OP9 细胞
OP9 细胞系的特征
| 说明 | OP9细胞系是一种从OP/OP小鼠腓肠肌中提取的基质细胞系,它的基因突变导致其缺乏巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),而M-CSF是一种关键的细胞因子,参与包括巨噬细胞和破骨细胞在内的各种细胞类型的分化、存活和功能。 在造血研究领域,OP9 细胞被广泛用作共培养系统中的饲养层,以支持造血干细胞(HSCs)和胚胎干细胞(ESCs)的分化和扩增。这些共培养系统促进了造血分化途径的研究,使间叶干细胞能够分化为成人红细胞、红细胞、红血球以及骨细胞、软骨细胞、肌细胞、腱细胞和脂肪细胞。OP9细胞之所以能在这些系统中发挥支持作用,是因为它们能产生一个有利的微环境,其中富含干细胞增殖和特异性分化所必需的细胞因子和生长因子。 此外,OP9 细胞系还有助于研究白细胞反应和免疫细胞(如自然杀伤(NK)细胞)的发育,证明了 OP9 小鼠系在免疫学研究中的实用性。OP9 细胞产生的分泌因子,包括 bFGF、IGF-1、IL-3、PDGF-BB、TGF-β1 和 TGF-β3 等生长因子,在细胞迁移和分化过程中起着至关重要的作用。 OP9 细胞表现出类似成纤维细胞的外观,其特征是纺锤形的扁平形态。这种形态特征是间充质基质细胞的典型特征,而间充质基质细胞因其在骨髓微环境中的支持功能而闻名。 尽管 OP9 细胞具有巨大的潜力,但由于其非模式化的特性,其使用也有局限性,这就限制了其在短期和小规模项目中的使用,强调了在实验设计中仔细规划和考虑的必要性。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 骨髓、基质 |
| 同义词 | OP-9 |
特点
| 品种/亚种 | (C57BL/6 x C3H) F2-op/op |
|---|---|
| 年龄 | 胚胎 |
| 形态学 | 纤维母细胞样 |
| 生长特性 | 附着物 |
文件
| 引用 | OP9(Cytion 目录号 305174) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_4398 |
基因构成
OP9 基质细胞的培养方法
| 培养基 | 阿尔法 MEM,含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺:不含核糖核苷,不含脱氧核糖核苷:脱氧核苷,含 1.0 毫摩尔丙酮酸钠,含 2.2 克/升 NaHCO3 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 20% 的 FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1:2 至 1:4 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
正宗间充质干细胞系 OP9 的质量保证
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305174-170524 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305174 |
| 305174-091023 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305174 |
| 305174-270226 | 分析证书 | 08. Apr. 2026 | 305174 |