NCI-H209 细胞
一般信息
| 说明 | NCI-H209 细胞系是 A.F. Gazdar 及其同事于 1979 年从一名肺小细胞癌患者的骨髓中提取的。骨髓标本是在治疗前采集的。该细胞系是一种典型的 SCLC 细胞系,能表达四种生化标志物(神经元特异性烯醇化酶、脑肌酸激酶同工酶、L-DOPA 脱羧酶和蚕豆蛋白样免疫反应)的高水平。C-myc DNA 序列未被扩增。未发现严重的 DNA 结构异常。这是一种在悬浮液中生长为大型聚集体的细胞系。只有聚集体才有活力,但无法测量有意义的活力百分比。培养基中通常含有大量细胞碎片。该细胞表达一种不磷酸化的 RB1 异常形式,这显然是由于密码子 706 处的单点突变(Cys-> Phe)造成的。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 疾病 | 小细胞癌 |
| 转移部位 | 骨髓 |
| 同义词 | H209、H-209、NCH209 |
特点
| 年龄 | 55 岁 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | NCI-H209(Cytion 目录号 300183) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1525 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | P53 阴性 |
|---|---|
| 同工酶 | G6PD,B,PGM1,1-2,PGM3,1,ES-D,1,Me-2,0,AK-1,1,GLO-1,1-2,表型频率乘积 = 0.0624 |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠体内形成具有典型 SCLC 组织学的可移植肿瘤 |
| 产品 | 与正常肺部相比,该品系能产生正常数量的 p53 mRNA。 |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 建议比例为 1:2 至 1:3 |
| 播种密度 | 1 × 10⁵ 个细胞/毫升 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
氨甲蝶呤: x,x
CSF1PO: 11
D13S317: 11
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9
TH01: 7,9
TPOX: 8
vWA: 18,19
D3S1358: 18
D21S11: 32.2
D18S51: 13
Penta E: 11,12
Penta D: 11,12
D8S1179: 12,13
FGA: 20,24
|
| HLA 等位基因 |
A*: '02:01:01, '34:02:01
B*: '14:01:01, '40:01:02
C*: '03:04:01, '08:02:01
DRB1*: '04:05:01, '15:01:01G
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:02:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01G、'04:01:01G
E: '01:01:01, '01:03
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300183-820 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300183 |
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