NCI-H1373 细胞
一般信息
| 说明 | NCI-H1373细胞系是一种携带KRAS G12C突变的人类非小细胞肺癌(NSCLC)模型,该突变常与肺腺癌的致瘤过程相关。 该突变会导致下游信号传导通路(如丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)通路)的持续激活,从而促进肿瘤的增殖和存活。 NCI-H1373 被广泛用于研究,以评估针对 KRAS G12C 及相关致癌通路的新型治疗药物的疗效。 在临床前研究中,NCI-H1373已被用于评估新兴的KRAS G12C抑制剂(如ASP2453)的活性。该抑制剂表现出对突变型KRAS蛋白的强效、选择性且共价结合能力,可在体外抑制KRAS介导的信号传导和肿瘤细胞增殖。 该细胞系还被用于异种移植模型,在该模型中,ASP2453诱导了显著的肿瘤退缩。这一活性凸显了 NCI-H1373 在理解新型 KRAS 抑制剂的治疗潜力和作用机制方面的实用价值。 此外,NCI-H1373已被用于全基因组CRISPR敲除筛选,以探索PARP7抑制剂耐药的机制。 研究结果表明,芳香烃受体(AHR)信号传导的缺失与PARP7抑制剂耐药性相关,这为潜在的联合治疗策略提供了依据。此类研究证明了该细胞系在识别耐药通路以及优化针对KRAS G12C突变型非小细胞肺癌(NSCLC)的靶向治疗方案方面的作用。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 同义词 | H1373、H-1373、NCIH1373 |
特点
| 年龄 | 56 岁 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 非洲裔美国人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | NCI-H1373(Cytion 产品编号 305597) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1465 |
生物分子数据
| 突变概况 | 突变:KRAS,p.Gly12Cys (c.34G>T),纯合子;突变:TP53,p.Pro47Leu (c.140C>T),纯合子 |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 TrypLE Express 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混匀细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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