PK-15 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$395.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 607426

安全数据表

产品介绍

分析证书（CoA）

说明	PK(15) 细胞系源自 PK-2A（1955 年从成年猪肾脏中提取的细胞系），感染了猪 C 型肿瘤病毒（以前称为猪内源性逆转录病毒，PERV），该病毒被列为第 2 类风险病原体。宿主细胞基因组包含 62 个 pol 基因拷贝，该基因编码逆转录酶和其他蛋白质。最初，PK(15)细胞系产生的病毒颗粒被描述为有缺陷的，对包括人细胞系在内的多种哺乳动物细胞系没有感染性，因此被归类为 1 类风险细胞系。然而，随后的研究表明，人 293 细胞可被 PK(15) 细胞的无细胞上清液有效感染。这一发现导致德国生物安全中央委员会（ZKBS）于2018年11月对PK（15）细胞系进行了重新分类。 PCR 分析表明，传播的病毒属于 PERV-A 和 PERV-B 两种多型亚型。此外，还观察到 293 细胞产生的病毒颗粒对人体补体系统的灭活具有抵抗力。 PK(15) 细胞系除了具有重要的病毒学意义外，还是转染应用的合适宿主。由于其粘附生长特性，它在各种研究和实验环境中都具有很高的价值。
有机体	猪
组织	肾脏
同义词	PK(15), PK (15), PK 15, PK15, 猪肾-15

品种/亚种	汉普郡
年龄	成人
性别	男
形态学	上皮样
生长特性	单层，粘附

引用	PK-15（Cytion 目录号 607426）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9823
CellosaurusAccession	CVCL_2160

病毒	PCV1（猪圆环病毒 1）阳性，PCV2 阴性，PCV3 阴性
病毒易感性	猪霍乱、非洲猪瘟、猪水泡性红斑病、口蹄疫 (FMDV)、水泡性口炎 (印第安纳)、疫苗病、再病毒 2、3、腺病毒 4、5、柯萨奇病毒 B2、B3、B4、B5、B6
抗病毒能力	脊髓灰质炎病毒 2
逆转录酶	积极的

培养基	EMEM（MEM Eagle），w：2 mM L-谷氨酰胺，w：2.2 g/L NaHCO3，w：EBSS（Cytion 文章编号 820100a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
分割比率	建议比例为1:2至1:4
播种密度	2 × 10^⁴ 个^细胞/平方^厘米
流体更新	每周 2 至 3 次
解冻后恢复	让细胞从冷冻过程中恢复至少 24 到 48 小时。
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
STR 简介	氨甲蝶呤: x,x

地段编号	证书类型	日期	目录编号
607426-721	分析证书	23. May. 2025	607426
607426-090924	分析证书	23. May. 2025	607426

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文件

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处理

质量控制

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