MKN1细胞
一般信息
| 说明 | MKN1是一种源自一名患有低分化腺癌的成年患者的人胃癌细胞系。由于该细胞系在模拟胃癌进展、侵袭及对治疗的反应方面具有重要意义,因此在癌症研究中被广泛应用。 该细胞系表现出间质样形态,表明发生了上皮-间质转化(EMT),这一过程对癌症转移至关重要。MKN1细胞系的特点是其对RhoA等关键蛋白的表达水平中等至较低,这使其成为研究与细胞粘附和运动相关信号通路的重要工具。 近期研究强调了MKN1在探索DCLK1(双皮质素样激酶1)——一种假定的癌症干细胞标志物——在胃癌中作用方面的重要性。 MKN1细胞中DCLK1的过表达会促进上皮-间质转化,并增强小细胞外囊泡(sEVs)的分泌,而sEVs与细胞迁移及肿瘤微环境重塑密切相关。 对来自DCLK1过表达MKN1细胞的sEVs进行的蛋白质组学分析,发现了参与迁移和粘附的蛋白质(如STRAP和BCAM)发生了显著改变。此外,DCLK1的激酶活性似乎会调节这些囊泡中载荷蛋白的选择,这突显了其作为治疗靶点的潜力。 此外,针对MKN1细胞中RHOA突变(R129W)的研究表明,该突变在改变细胞迁移和粘附通路方面发挥着作用,且这种作用与CDH1突变无关。 功能实验表明,该突变导致RhoA处于更高活性的GTP结合状态,从而促进了细胞运动能力的增强。这些发现使MKN1成为解析胃癌发病机制背后遗传和分子机制以及测试潜在治疗干预措施的可靠模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胃部 |
| 疾病 | 腺鳞癌 |
| 转移部位 | 淋巴结 |
| 同义词 | MKN-1、MKN 1 |
特点
| 年龄 | 72 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 日语 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | MKN1(Cytion 产品编号 305589) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1415 |
生物分子数据
| 突变概况 | 突变:TP53,p.Val143Ala(c.428T>C) |
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处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
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| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 TrypLE Express 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混匀细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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