托莱多细胞
一般信息
| 说明 | 托莱多细胞系是一种弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞系,最初是从一名DLBCL患者的外周血中建立的,该患者在接受大剂量化疗和骨髓移植后,脑部出现了继发性淋巴瘤。 该细胞系表现出复杂的核型,存在多种染色体畸变,但不具备伯基特淋巴瘤特有的易位。 托莱多细胞系的一个独特特征是其不表达免疫球蛋白(Ig)多肽链,且缺乏可检测到的恒定(C)区基因片段。 尽管如此,托莱多细胞系仍保留了其可变(V)基因片段发生体细胞超突变的能力,这通常是生发中心 B 细胞中观察到的现象。 有趣的是,尽管托莱多细胞系缺乏显著的克隆突变,但其克隆内突变的积累频率却高于达乌迪(Daudi)和拉吉(Raji)等其他淋巴瘤细胞系。这表明突变过程可能在体外转化后仍在持续,这可能为研究体细胞超突变的分子机制提供了一个有价值的模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | 弥漫大 B 细胞淋巴瘤生殖中心 B 细胞型 |
| 应用 | 三维细胞培养、免疫学 |
| 同义词 | 托莱多 |
特点
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 淋巴母细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | 托莱多(Cytion 产品编号 305351) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_3611 |
生物分子数据
| 抗原表达 | CD10+、CD19+、CD20+、CD38+、CD23-、CD39- |
|---|---|
| 病毒 | EBV -、HBV -、HCV -、HIV-1 -、HIV-2 -、HTLV-1/2 -、MLV -、SMRV - |
| 突变概况 | 突变:KRAS,简单突变,p.Gly13Asp (c.38G>A),杂合子;突变:TP53,简单突变,p.Glu198fs (c.592_596del5),未指定 |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | 无 |
| 加倍时间 | 50 小时 |
| 亚培养 | 通过定期添加或更换培养基来维持细胞培养。初始培养时细胞密度应为5×10⁵个细胞/毫升,并保持细胞浓度在3×10⁵至1×10⁶个细胞/毫升范围内以获得最佳生长效果。 |
| 播种密度 | 2 至 4 × 10⁵ 个细胞/毫升 |
| 流体更新 | 每 2 至 3 天 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305351-210526 | 分析证书 | 13. Jul. 2026 | 305351 |