WI 38 VA13 亚系 2RA 细胞
一般信息
| 说明 | WI-38 VA13 亚系 2RA 源自历史悠久的 WI-38 细胞系,该细胞系最初取自 3 个月大胎儿的肺组织,是细胞培养技术的一大进步。最初的 WI-38 细胞系在开发麻疹、流行性腮腺炎、风疹和甲型肝炎等多种病毒性疾病疫苗的过程中发挥了至关重要的作用。VA13 亚系 2RA 是该细胞系的永生化变种,是通过用 Simian Virus 40(SV40)转化实现的。 将 SV40 加入 WI-38 细胞以创建 VA13 亚系 2RA 延长了细胞的寿命,为长期实验提供了更持久的模型。这种转化保持了原始二倍体细胞的基本特性,但改变了它们的生命周期和生长模式,从而实现了持续生长,促进了广泛的研究,而这是母本细胞系有限的生命周期所无法实现的。这使得 VA13 亚系在病毒学、药理学和基因研究等需要延长观察期的持续和广泛研究领域特别有用。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 同义词 | WI 38 VA-13 subline 2RA、WI 38VA13 subline 2RA、WI-38 VA13 sub 2 RA、WI38-VA13 subline 2RA、WI38 VA13/2RA、WI38VA13/2RA、VA13 2RA、WI-38 VA13、WI 38 VA 13、WI38-VA13、WI38/VA13、WI38VA13、VA-13、VA13、AG07217、AG7217 |
特点
| 年龄 | 妊娠 3 个月 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | WI 38 VA13 亚系 2RA(Cytion 目录号 300421) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_2759 |
生物分子数据
| 同工酶 | G6PD、B |
|---|---|
| 病毒 | 含巴氏病毒 |
| 病毒易感性 | 单纯疱疹、水泡性口炎(印第安纳)、脊髓灰质炎病毒 2 |
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 核型 | 超二倍体,模数:73-78 |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 1 至 2 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,让细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁48小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300421-050523 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300421 |
| 300421-300525 | 分析证书 | 18. Aug. 2025 | 300421 |