MCA-3D 细胞
一般信息
| 说明 | MCA-3D 细胞系来源于小鼠表皮原代培养物,它们对钙诱导的末端分化具有抵抗力。这些细胞最初用致癌物质 N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)或 7,12-二甲基苯并[a]蒽(DMBA)处理,随后暴露于 12-O-十四碳酰基樟脑-13-乙酸酯(TPA)。通过将培养基中的钙含量提高到 1.2 mM 来评估细胞对终极分化的耐受性,钙可选择性地促进转化细胞的生长,而正常细胞通常会发生终极分化并死亡。 MCA-3D 细胞系呈现上皮形态,并在培养过程中形成界限清晰的菌落。超微结构分析表明,MCA-3D 细胞含有角蛋白丝和脱丝体,这表明它们起源于上皮细胞,并在一定程度上维持了正常的角质细胞分化。然而,这些结构的确切丰度会因细胞系内不同亚群而有所不同。 MCA-3D 细胞通过皮下注射到合成的 Balb/c 新生儿体内进行了致瘤性测试,结果表明该细胞系即使在高钙条件下长期培养也不会致瘤。此外,MCA-3D 细胞在软琼脂中不生长,进一步证明了其非恶性表型。γ-谷氨酰转肽酶(GGT)活性和转谷氨酰胺酶活性的生化检测表明,MCA-3D 细胞的谷氨酰转肽酶(GGT)活性为阴性,其转谷氨酰胺酶活性与致瘤潜能无关,符合其非致瘤分类。 总之,MCA-3D 细胞系是研究癌变早期阶段以及影响从肿瘤前病变发展为完全恶性肿瘤的因素的模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 皮肤 |
| 同义词 | MCA3D, MCa3D, MCA/3D, MCA 3D |
特点
| 品种/亚种 | BALB/c |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 细胞类型 | 角质细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | MCA-3D(Cytion 目录编号 400437) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5797 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | Ham's F12,w:1.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:1.0 mM 丙酮酸钠,w:1.1 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820600a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | TrypLE Express |
| 亚培养 | 去除培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗粘附的细胞(T25 细胞培养皿用 3-5 毫升 PBS,T75 细胞培养皿用 5-10 毫升)。加入 TrypleExpress(每个 T25 细胞培养瓶 1-2 毫升,每个 T75 细胞培养瓶 2.5 毫升),细胞片必须完全覆盖。在 37 摄氏度下培养 15-20 分钟。用培养基(10 毫升)小心重悬细胞,300xg 离心 5 分钟,用新鲜培养基重悬细胞,然后分装到装有新鲜培养基的新培养瓶中。 |
| 播种密度 | 0.5至1×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 400437-712 | 分析证书 | 26. May. 2025 | 400437 |
| 400437-100326 | 分析证书 | 08. Apr. 2026 | 400437 |