imWilms1 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300412

安全数据表

产品介绍

分析证书（CoA）

说明	Wilms1 细胞系最初来源于原发性 Wilms 肿瘤，患者被诊断为双侧肾脏大肿瘤，这是 Wilms 肿瘤（肾母细胞瘤）的特征性表现。该细胞系的 WT1 基因存在同卵无义突变（c.149 C>A，p.S50X），导致产生截短的、无功能的 WT1 蛋白。WT1 是肾脏发育过程中的一个关键基因，它的突变与 Wilms 肿瘤的发病机制密切相关，尤其是在出现基质分化的肿瘤中。Wilms1 细胞的核型稳定，无明显染色体异常，具有间质表型特征，表达波形蛋白，但缺乏细胞角蛋白等上皮标志物。该品系显示出有限但显著的间质分化能力，包括在特定条件下分化成肌肉样细胞的潜力，使其成为研究 WT1 突变分子后果的重要模型。为了克服原代 Wilms1 细胞寿命有限的问题，我们在原始肿瘤细胞中引入了三重突变的 SV40 大 T 抗原（U19dl89-97tsA58），从而建立了 imWilms1 细胞系，促进其永生化。这种改造使 imWilms1 细胞能够无限增殖，同时保持染色体的稳定性，从而为长期研究提供了一个可靠的模型。永生化的 imWilms1 细胞继续表现出相同的 WT1 突变，并保留了 Wilms1 母系的间质特征。除了基因和表型特征外，我们还对 imWilms1 细胞系的信号通路活性进行了广泛分析。蛋白质组学研究揭示了多种受体酪氨酸激酶（RTK）的磷酸化和激活，包括表皮生长因子受体（EGFR）、表皮生长因子受体β（PDGFRβ）和 AXL，以及 MAPK 信号通路的下游激活。这些通路在 imWilms1 细胞中的持续激活强调了它们与探索 Wilms 肿瘤靶向治疗策略的相关性。总之，imWilms1 是研究 Wilms 肿瘤发生和发展的分子机制（尤其是由 WT1 突变和异常信号通路驱动的肿瘤）的一个稳健而长期的模型。
有机体	人类
组织	肾脏
疾病	威尔姆斯肿瘤
同义词	IM-WT-1

年龄	10 个月
性别	女性
种族	高加索人
形态学	纺锤形
细胞类型	Wilms 细胞
生长特性	附着物

引用	imWilms1（Cytion 目录编号 300412）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SN
转基因生物现状	GMO-S1：该 imWilms1 人类 Wilms 肿瘤品系含有三重突变 SV40 T 抗原盒，可进行条件性永生化，用于肾母细胞瘤研究。此分类仅适用于德国境内，其他地区可能有所不同。

突变概况	WT1 突变状态：同基因 c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 突变状态：异基因 TCT>TTT, p.S45F

培养基	MSCGM 试剂盒（龙沙公司提供）
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
流体更新	每周 1 至 2 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
HLA 等位基因	A: '03:01:01, '24:02:01 B: '35:03:01, '38:01:01 C: '12:03:01 DRB1: '07:01:01, '14:54:01 DQA1: '01:04:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:03:01 DPB1*: '02:01:02G，'04:02:01G E: '01:03:01, '01:03:02

地段编号	证书类型	日期	目录编号
300412-221	分析证书	23. May. 2025	300412
300412-030624	分析证书	18. Aug. 2025	300412

imWilms1 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA

分析证书（CoA）