NRK-EGFP-H2B 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 500724

安全数据表

产品介绍

说明	NRK-EGFP-H2B细胞系是正常大鼠肾脏（NRK）细胞的基因修饰变体，能稳定表达与组蛋白H2B融合的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）。这种改造可实现染色质和核动态的实时可视化，使该细胞系成为研究细胞周期进展、有丝分裂和染色质组织的宝贵工具。EGFP-H2B 的稳定表达提供了明亮而稳定的荧光信号，有利于高分辨率活细胞成像，使研究人员能够非常精确地监测核事件。 NRK 细胞来源于成年大鼠的肾脏组织，因其生长稳健、生理行为有据可查而被广泛应用于细胞生物学领域。在这些细胞中引入 EGFP-H2B 融合蛋白并不会明显改变其生长或形态，因此实验条件可靠且可重复。鉴于肾脏在过滤血液和排泄废物方面的作用，这种细胞系在研究肾细胞生物学、细胞对压力的反应以及致癌机制方面特别有用。此外，NRK-EGFP-H2B 细胞的荧光功能可用于药物筛选应用，实时观察药物对细胞增殖和核形态的影响。
有机体	老鼠
组织	肾脏
同义词	NRK EGFP-H2B

品种/亚种	奥斯本-门德尔
形态学	纺锤形纤维母细胞
生长特性	单层，粘附

引用	NRK-EGFP-H2B（Cytion 目录号 500724）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	10116
CellosaurusAccession	CVCL_AV92
存款人	艾伦伯格实验室（EMBL）

表达的受体	表皮生长因子（EGF），增殖刺激活性（MSA）
蛋白质表达	EGFP-H2B：位置/基因：1...589 / Pcmv, 613...1329 / EGFP, 1387...1764 / H2B, 3001...3795 / KanR/NeoR
产品	表皮生长因子（EGF），增殖刺激活性（MSA），CMV 促进因子组蛋白 H2B，新霉素，磷转移酶

培养基	DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS、0.5 mg/mL G418
解离试剂	Accutase
亚培养	丢弃旧培养基，用 PBS 冲洗细胞。加入新配制的 0.025%胰酶/0.02%乙二胺四乙酸溶液，加热至 37 摄氏度，等待细胞分离，通常需要 5 分钟左右。加入新鲜培养基中和胰蛋白酶，然后将细胞混合物转移到离心管中并离心。离心后，除去上清液，用新鲜培养基重悬细胞团，然后将悬浮液转移到新的烧瓶中。将 G418 加入培养基中，使其最终浓度达到 0.5 mg/ml
分割比率	建议比例为1:3至1:4
播种密度	2至4×10^⁴个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 至 3 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

NRK-EGFP-H2B 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制与分子分析