NCH644 细胞
一般信息
| 说明 | NCH644细胞系是一种胶质母细胞瘤干样细胞系,来源于缺乏表皮生长因子受体扩增的患者肿瘤,因此是研究胶质母细胞瘤生物学,特别是生长因子信号转导和干细胞特性的宝贵模型。研究表明,在NCH644细胞中,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在介导生长和维持干细胞特性方面起着重要作用,而表皮生长因子(EGF)则没有类似作用。NCH644细胞通过增加CD133和nestin等干细胞标记物的表达对bFGF做出反应,它们还表现出更强的抗凋亡能力。这种抗性加上缺乏表皮生长因子受体扩增,使NCH644成为了解胶质母细胞瘤干样细胞行为的合适模型,尤其是在不同生长因子条件下。 NCH644的另一个显著特点是,与NCH421k等其他胶质母细胞瘤干样细胞系相比,它的增殖速度较慢。然而,当受到bFGF刺激时,NCH644细胞显示表皮生长因子受体表达增加,即使没有表皮生长因子受体扩增,这突显了成纤维细胞生长因子受体(FGFR)和表皮生长因子受体信号通路之间的相互作用。此外,bFGF 在增加 NCH644 细胞的克隆性和多潜能性方面发挥了作用,进一步支持了 bFGF 对维持这些细胞的胶质瘤干样特性至关重要的观点。 研究还表明,NCH644细胞中存在保持标记、缓慢循环的亚群,这些亚群表现出更强的致瘤性和对辐照和替莫唑胺等治疗的耐受性。NCH644 株系中的这种标记保持细胞亚群具有很强的致瘤性,即使细胞数量很少,也能在免疫功能低下的小鼠体内形成肿瘤。这些特点加上它们对标准疗法的抵抗力,使NCH644成为研究针对胶质母细胞瘤干细胞的治疗策略的重要工具。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 大脑 |
| 疾病 | 胶质母细胞瘤 |
特点
| 年龄 | 66 岁 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 生长特性 | 球茎培养 |
监管数据
| 引用 | NCH644(Cytion 目录号 300124) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_x914 |
生物分子数据
| 抗原表达 | CD133 高度阳性 |
|---|---|
| 致肿瘤性 | 是 |
| 倍性状态 | 非整倍体 |
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、5 毫克/升肝素、20 毫微克/毫升 bFGF、20 微克/升 EGF、5 毫克/升 胰岛素、100 毫克/升 转铁蛋白、5.2 微克/升 Na-硒、6.3 微克/升 黄体酮、161.1 微克/升 Putrescin、50 毫克/升 氢化可的松。 |
| 亚培养 | 对于球形培养物的亚培养,首先使用带有 1000 μl 滤芯的 Eppendorf 移液器,通过上下移液 5 到 10 次,机械地将球形培养物分离。然后,将混合物在室温下以 300g 离心 5 分钟,使细胞沉淀。弃去上清液,用新鲜培养液重悬细胞团。最后,将重新悬浮的细胞转移到新的培养容器中,以促进球形细胞的进一步形成。这种方法可确保球形体的有效分解,并为它们在新环境中继续生长做好准备。 |
| 播种密度 | 2 × 10⁵ 个细胞/毫升 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,让细胞从冷冻过程中恢复至少 24 到 48 小时。 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1(Cytion 目录号 800100),其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,以促进恢复并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300124-622 | 分析证书 | 26. May. 2025 | 300124 |
| 300124-416SF | 分析证书 | 04. May. 2026 | 300124 |