và làm ấm thường xuyên lên đến +37°C, vì điều này làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường nuôi cấy quá 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát được như lò vi sóng.
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết và làm ấm đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.


Thành phần



Loại
Thành phần
Nồng độ (mg/L)


Axit amin
Glycine
18,75


L-Alanine
4,45


L-Arginine HCl
147,50


L-Asparagine H₂O
7,50


Axit L-Aspartic
6,65


L-Cysteine HCl H₂O
17,56


L-Cystine 2 HCl
31,29


Axit L-Glutamic
7,35


L-Glutamine
365,00


L-Histidine HCl H₂O
31,48


L-Isoleucine
54,47


L-Leucine
59,05


L-Lysine HCl
91,25


L-Methionine
17,24


L-Phenylalanine
35,48


L-Proline
17,25


L-Serine
26,25


L-Threonine
53,45


L-Tryptophan
9,02


L-Tyrosine 2 Na 2 H₂O
55,79


L-Valine
52,85


Vitamin
D-Biotin
0,0035


Choline clorua
8,98


D-Canxi Pantothenate
2,24


Axit folic
2,66


Myo-Inositol
12,60


Nicotinamide
2,02


Pyridoxine HCl
0,031


Pyridoxal HCl
2,00


Riboflavin
0,219


Thiamine HCl
2,17


Vitamin B12
0,68



Muối vô cơ
CaCl₂·2H₂O
154,50


CuSO₄ 5 H₂O
0,0013


Fe(NO₃)₃·9H₂O
0,05


FeSO₄·7H₂O
0,417


KCl
311,80


MgCl₂ 6 H₂O
61,20


MgSO₄ 7 H₂O
100,00


NaCl
6996,00


NaHCO3
1200,00


Na₂HPO₄
71,02


NaH₂PO₄·2H₂O
70,87


ZnSO₄ 7 H₂O
0,432



Các thành phần khác
D-Glucose
3151,00


Hypoxanthine
2,40


HEPES
3574,50


Axit linoleic
0,042


Axit lipoic
0,105


Muối natri của Phenol Red
8,63


Putrescine 2 HCl
0,081


Pyruvate natri
55,00


Thymidine
0,365

Dung dịch tách tế bào Accutase chứa EDTA và Phenol Red – 100 ml

Accutase là dung dịch tách tế bào đã được lọc vô trùng, sẵn sàng sử dụng, được thiết kế như một giải pháp thay thế nhẹ nhàng cho trypsin/EDTA trong việc tách các tế bào động vật có vú bám dính khỏi các dụng cụ nuôi cấy mô tiêu chuẩn bằng nhựa và các bề mặt được phủ chất bám dính. Sản phẩm kết hợp hoạt tính enzyme phân giải protein và collagen trong dung dịch muối cân bằng để mang lại hiệu quả tách tế bào hiệu quả nhưng có kiểm soát, bảo tồn các protein bề mặt tế bào và hỗ trợ khả năng sống sót cao sau khi truyền tế bào cũng như tái bám dính nhanh chóng.

Công thức Accutase dựa trên dung dịch muối đệm phosphate của Dulbecco (DPBS) với EDTA và phenol red làm chỉ thị pH trực quan. Các enzyme có nguồn gốc không phải từ động vật có vú và vi khuẩn, khiến Accutase đặc biệt phù hợp cho nghiên cứu tế bào gốc, quy trình sản xuất vắc-xin và bất kỳ ứng dụng nào cần giảm thiểu tối đa các chất gây ô nhiễm có nguồn gốc từ động vật hoặc vi sinh vật. Dung dịch tự ức chế ở 37 °C, do đó không cần chất trung hòa hoặc môi trường chứa huyết thanh sau khi tách tế bào – tế bào có thể được chuyển trực tiếp vào môi trường mới.

Các tính năng chính

Dung dịch lỏng 1x đã lọc vô trùng, sẵn sàng sử dụng – không cần pha loãng hoặc tái tạo
Hoạt tính enzyme phân giải protein và collagen kết hợp để phân ly nhẹ nhàng
Mỗi lô được tiêu chuẩn hóa theo hoạt tính phân ly xác định để đảm bảo tính nhất quán giữa các lô
Enzyme có nguồn gốc không phải từ động vật có vú và vi khuẩn
Tự ức chế ở 37 °C – không cần dung dịch trung hòa
Được pha chế trong dung dịch PBS của Dulbecco với EDTA
Chứa phenol red làm chỉ thị pH trực quan
pH 6,8 – 7,8


Ứng dụng điển hình
Accutase nhẹ nhàng phân ly nhiều loại tế bào bám dính và nhạy cảm, bao gồm tế bào gốc phôi người (hESCs), tế bào gốc đa năng cảm ứng người (iPSCs), tế bào gốc thần kinh, tế bào thần kinh nguyên phát và các dòng tế bào bám dính được nuôi cấy thường xuyên như HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 và A549. Các trường hợp sử dụng điển hình bao gồm:

