M2-10B4 细胞
一般信息
| 说明 | M2-10B4细胞系是从(C57BL/6J X C3H/HeJ)F1小鼠的骨髓基质细胞中提取的克隆。这些基质细胞是骨髓微环境的重要组成部分,在支持造血方面发挥着重要作用。M2-10B4 细胞对研究基质细胞和造血细胞之间的相互作用特别有价值,因为它们能在长期培养中支持人类和小鼠的骨髓造血。此外,这些细胞还能在体外维持某些依赖于小鼠基质细胞的前 B 细胞系,使它们成为造血研究的多功能工具。 M2-10B4 细胞表达层粘连蛋白和胶原蛋白 IV 等重要的细胞外基质成分,这有助于它们支持造血细胞。不过,它们不表达胶原蛋白 I 或因子 VIII,这一点使它们有别于其他基质细胞系。层粘连蛋白和胶原蛋白 IV 的存在对骨髓微环境的维持至关重要,可影响细胞粘附、分化和信号通路。研究人员经常在共培养系统中利用 M2-10B4 细胞系来探索基质细胞对造血祖细胞行为的影响,尤其是在骨髓生理学和疾病模型中。 鉴于其起源和功能特性,M2-10B4 细胞是研究骨髓生态位的重要模型,尤其是与白血病等血液病有关的研究。它们还有助于药物筛选和针对骨髓微环境的治疗策略的开发。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 骨髓 |
| 同义词 | M210B4 |
特点
| 品种/亚种 | C57BL/6J x C3H/HeJ |
|---|---|
| 年龄 | 未说明 |
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 纤维母细胞样 |
| 细胞类型 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | M2-10B4(Cytion 目录编号 400428) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5794 |
生物分子数据
| 产品 | 层粘连蛋白、胶原 IV(胶原 I(-)、因子 VIII(-)。 |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后存活率可能较低。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 400428-813 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 400428 |
| 400428-060226 | 分析证书 | 13. Mar. 2026 | 400428 |