SVI 细胞
产品编号
400495
一般信息
| 说明 | SVI 细胞系是从从 H-2kb-tsA58 转基因小鼠体内分离出来的肾小球外生组织中克隆出来的。这种小鼠携带对温度敏感的 SV40 大 T 抗原变体,受 IFN 诱导的 H-2kb 启动子控制。细胞在 33 摄氏度下增殖,在 37 摄氏度下分化。目前,该细胞已成功培养了 40 多次,未发现表型变化。在形态和几种标记物的表达方面,SVI 与 E11 非常相似。例如,podocin 和 WT1 的表达量低于 E11。分化:开始分化过程,将非融合烧瓶放入 38 摄氏度/5% CO2 的培养箱中至少培养 14 天,以完成分化。无需添加干扰素-γ (INF-γ)。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 肾脏 |
特点
| 品种/亚种 | (CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Immort |
|---|---|
| 年龄 | 成人 |
| 性别 | 未说明 |
| 细胞类型 | 荚膜细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | SVI(Cytion 目录编号 400495) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5943 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:这种小鼠荚膜细胞系(SVI)含有条件活性 SV40 大 T 抗原转基因,是 ImmortoMouse 模型的一部分,支持温度敏感的永生化。该构建体稳定存在于荚膜细胞衍生细胞中。此分类仅适用于德国国内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | WT1、Lmx1b、肾素、NEPHI、FAT、P-cadherin、CD2AP、ZO-I、podocalyxin、podoplanin、synpo、podocin、TRPC6 和 GAPDH。 |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 建议使用1:3至1:5的比例。在分化条件下,即在38摄氏度下培养从非汇合到汇合状态的细胞,细胞增殖会在最初两周内停止,并在约四周后完全停止。 |
| 播种密度 | 接种T75细胞培养瓶,细胞密度为1×10⁴个细胞/cm²(约60,000个细胞/ml,单个T75瓶含12ml培养基),进行增殖培养。将细胞置于33℃/5% CO₂环境中培养,直至细胞瓶达到约75%融合度。 |
| 流体更新 | 每周 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 33°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
氨甲蝶呤: x,x
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 400495-1221 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 400495 |