OK 细胞
一般信息
| 说明 | OK 细胞系是从成年雌性美洲负鼠(Didelphis virginiana)的肾脏组织中提取的永久性上皮样细胞培养物。该细胞系在体外建立,其显著特点是非二倍体染色体模数为 23,且能适应组织培养条件。该细胞系最初由混合细胞类型衍生而来,经过八次传代后主要演变为上皮细胞。OK 细胞系在形态、染色体构成和生长动态方面具有广泛的特征,使其成为细胞遗传学和染色体分离研究的可靠模型。 OK 细胞系的主要特点之一是其在染色体研究中的实用性,尤其是在分离哺乳动物 X 染色体方面。负鼠的 X 染色体明显较小(比最小的常染色体小约 30%),而且不包含大块的组成型异染色质,有利于通过流式显微荧光测定法和梯度离心法等技术从常染色体中分离出来。OK 细胞的核型稳定,存在独特的元中心标记染色体,因此更适合用于基因组和染色体研究。这种有袋动物的父X染色体优先失活,为研究哺乳动物的X染色体失活机制提供了一个比较模型。 OK细胞在各种培养条件下也表现出了顽强的生命力和适应性,包括血清变化和不同的有丝分裂抑制剂,如Velban(硫酸长春碱),它对实现染色体分离的高有丝分裂指数特别有效。该细胞系能同步化并产生高产量的分裂期细胞,这进一步突出了它适合进行详细的染色体分析,包括 DNA 含量定量和染色体扩散的高分辨率成像。 |
|---|---|
| 有机体 | 负鼠 |
| 组织 | 肾脏,皮质,近端小管 |
| 同义词 | 负鼠肾,OK-WT |
特点
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | OK(Cytion 目录编号 606465) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9267 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0472 |
生物分子数据
| 表达的受体 | α2-肾上腺素能、血清素、甲状旁腺激素、心房利钠因子 |
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处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 建议的分拆比例为1:4至1:8 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 606465-511 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 606465 |