MML-1 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300288

安全数据表

产品介绍

说明	MML-1 细胞系是一种从恶性黑色素瘤中提取的黑色素瘤细胞系。该细胞系主要用于研究黑色素瘤生物学，特别是细胞外囊泡 (EV) 在细胞间通讯和肿瘤进展中的作用。MML-1细胞释放各种亚型的EV，包括外泌体、微囊泡和凋亡体，每种EV都携带不同的RNA载体，如microRNA（miRNA）和其他非编码RNA。利用 MML-1 细胞进行的研究表明，这些细胞释放的外泌体含有特定的 miRNA，如 miR-214-3p、miR-199a-3p 和 miR-155-5p，它们与黑色素瘤的发展和转移密切相关。与其他 EV 类型相比，这些 miRNA 在外泌体中富集，并与黑色素瘤相关的重要通路有关，如 MAPK 信号通路的调节和肿瘤微环境的相互作用。有趣的是，MML-1衍生外泌体的miRNA图谱与黑色素瘤临床样本的miRNA图谱比较显示出明显的重叠，表明这种细胞模型在了解黑色素瘤进展方面具有临床意义。除了miRNAs，MML-1细胞还释放其他非编码RNAs，如小核RNAs（snoRNAs）和线粒体相关转运RNAs（mt-RNAs），这些RNAs在EV亚型中分布不同。这些发现凸显了MML-1细胞系在研究黑色素瘤分子机制方面的实用性，特别是肿瘤细胞如何通过EV交流并影响其微环境。
有机体	人类
组织	皮肤
疾病	黑色素瘤
同义词	MML1

年龄	未说明
性别	未说明
形态学	上皮样
生长特性	附着物

引用	MML-1（Cytion 目录编号 300288）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_6004

蛋白质表达	P53 阳性
致肿瘤性	是，在裸鼠身上
逆转录酶	阴性
突变概况	V600E 型 BRAF 突变是通过 DNA 方法（测序、RT-PCR）和蛋白质方法（Western Blot）确定的。

培养基	RPMI 1640，w：2.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：2.0 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820700a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
播种密度	1 × 10^⁴ 个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 至 3 次
解冻后恢复	解冻后，将细胞以5×10^⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

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MML-1 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA