NCI-H23 细胞
一般信息
| 说明 | 该细胞系是根据一名 59 岁黑人男性肺腺癌患者治疗前的肺癌组织建立的。细胞携带 K-ras 12 基因突变和 p53 基因 246 密码子突变(ATC →ATG, 异亮氨酸 -> 蛋氨酸)。细胞表达 C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras 和 N-ras RNA。该细胞系的生长因子 A 链和 B 链、转化生长因子α和β以及表皮生长因子受体(EGFR)的 mRNA 表达不一致。NCI-H23 的 c-myc DNA 扩增水平高出 20 倍,但未检测到 c-myc RNA 扩增。细胞的角蛋白 5+8 和 18 以及波形蛋白染色呈阳性,但神经丝染色呈阴性。细胞左旋多巴脱羧酶阴性。细胞可在软琼脂糖中形成菌落,效率为 9.7%。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 疾病 | 肺腺癌 |
| 转移部位 | 不适用(原发性肺腺癌;建立治疗线时无记录在案的远处转移) |
| 应用 | 肺腺癌研究;KRAS G12C突变型非小细胞肺癌生物学;EGFR通路分析;c-Myc扩增研究;药物敏感性(靶向药物、化疗);NCI-60细胞系研究;PDGF/TGF-β信号传导 |
| 同义词 | NCI-H23、NCI.H23、NCI H23、H-23、NCIH23 |
特点
| 年龄 | 51 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 非洲 |
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | NCI-H23(Cytion 目录号 305044) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1547 |
| 转基因生物现状 | 未经基因改造;野生型肺腺癌细胞系。体细胞突变(KRAS G12C、TP53第246密码子)为肿瘤内源性突变。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | Myc+、src+、abl+、erb+、ras+、sis - |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 38 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1 至 3 × 10⁴ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以 5 × 10⁴ 个/cm² 的密度接种于培养皿中,并在首次更换培养基前让细胞附着至少 24 小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
氨甲蝶呤: x,x
CSF1PO: 10
D13S317: 12
D16S539: 11
D5S818: 12,13
D7S820: 9,1
TH01: 6
TPOX: 8,9
vWA: 16,17
D3S1358: 15
D21S11: 30
D18S51: 14
Penta E: 7,17
Penta D: 8
D8S1179: 15
FGA: 24
D6S1043: 12
D2S1338: 18,23
D12S391: 15,17
D19S433: 12,14
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