Nuôi cấy và truyền tế bào động vật có vú bám dính thường xuyên
Tách tế bào đơn nhẹ nhàng của hESCs, iPSCs và các dòng tế bào nhạy cảm khác
Chuẩn bị mẫu cho phân tích tế bào dòng chảy và phân tích FACS
Phân tích các dấu hiệu bề mặt tế bào khi tính toàn vẹn của epitope là yếu tố quan trọng
Các thử nghiệm về di chuyển, tăng sinh và apoptosis của tế bào
Thử nghiệm trạng thái nghỉ ngơi bằng cách thiếu hụt huyết thanh và nghiên cứu chuyển gen ung thư
Thử nghiệm di chuyển của tế bào ung thư và tế bào nơ-ron
Mở rộng quy mô sản xuất trong quy trình làm việc với bình phản ứng sinh học

Đối với công việc thường ngày, sử dụng khoảng 10 ml Accutase cho mỗi 75 cm2 bề mặt nuôi cấy và ủ trong 5–10 phút ở nhiệt độ phòng. Thời gian ủ tối ưu cần được xác định cho từng dòng tế bào và không được vượt quá một giờ. Trước khi thêm, rửa lớp tế bào bằng dung dịch muối không chứa Ca2+/Mg2+ như DPBS không có canxi và magiê để loại bỏ huyết thanh dư và các cation hóa trị hai.

Xử lý & Bảo quản
Bảo quản chai chưa mở trong tủ đông ở -15 °C hoặc thấp hơn. Rã đông ở nhiệt độ phòng hoặc qua đêm ở +2 °C đến +8 °C. Không rã đông Accutase trong bể nước 37 °C, vì nhiệt độ cao làm giảm hoạt tính enzym. Sau khi rã đông, dung dịch có thể được bảo quản trong tối đa 2 tháng ở +2 °C đến +8 °C; không bảo quản ở nhiệt độ phòng. Không làm ấm trước thuốc thử đến 37 °C trước khi sử dụng – thêm trực tiếp vào các tế bào đã rửa sạch ở nhiệt độ phòng. Để bảo quản lâu dài, nên chia thành các phần dùng một lần để tránh các chu kỳ rã đông lặp đi lặp lại. Luôn làm việc trong điều kiện vô trùng.

Chất lượng
Được sản xuất theo các tiêu chuẩn chất lượng nghiêm ngặt. Mỗi lô Accutase đều được lọc vô trùng và kiểm tra độ vô trùng, pH, hình thức và hoạt tính phân ly để đảm bảo hiệu suất ổn định, có thể lặp lại từ lô này sang lô khác.

Thông số kỹ thuật



Thông số
Chi tiết



Loại sản phẩmChất phản ứng tách tế bào / phân ly
Định dạngDung dịch đã được lọc vô trùng, sẵn sàng sử dụng
Thể tích100 ml
Nồng độ làm việc1x (sẵn sàng sử dụng)
Hoạt tính enzymKết hợp proteolytic và collagenolytic
Nguồn gốc enzymeKhông phải từ động vật có vú và không phải từ vi khuẩn
Hệ đệmDulbecco’s PBS với EDTA
Chất chỉ thị pHPhenol red
Phạm vi pH6,8 – 7,8
Hình thứcDung dịch trong suốt, màu đỏ nhạt đến cam
Nhiệt độ bảo quản-15 °C hoặc thấp hơn
Độ ổn định sau khi rã đôngTối đa 2 tháng ở nhiệt độ từ +2 °C đến +8 °C
Khối lượng sử dụng khuyến nghị~10 ml trên mỗi 75 cm² diện tích nuôi cấy
Thời gian ủ điển hình5 – 10 phút ở nhiệt độ phòng
Điều kiện vận chuyểnĐóng băng trên đá khô
Mục đích sử dụngChỉ dành cho mục đích nghiên cứu và sản xuất tiếp theo



Công thức (Thành phần trên mỗi lít)



Thành phần
Nồng độ (mg/L)




Muối vô cơ

Natri clorua (NaCl)8000,00
Phosphat hydro disodium (Na₂HPO₄)1150,00
Clorua kali (KCl)200,00
Phosphat dihydrogen kali (KH₂PO₄)200,00

Các thành phần khác

EDTA · 4Na (EDTA tetrasodium)220,00
Phenol đỏ3,00
Hỗn hợp enzyme độc quyền (có hoạt tính phân giải protein và collagen)1x



Accutase là nhãn hiệu đã đăng ký của Innovative Cell Technologies, Inc.

