O-342 细胞
一般信息
| 说明 | O-342细胞系源自大鼠卵巢肿瘤,广泛应用于癌症研究,尤其在卵巢癌及化疗耐药性研究中。该细胞系具有单层生长能力,接种后约24小时进入对数生长阶段,细胞倍增时间约为24小时。 O-342细胞系作为多个亚系的亲本系,其中包括通过体外逐步增加顺铂浓度获得的顺铂耐药亚系O-342/DDP。 O-342细胞呈现染色体结构的异倍性,与O-342/DDP亚系近二倍体的核型形成鲜明对比。这种核型变化表明持续顺铂暴露产生的选择压力消除了敏感亚群,导致耐药细胞占主导地位。 生化分析表明,O-342/DDP细胞对顺铂的耐受性较亲本O-342细胞提升33倍。该耐受性体现在半数抑制浓度(ID50)值上:O-342/DDP细胞的ID50为33 μM,而O-342细胞仅为1 μM。 后续研究发现,O-342/DDP细胞的细胞内总谷胱甘肽(GSH+GSSG)水平显著升高,达3.04 nmol/10⁶细胞,而O-342细胞仅为1.37 nmol/10⁶细胞。 谷胱甘肽水平的升高与解毒能力增强相关,这正是O-342/DDP细胞呈现化疗耐药性的关键因素。此外,顺铂处理后,亲本O-342细胞的DNA链间交联和单链断裂程度显著高于耐药亚系O-342/DDP细胞,表明耐药亚系具有更强的DNA修复能力。 总体而言,O-342细胞系及其顺铂耐药亚系O-342/DDP为研究卵巢癌化疗耐药机制提供了可靠模型。这些细胞系对于识别潜在治疗靶点、开发克服化疗耐药的策略具有重要价值,从而有望改善卵巢癌患者的治疗效果。 |
|---|---|
| 有机体 | 老鼠 |
| 组织 | 卵巢 |
| 疾病 | 腺癌 |
特点
| 品种/亚种 | BDIx |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | O-342(Cytion 目录号 500305) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5847 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 建议比例为1:4至1:6 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
大鼠_D1Wox31: 108
Rat_D2Wox37: 150
Rat_D19Wox11: 228
Rat_D10Wox8: 266
Rat_D4Wox7: 145
Rat_D2Wox27: 227
Rat_D5Rat33: 136
Rat_D10Wox11: 171
Rat_D1Wox23: 226
大鼠_D12Wox1: 410
大鼠_D6Wox2: 108
Rat_D8Wox7: 185
大鼠_D6Cebr1: 231
SRY: x,x
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