MDA-MB-231-GFP
一般信息
| 说明 | MDA-MB-231-GFP 是广泛应用的人乳腺癌细胞系 MDA-MB-231 的荧光标记变体,通过慢病毒转导技术工程化改造,使其能够表达绿色荧光蛋白(GFP)。 这种改造使得在体外和体内均可对肿瘤细胞的动态变化进行实时可视化和定量分析,从而有助于对肿瘤-基质相互作用、细胞增殖及转移行为进行详细分析。 亲本 MDA-MB-231 细胞系源自一名三阴性乳腺癌(TNBC)患者的胸腔积液,表现出具有间质表型的侵袭性、侵袭行为,使其成为研究 TNBC 病理生理学和治疗耐药性的基石模型。 在与人类间充质干细胞/基质细胞(MSCs)的共培养实验中,MDA-MB-231-GFP细胞表现出显著增强的增殖能力和促肿瘤行为。研究表明,与MSCs的直接接触——而非仅靠可溶性因子——是产生这一效应的关键。 具体而言,与MSCs共培养4天后,MDA-MB-231-GFP细胞的增殖率较单培养组提高了39.5%,并诱导了一部分乳腺癌细胞表达CD90——该标志物在标准条件下并不表达。 这种由MSCs诱导的CD90表达需要直接的细胞间相互作用,且通过阻断间隙连接或Notch信号传导可部分抑制该现象,这表明了特定细胞间通信通路的参与。 在体内实验中,将 MDA-MB-231-GFP 细胞与 MSCs 共同注射到免疫缺陷 NOD/scid 小鼠体内,与仅注射癌细胞相比,肿瘤体积增加了约 10 倍,转移潜力也增强了。 这些肿瘤表现出更高的血管生成和更强的存活能力,并保留了一小部分 CD90 阳性细胞群,这进一步印证了体外研究结果。 综合来看,这些研究将 MDA-MB-231-GFP 确立为研究肿瘤-基质相互作用、MSC 诱导的表型可塑性以及三阴性乳腺癌肿瘤进展机制的可靠模型。 基因改造:通过复制缺陷型慢病毒转导进行稳定改造,以表达 ZsGreen1 绿色荧光蛋白报告基因;在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选下作为多克隆群体维持。S1/BSL-1 防护等级。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 转移性 |
| 疾病 | 乳腺腺癌 |
| 转移部位 | 胸腔积液 |
特点
| 年龄 | 51 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | MDA-MB-231-GFP(Cytion 目录号 305691) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_E2QK |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该细胞系通过复制缺陷型慢病毒转导,稳定整合了ZsGreen1绿色荧光蛋白报告基因。 由此获得的多克隆细胞群在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选条件下维持。必须采用S1级生物安全防护措施。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | GFP |
|---|---|
| 抗原表达 | ZsGreen1(绿色荧光蛋白) |
| 突变概况 | 突变:p.Gly464Val,异卵;突变:p.Gly13Asp,异卵;突变:p.Arg280Lys,同卵 |
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 1.6 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 1.0 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a) |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 5% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 转移部位: | 胸腔积液 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305691-200825 | 分析证书 | 22. Oct. 2025 | 305691 |