NCH612 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300121

安全数据表

产品介绍

说明	NCH612 是一种源自患者的少突胶质细胞系，来源于人类脑组织，是无弹性少突胶质瘤（WHO III 级）的相关研究模型。该细胞系携带 IDH1 R132H 突变，这是少突胶质细胞瘤常见的标志性基因改变。这种突变会导致表观遗传学改变，包括胶质瘤 CpG 岛甲基化表型（G-CIMP），从而导致肿瘤的发展和恶化。值得注意的是，NCH612 表现出染色体臂 1p 和 19q 的部分缺失，这是少突胶质瘤中常见的遗传特征，与较好的预后和对某些疗法的反应有关。研究表明，NCH612 对 DNA 甲基转移酶抑制剂地西他滨（DAC）特别敏感。DAC 主要通过下调端粒酶反转录酶 TERT 和上调参与 DNA 损伤反应的细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p21，导致细胞增殖和集落形成减少。有趣的是，这种敏感性似乎与IDH1突变和1p/19q编码缺失有关，因为其他没有这种缺失的IDH1突变胶质瘤细胞系（如NCH1681）对DAC表现出抗药性。这些发现表明，像DAC这样的表观遗传疗法对具有1p/19q编码缺失的IDH1突变无性少突胶质瘤特别有效。进一步的分子研究发现，在NCH612细胞中处理DAC会导致与DNA复制、细胞周期调控和溶酶体功能有关的通路丰富化，从而揭示了该药物的作用机制。DAC 对 TERT 的抑制是由 p21 介导的，这强调了该通路在表观遗传疗法反应中的关键作用。鉴于其明确的遗传和表观遗传学特征，NCH612是研究无性少突胶质瘤生物学和开发针对1p/19q编码缺失的IDH1突变肿瘤的靶向疗法的宝贵体外模型。
有机体	人类
组织	大脑
疾病	无弹性少突胶质细胞瘤，WHO III 级，IDH1 突变 (R132H)

年龄	39 年
性别	男
种族	高加索人
生长特性	球茎培养

引用	NCH612（Cytion 目录号 300121）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_x913

培养基	DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS、5 毫克/升肝素、20 毫微克/毫升 bFGF、20 微克/升 EGF、5 毫克/升胰岛素、100 毫克/升转铁蛋白、5.2 微克/升 Na-硒、6.3 微克/升黄体酮、161.1 微克/升 Putrescin、50 毫克/升氢化可的松。
亚培养	对于球形培养物的亚培养，首先使用带有 1000 μl 滤芯的 Eppendorf 移液器，通过上下移液 5 到 10 次，机械地将球形培养物分离。然后，将混合物在室温下以 300g 离心 5 分钟，使细胞沉淀。弃去上清液，用新鲜培养液重悬细胞团。最后，将重新悬浮的细胞转移到新的培养容器中，以促进球形细胞的进一步形成。这种方法可确保球形体的有效分解，并为它们在新环境中继续生长做好准备。
播种密度	1 × 10^⁵ 个细胞/毫升
流体更新	每 2 到 3 天必须添加一次新鲜培养基（根据细胞培养瓶的大小，每次添加 2 到 5 毫升）。
解冻后恢复	慢速。解冻后，让细胞从冷冻过程中恢复至少 48 小时。
冷冻介质	作为冷冻保存培养基，我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1（Cytion 目录号 800100），其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，以促进恢复并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
HLA 等位基因	A: '02:01:01 B: '57:01:01, '57:01:01G C: '04:01:01 DRB1: '11:01:01 DQA1: '05:05:01 DQB1: '03:01:01 DPB1*: '04:02:01 E: '01:03:02

NCH612 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA