MHH-ES1 细胞
一般信息
| 说明 | MHH-ES1 细胞系来源于一名尤文肉瘤患者,尤文肉瘤是一种侵袭性极强的骨和软组织癌症,主要侵袭儿童和年轻人。该细胞系是研究尤文肉瘤分子机制的重要模型,特别是研究这种癌症特有的 EWSR1-FLI1 融合基因的作用。该融合基因是由 11 号染色体和 22 号染色体之间的易位产生的,从而产生了一种驱动肿瘤发生的致癌转录因子。与其他尤文肉瘤细胞系一样,MHH-ES1 也被用来研究受 EWSR1-FLI1 影响的途径,包括细胞增殖、分化和凋亡的改变。 研究人员利用 MHH-ES1 细胞系来评估针对尤文肉瘤存活和增殖关键途径的各种治疗药物的疗效。例如,它有助于测试旨在破坏 EWSR1-FLI1 融合基因或其下游效应因子的小分子抑制剂、RNA 干扰和 CRISPR-Cas9 基因编辑技术。此外,MHH-ES1 还是研究常规化疗耐药机制的模型,并可用于识别新型生物标记物,以对尤文肉瘤患者进行早期诊断和治疗反应监测。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 骨质 |
| 疾病 | 尤文氏肉瘤 |
| 转移部位 | 腹水 |
| 同义词 | MHH-ES-1, MHHES1 |
特点
| 年龄 | 12 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 土耳其语 |
| 形态学 | 小圆形细胞 |
| 生长特性 | 粘附、集群 |
监管数据
| 引用 | MHH-ES1(Cytion 目录号 300136) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1411 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1至2×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每 3 至 5 天 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '01:01:01, '68:01:01
B*: '40:01:02, '49:01:01
C*: '01:02:01, '07:01:01
DRB1*: '07:01:01, '11:01:01
DQA1*: '02:01:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '03:03:02G
DPB1*: '10:01:01, '13:01:01
E: '01:01:01, '01:03:01
|