PM-LGSOC-01 细胞
一般信息
| 说明 | PM-LGSOC-01 是一种源自低级别浆液性卵巢癌(LGSOC)腹膜转移的细胞系。该细胞系是作为综合研究模型的一部分建立的,该模型还包括患者来源异种移植(PDX)。PM-LGSOC-01的建立是通过在SCID/Beige小鼠腹膜下注射肿瘤浆液进行正位移植,从而形成早期可移植腹膜转移(PM)-PDX模型。组织学分析证实,PM-PDX 和 PM-LGSOC-01 细胞都保留了 LGSOC 典型的微乳头状和楔形生长模式,肿瘤出芽,并表达 PAX8 和 WT1 等标记物。遗传学分析表明,原发肿瘤、PM 和细胞系共享一个 KRAS c.35 G > T(p.Gly12Val)突变,因此该模型与研究 LGSOC 的进展和治疗反应相关,特别是与 MAPK 通路相关。 PM-LGSOC-01 具有与临床前研究相关的关键特征。在早期培养阶段,它的倍增时间约为 42 小时,而在细胞培养的后期阶段,倍增时间缩短到 23 小时,并已在体外培养阶段维持了 100 多次。该细胞系表现出上皮形态,具有上皮样组织和较高的细胞间粘附性。不过,它对铂类化疗的反应有限,但对紫杉醇高度敏感(IC50:6.3 ± 2.2 nM)。此外,PM-LGSOC-01 在体外和体内对 MEK 抑制剂曲美替尼(IC50:7.2 ± 0.5 nM)特别敏感,这反映了 KRAS 突变对治疗反应的影响。 PM-LGSOC-01是研究LGSOC的重要工具,特别是在耐药性、致瘤性以及对MEK抑制剂等靶向疗法的敏感性方面。鉴于低级别浆液性卵巢癌(LGSOC)与高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)相比,对传统化疗的反应较差,因此将其用于开发低级别浆液性卵巢癌的个性化治疗方法至关重要。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 卵巢 |
| 疾病 | 低级别浆液性卵巢癌 |
| 转移部位 | 腹膜 |
| 同义词 | M28/2 |
特点
| 年龄 | 60 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | PM-LGSOC-01(Cytion 目录号 300305) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_xx32 |
生物分子数据
| 突变概况 | KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val)) 突变 |
|---|
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | 胰蛋白酶/EDTA 和 Ca2+/Mg2+ 游离磷酸盐缓冲液 |
| 加倍时间 | 42 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 建议比例为1:20 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
CSF1PO: 10,11
D13S317: 12,13
D16S539: 10,13
D5S818: 11,12
D7S820: 9,1
TH01: 6,7
TPOX: 8,1
vWA: 15,17
D3S1358: 14,15
D21S11: 28,32
D18S51: 12,17
D8S1179: 13,14
FGA: 23、24
D2S1338: 24、25
D19S433: 12,16
PEZ6: OVCAR3
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300305-170723 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300305 |