Tổng quan về sản phẩm
Thể tích: 100 ml
Bảo quản: ≤-15°C
Vô trùng: Lọc vô trùng
Dung dịch kháng sinh/kháng nấm (100x) là dung dịch vô trùng, sẵn sàng sử dụng, được thiết kế để giảm nguy cơ nhiễm khuẩn trong nuôi cấy tế bào và các ứng dụng phòng thí nghiệm liên quan. Dung dịch 100x này chứa sự kết hợp đã được chứng minh của penicillin, streptomycin và amphotericin B – cung cấp hoạt tính kháng khuẩn phổ rộng đối với vi khuẩn Gram dương, Gram âm, nấm men và nấm sợi. Công thức này phù hợp để sử dụng trong nuôi cấy tế bào eukaryotic, môi trường nuôi cấy vi khuẩn và các hệ thống nhạy cảm với nhiễm khuẩn khác, hỗ trợ các hoạt động phòng thí nghiệm sạch sẽ và nhất quán.
Ứng dụng và Lợi ích Được tối ưu hóa cho các quy trình nghiên cứu thông thường, dung dịch này được sử dụng rộng rãi để duy trì điều kiện vô trùng trong quy trình nuôi cấy tế bào. Nó cung cấp hiệu suất đáng tin cậy trong môi trường nhạy cảm với nhiễm khuẩn, giúp nhà nghiên cứu giảm nguy cơ tăng trưởng quá mức của vi sinh vật mà không ảnh hưởng đến sức khỏe tế bào hoặc tính tái hiện của thí nghiệm. Công thức đã được lọc vô trùng loại bỏ nhu cầu thực hiện các bước hòa tan bổ sung, hỗ trợ quá trình chuẩn bị môi trường nuôi cấy hiệu quả và giảm biến động trong các quy trình phòng thí nghiệm hàng ngày.
Cách sử dụng và tương thích Để đạt được nồng độ làm việc tiêu chuẩn, pha loãng dung dịch với tỷ lệ 1:100 vào môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh của bạn. Sản phẩm tương thích với nhiều dòng tế bào động vật có vú và môi trường cơ bản. Với nguồn cung cấp ổn định, các nhà nghiên cứu được hưởng lợi từ sự liên tục đáng tin cậy của nguồn cung và kế hoạch logistics đơn giản hóa. Dung dịch nên được bảo quản ở ≤ –15 °C và tránh các chu kỳ đông lạnh-rã đông lặp đi lặp lại để duy trì độ ổn định. Chỉ dành cho mục đích nghiên cứu. Không sử dụng trong các quy trình chẩn đoán hoặc điều trị. Không sử dụng cho con người hoặc động vật.

Dung dịch Phosphate-Buffered Saline (PBS)
Dung dịch đệm phosphate (PBS) là một dung dịch đệm được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học và hóa học. Nó đóng vai trò quan trọng trong việc duy trì cân bằng pH và áp suất thẩm thấu trong các quy trình thí nghiệm khác nhau, bao gồm xử lý mô và nuôi cấy tế bào. Dung dịch PBS của chúng tôi được pha chế cẩn thận với các thành phần có độ tinh khiết cao để đảm bảo tính ổn định và độ tin cậy trong mọi thí nghiệm. Độ thẩm thấu và nồng độ ion của dung dịch PBS của chúng tôi tương tự như của cơ thể người, khiến nó trở thành dung dịch đẳng trương và không độc hại đối với hầu hết các tế bào.

Thành phần của dung dịch PBS của chúng tôi
Dung dịch PBS của chúng tôi là hỗn hợp được điều chỉnh pH của các dung dịch đệm phosphate và dung dịch muối có độ tinh khiết cao. Ở nồng độ làm việc 1X, nó chứa:

8000 mg/L Natri clorua (NaCl)
200 mg/L Kali clorua (KCl)
1150 mg/L Natri photphat dibasic khan (Na₂HPO₄)
200 mg/L Phosphat kali monobasic khan (KH₂PO₄)

Công thức này đảm bảo pH và cân bằng ion tối ưu, phù hợp cho nhiều ứng dụng sinh học khác nhau.

Ứng dụng của dung dịch PBS của chúng tôi
Dung dịch PBS của chúng tôi là lựa chọn lý tưởng cho nhiều ứng dụng trong nghiên cứu sinh học. Tính chất đẳng trương và không độc hại của nó khiến nó phù hợp cho việc pha loãng chất và rửa container tế bào. Dung dịch PBS chứa EDTA hiệu quả trong việc tách các tế bào bám dính và kết tụ. Tuy nhiên, không nên thêm các kim loại hai giá như kẽm vào PBS, vì điều này có thể gây kết tủa. Trong trường hợp này, các đệm Good's được khuyến nghị. Ngoài ra, dung dịch PBS của chúng tôi là một lựa chọn thay thế chấp nhận được cho môi trường vận chuyển virus trong việc vận chuyển và lưu trữ virus RNA, bao gồm SARS-CoV-2.

Kiểm soát chất lượng

Lọc vô trùng


Bảo quản và thời hạn sử dụng

Bảo quản ở nhiệt độ từ +2°C đến +25°C, tránh ánh sáng.
Sau khi mở, bảo quản ở nhiệt độ từ 2°C đến 25°C và sử dụng trong vòng 24 tháng.


Điều kiện vận chuyển

Nhiệt độ môi trường


Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ từ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Tránh đông lạnh và làm ấm thường xuyên lên +37°C, vì điều này làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường vượt quá 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát như lò vi sóng.
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết và làm ấm đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.

Thành phần



Loại
Thành phần
Nồng độ (mg/L)


Muối
Kali clorua
200



Kali photphat monobasic khan
200



Clorua natri
8000



Natri photphat dibasic khan
1150