SW480-Luc
一般信息
| 说明 | SW480-Luc 是人类 SW480 结肠腺癌细胞系的生物发光衍生物,经过基因工程改造,可稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因。 亲本SW480细胞系源自一名51岁白人男性患者的原发性结肠腺癌,被广泛用作原发性结直肠癌的模型。 SW480 细胞表现出上皮样形态,并携带关键的致癌突变,包括 KRAS G12V、TP53 R273H 和 P309S 以及 APC 截短突变,这使得该细胞系成为研究 Wnt/β-catenin 和 KRAS 信号传导在结直肠癌中作用的理想模型。 重要的是,SW480 与 SW620 源自同一位患者,但代表原发肿瘤,因此可用于对原发性与转移性结直肠癌生物学进行比较研究。 SW480-Luc 中稳定的荧光素酶整合使我们能够利用免疫缺陷宿主,对皮下和原位异种移植模型中的肿瘤负荷进行灵敏、定量的生物发光成像 (BLI)。 发出的发光信号与存活肿瘤细胞数量相关,支持对肿瘤植入、生长动力学和治疗反应进行无创的纵向监测。 SW480-Luc 广泛用于结直肠癌中 KRAS 靶向药物、Wnt 信号通路抑制剂及化疗方案的体内评估,以及与匹配的转移性 SW620 细胞系的比较研究。 SW480-Luc 保留了亲本 SW480 细胞系的已知分子特征,包括 KRAS、TP53 和 APC 突变。荧光素酶的修饰显著提高了体内药效学研究的实验通量和灵敏度。 研究人员在进行大规模临床前应用之前,应根据其具体的实验条件,验证荧光素酶活性、突变谱和生长动力学。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 结肠 |
| 疾病 | 结肠腺癌 |
特点
| 年龄 | 51 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | SW480-Luc(Cytion 产品编号 305698) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_C8Y1 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该细胞系含有通过复制缺陷型慢病毒转导引入的、稳定整合的萤火虫荧光素酶报告基因盒(Luc2,经密码子优化)。 由此获得的多克隆细胞群在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选条件下维持。需采用S1级生物安全防护措施。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表达的受体 | 表皮生长因子(EGF)、角蛋白(免疫过氧化物酶染色)。与肿瘤侵袭性有关的金属蛋白酶 Matrilysin 没有表达。 |
|---|---|
| 蛋白质表达 | P53蛋白;Luc2(萤火虫,密码子优化) |
| 抗原表达 | HLA A2、B8、B17,A型血,Rh+。Luc2(萤火虫,密码子优化) |
| 同工酶 | G6PD,B,PGM1,2,PGM3,1,6PGD,A,PEP-D,1,ES-D,1 |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠身上 |
| 病毒 | 逆转录酶阴性 |
| 病毒易感性 | 人体免疫缺陷病毒(HIV、LAV) |
| 产品 | 癌胚抗原(CEA)0.7 纳克/106 个细胞/10 天、角蛋白、TGF-β。据报道,这些细胞可产生 GM-CSF。 |
| 突变概况 | 突变:p.Gln1338Ter,同型;突变:p.Gly12Val,同型;突变:p.Arg273His,异型;突变:p.Pro309Ser,异型 |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |