MDBK (NBL-1) 细胞
一般信息
| 说明 | MDBK 细胞是麦丁-达比牛肾细胞(又称 NBL-1)的简称,是一种特殊的生物资源,来源于明显健康的成年牛(特别是雄性牛)的肾脏。这些细胞粘附生长,具有上皮样形态。 MDBK 细胞的一个显著应用在于它们能够促进宿主细胞表面膜上牛艾美耳病衍生抗原表达的体外研究。 MDBK 细胞的平均倍增时间为 24 至 35 小时,增殖速度适中。MDBK 细胞系的建立可追溯到 1957 年 2 月 18 日,当时 S.H. Madin 和 N.B. Darby 成功地从一头健康成年母牛的肾脏中提取了 MDBK 细胞。从那时起,这些细胞就成为生物研究的基石,在各个科学领域取得了无数突破。 对 MDBK 细胞进行核型分析后发现,其染色体模数为 51,表明细胞处于低二倍体状态。在细胞群中,低二倍体状态表现为干系染色体数为 2n = 60,约有 5%的细胞含有 2S 成分。此外,通常存在 11-14 条标记染色体,由偏中心、亚偏中心和尖顶中心染色体组合而成。值得注意的是,x 染色体似乎是单体的,而没有观察到 HSR 染色体或 DM(双分)。 MDBK 细胞在生物研究领域有着广泛的应用。它们的用途扩展到三维细胞培养,使科学家能够再造复杂的组织样结构,用于高级研究。此外,MDBK 细胞在高通量筛选方面也非常有价值,有助于快速有效地筛选各种用途的化合物或制剂。此外,这些细胞在毒理学研究中发挥着至关重要的作用,对于评估物质对生物体的安全性和潜在不良影响至关重要。 |
|---|---|
| 有机体 | 牛 |
| 组织 | 肾脏 |
| 同义词 | MDBK(NBL-1)、NBL-1、马丁达比牛肾、马丁达比牛肾 |
特点
| 品种/亚种 | 牛 |
|---|---|
| 年龄 | 成人 |
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | MDBK(NBL-1)(Cytion 目录号 600396) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9913 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0421 |
生物分子数据
| 病毒 | 经测试,该品系不含牛腹泻病毒 (BVD)。 |
|---|---|
| 病毒易感性 | 这些细胞对牛腹泻病毒、水泡性口炎(印第安纳株)、传染性牛鼻气管炎病毒、牛细小病毒、牛腺病毒 I 型和 III 型以及副流感病毒 3 型敏感。 |
| 抗病毒能力 | 脊髓灰质炎病毒 2 |
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 产品 | 角蛋白 |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每 3 天 |
| 解冻后恢复 | 快速 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 600396-090123 | 分析证书 | 21. Jul. 2025 | 600396 |