SRA01-04 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$540.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

冷冻管

产品编号 305436

安全数据表

产品介绍

说明	SRA01/04细胞系是一种永生化的人晶状体上皮细胞系，其开发旨在克服与人晶状体上皮（HLE）细胞原代培养相关的局限性。这些局限性包括细胞增殖能力低，以及难以从供体晶状体中获取足量的细胞。 SRA01/04 源自接受早产儿视网膜病变手术的婴儿体内的原代 HLE 细胞。通过转染携带由RSV启动子控制的SV40大T抗原基因的质粒，实现了细胞的不朽化。这种方法避免了使用活病毒，并能够筛选出具有一致特性的均匀克隆。 SRA01/04细胞在超过130代传代过程中表现出稳定的增殖能力，每代传代的细胞倍增水平约为3.5。形态学上，它们保持着具有上皮特征的单层结构。染色体分析显示其核型为低四倍体，与不朽化状态一致。同工酶表型证实了其人类来源。重要的是，该细胞系保留了晶状体特异性分子特征，包括αA型和βB型晶状体蛋白以及己糖还原酶的表达，尽管其蛋白水平低于原代人晶状体上皮细胞（HLE）培养物。通过RT-PCR还检测到了这两种晶状体蛋白的mRNA，测序结果证实其与已发表的人类序列100%一致。这使得SRA01/04成为首个被证实同时表达αA型和βB型晶状体蛋白的人类晶状体细胞系。除了晶状体蛋白的表达外，SRA01/04 还表达参与多元醇途径的酶——己糖还原酶，该途径与白内障的形成有关。虽然最佳生长需要 20% 的胎牛血清，但如果预先附着在培养皿上，这些细胞即使在降低血清浓度甚至无血清条件下也能存活和增殖。这种适应性，加上其稳定的晶状体特异性表型，使 SRA01/04 成为研究晶状体生理学、晶状体上皮中的基因调控以及白内障形成机制的宝贵模型。
有机体	人类
组织	眼、晶状体、上皮
同义词	SRA 01-04、HLEC-SRA 01-04、HLE-SRA-01-04、SRA01-04 (HLE)、SRA 01/04、HLEC-SRA 01/04、HLE-SRA-01/04、SRA01/04 (HLE)

年龄	3 个月
性别	男
形态学	上皮样
细胞类型	眼晶状体
生长特性	附着物

引用	SRA01-04（Cytion 产品编号 305436）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_7157
转基因生物现状	GMO-S1：该SRA01-04人晶状体上皮细胞系含有SV40大T抗原构建体，可用于眼晶状体研究。此分类仅适用于德国境内，在其他地区可能有所不同。

蛋白质表达	基因整合：方法=转染；基因=UniProtKB；P03070；SV40大T抗原
同工酶	LD，NP

培养基	DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
补充剂	在培养基中添加 20% 的 FBS
流体更新	每周 2 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

SRA01-04 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制与分子分析