hCMEC/D3 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 305024

安全数据表

产品介绍

分析证书（CoA）

说明	HCMEC/D3 细胞系是一种永生化的人脑微血管内皮细胞系，广泛用于血脑屏障（BBB）的研究。这种细胞系是通过用表达人端粒酶逆转录酶（hTERT）的慢病毒载体转导原代人脑微血管内皮细胞而产生的，人端粒酶逆转录酶是一种维持端粒长度的关键酶，因此能在不改变细胞表型的情况下延长细胞寿命。引入 hTERT 有助于这些细胞绕过限制原代细胞寿命的复制衰老，使其能够在培养物中持续繁殖。 HCMEC/D3细胞保留了原代脑内皮细胞的关键生理和形态特征，使其成为体外研究BBB的重要模型。这些特征包括表达紧密连接蛋白，如 claudin-5、occludin 和 zonula occludens-1，它们对维持屏障完整性至关重要。这些细胞还表达脑血管内皮细胞特有的各种转运体和受体，因此可用于药物输送和神经血管疾病的相关研究。HCMEC/D3 能够形成具有高电阻的紧密单层，这突出表明它们适合用于 BBB 渗透性检测。利用 HCMEC/D3 细胞进行的研究涵盖了广泛的应用领域，包括研究中风、多发性硬化症等脑部病症以及癌症向脑部的转移。它们与各种分子生物学技术的兼容性也使其成为研究内皮细胞对炎症刺激、剪切应力和神经毒性物质反应的绝佳工具。该细胞系为剖析脑内皮水平的分子事件提供了一个稳健、可重复的平台，有助于深入了解神经血管健康和疾病的复杂性。
有机体	人类
组织	大脑、颞叶、血液微血管
疾病	正常脑微血管内皮细胞（hTERT和SV40永生化；血脑屏障模型；无致瘤性）
转移部位	不适用（正常脑内皮细胞系；非肿瘤样本）
应用	血脑屏障（BBB）研究；神经炎症；药物向中枢神经系统的输送与渗透性；跨内皮细胞迁移；紧密连接生物学（Claudin-5、Occludin、ZO-1）；神经系统疾病建模；剪切应力反应；神经毒性测试
同义词	HCMEC/D3、CMEC/D3、人皮质微血管内皮细胞/D3

年龄	成人
性别	女性
种族	未说明
形态学	内皮
细胞类型	内皮细胞
生长特性	附着物

引用	hCMEC/D3 （Cytion 目录号 305024）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_U985
转基因生物现状	GMO-S1：这种人微血管内皮细胞系（hCMEC/D3）含有编码 SV40 T-Antigen 或 hTERT 的慢病毒构建体，支持稳定的永生化。插入物被整合到原代内皮细胞中。本分类仅适用于德国国内，其他地区可能有所不同。

病毒	转化体： Simian virus 40 (SV40)

培养基	EGM -2 MV 微血管内皮细胞生长培养基-2 BulletKit（来自龙沙，龙沙产品目录编号 CC-3202）
补充剂	按照生产商的建议补充 EBM-2 基础培养基
解离试剂	Accutase 或 0.25% 胰蛋白酶-EDTA（处理时间要短；避免过度胰蛋白酶消化）
加倍时间	约24至36小时
亚培养	倒出培养基，用不含 Ca²⁺/Mg²⁺ 的 PBS 洗涤，加入 Accutase（37°C 孵育 3–5 分钟），用完全培养基中和，以300×g离心5分钟，以1–2 × 10⁴个细胞/cm²的密度接种至胶原蛋白包被的培养瓶中。
分割比率	1 至 3
播种密度	1 至 2 × 10⁴ 个细胞/cm²（在涂有Ⅰ型胶原蛋白的表面上）
流体更新	每1至2天
冷冻介质	作为冷冻保存培养基，我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1（Cytion 目录号 800100），其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，以促进恢复并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

地段编号	证书类型	日期	目录编号
305024-100325	分析证书	23. May. 2025	305024
305024-300724	分析证书	23. May. 2025	305024
305024-030326	分析证书	08. Apr. 2026	305024

hCMEC/D3 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA

分析证书（CoA）