NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 500672

安全数据表

产品介绍

说明	NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 细胞系是通过转染环形质粒从正常大鼠肾脏（NRK）细胞中获得的克隆稳定细胞系。该质粒含有编码四个串联重复的 lambda N22 RNA 结合位点和三个串联重复的融合了 M9 核定位信号的 mEGFP（单体增强型绿色荧光蛋白）标签的基因构建体。转染后，细胞进行了耐药性选择，以确保基因修饰的稳定性。在这一克隆稳定品系中，约 50%的细胞表达荧光标记 4xλN22-3xmEGFP-M9，表明质粒的成功整合。该标记的表达可使细胞内过程实时可视化，mEGFP 强大的荧光信号也为其提供了便利。M9 核定位信号可确保表达的融合蛋白被转运到细胞核中，因此这种细胞系特别适用于研究核-细胞质转运、RNA 动态和基因表达调控。这种 NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 细胞系对于研究 RNA 结合蛋白相互作用、RNA 代谢以及核导入和导出机制的研究人员来说非常有价值。mEGFP 标记的存在使得共聚焦显微镜和活细胞成像等先进成像技术成为可能，为细胞成分的空间和时间动态提供了详细的信息。尽管细胞系出现了变异，但它仍然是剖析复杂分子通路和深入了解细胞功能的有力工具。
有机体	老鼠
组织	肾脏
同义词	NRK 4xlN22-3xmEGFP-M9

品种/亚种	奥斯本-门德尔
形态学	纺锤形纤维母细胞
生长特性	单层，粘附

引用	NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9（Cytion 目录号 500672）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	10116
CellosaurusAccession	CVCL_AV97
存款人	艾伦伯格实验室（EMBL）

表达的受体	表皮生长因子（EGF），增殖刺激活性（MSA）
蛋白质表达	4xλN22-3xmEGFP-M9: 位置/基因：937...1009、1066...1138、1194...1261、1323...1390 / lambda 肽、1462...2176、2179...2890、2896...3612 / mEGFP、3612...3815 / M9-His、5090...5884 / KanR/NeoR、7195...584 / Pcmv
产品	BsrG1/HindIII 之间的 M9-His 标记、新霉素、磷基转移酶、CMV 促进因子

培养基	DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS、0.5 mg/mL G418
解离试剂	Accutase
亚培养	丢弃旧培养基，用 PBS 冲洗细胞。加入新配制的 0.025%胰酶/0.02%乙二胺四乙酸溶液，加热至 37 摄氏度，等待细胞分离，通常需要 5 分钟左右。加入新鲜培养基中和胰蛋白酶，然后将细胞混合物转移到离心管中并离心。离心后，除去上清液，用新鲜培养基重悬细胞团，然后将悬浮液转移到新的烧瓶中。将 G418 加入培养基中，使其最终浓度达到 0.5 mg/ml
分割比率	建议比例为1:3至1:4
播种密度	2至4×10^⁴个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 至 3 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
STR 简介	大鼠_D1Wox31: 96,1 Rat_D2Wox37: 150,156 Rat_D19Wox11: 220 Rat_D10Wox8: 266,27 Rat_D4Wox7: 153,157 Rat_D2Wox27: 211,215 Rat_D5Rat33: 122,138 Rat_D10Wox11: 156 Rat_D1Wox23: 210,214 大鼠_D12Wox1: 402,406 大鼠_D6Wox2: 104,124 Rat_D8Wox7: 185 大鼠_D6Cebr1: 223,233 SRY: x,Y

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA