NE-4C 细胞
一般信息
| 说明 | NE-4C细胞是一种源自小鼠胚胎脑组织脑泡的小鼠神经外胚层干细胞系。该细胞系因能在特定实验条件下发生神经元分化而广受认可,使其成为研究神经发生、神经发育及神经元谱系决定过程的宝贵体外模型。 NE-4C细胞表现出神经前体细胞的特征,可通过视黄酸等试剂的处理诱导其分化为神经样细胞,从而产生与神经元成熟相关的形态学和分子变化。 在分化过程中,NE-4C细胞会伸出类似神经突的突起,并根据所采用的分化方案,表达包括βIII-微管蛋白、MAP2和神经丝蛋白在内的神经元标志物。 由于其分化行为相对均匀且对诱导刺激的反应可重复,NE-4C 细胞常被用于研究参与神经特化、突触发育、神经毒性、氧化应激反应以及神经保护机制的信号通路。 该模型还被应用于神经退行性疾病机制的研究、发育神经生物学以及影响神经元分化或存活的化合物的筛选。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 大脑,神经外胚层 |
特点
| 品种/亚种 | C57BL/6 × 129/Sv-Trp53-/- |
|---|---|
| 年龄 | 胚胎 |
| 形态学 | 神经上皮 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | NE-4C (Cytion 产品编号 305182) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_B063 |
生物分子数据
| 抗原表达 | Sox-2、Otx-2、En-1 |
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处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
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| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305182-270426 | 分析证书 | 24. Jun. 2026 | 305182 |