NCI-H446 细胞
一般信息
| 说明 | 该细胞系由 D. Carney、A.F. Gazdar 及其同事于 1982 年从一名肺小细胞癌患者的胸腔积液中建立。最初的肿瘤形态并不具有小细胞肺癌的特征。该细胞系在生物化学和形态上属于变异型小细胞肺癌,能表达神经元特异性烯醇化酶和脑肌酸激酶同工酶。在该细胞系中未检测到 L-DOPA脱羧酶、加压素、血管加压素、催产素或胃泌素释放肽。该细胞系的 c-myc DNA 扩增程度高出 20 倍,c-myc RNA 扩增程度高出 15 倍。该细胞系最初是在无血清的 RPMI 1640 培养基中繁殖的,培养基中补充了 10 nM 的氢化可的松、5 微克/毫升的胰岛素、10 微克/毫升的转铁蛋白、10 nM 的 17-beta-estradiol 和 30 nM 的亚硒酸钠。细胞可形成非典型小细胞肺癌组织学的可移植肿瘤。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 疾病 | 肺小细胞癌 |
| 转移部位 | 胸腔积液 |
| 同义词 | NCI-H446、H-446、NCI-446、NCIH446 |
特点
| 年龄 | 61 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 欧洲 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | NCI-H446(Cytion 目录号 305049) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1562 |
生物分子数据
| 致肿瘤性 | 是的,在裸鼠体内(细胞形成可移植的非典型 SCLC 组织学肿瘤)。 |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、2.5 克/升葡萄糖、10 毫摩尔 HEPES 和 1.0 毫摩尔丙酮酸钠。 |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 将悬浮细胞收集到 15 毫升试管中,用不含钙和镁的 PBS(T25 烧瓶用 3-5 毫升,T75 烧瓶用 5-10 毫升)轻轻清洗粘附的细胞。涂抹 Accutase(T25 烧瓶 1-2 毫升,T75 烧瓶 2.5 毫升),确保完全覆盖细胞层。让细胞在室温下孵育 10 分钟。孵育后,将悬浮细胞和粘附细胞混合并离心。离心后,小心重悬细胞团,并将细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1:3 至 1:4 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
氨甲蝶呤: x,x
CSF1PO: 13
D13S317: 8
D16S539: 12
D5S818: 11
D7S820: 10,11
TH01: 8,9.3
TPOX: 9,11
vWA: 18,19
D3S1358: 17
D21S11: 28
D18S51: 12,13
Penta E: 9,1
Penta D: 12,13
D8S1179: 13,15
FGA: 22
D1S1656: 14,16.3
D6S1043: 11
D2S1338: 18,2
D12S391: 17,18
D19S433: 13,14
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305049-050525 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305049 |
| 305049-230224 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305049 |
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