M-1 细胞
一般信息
| 说明 | M-1 细胞系是一种特性良好的上皮细胞模型,来源于转基因成年小鼠的肾脏。具体来说,M-1 细胞来源于皮质集合管上皮细胞,并保留了该肾节段的许多分化特征。这些细胞表达皮质集合管细胞的典型标志物,包括上皮钠通道(ENaC)、水蒸发蛋白和紧密连接蛋白,因此被广泛用于肾脏生理、离子转运和上皮极性研究的体外模型。 从功能上讲,M-1 细胞具有较高的跨上皮阻力和矢量离子转运特性,这对于研究醛固酮调节的钠重吸收和血管加压素介导的水转运至关重要。根据 Stoos 等人的基础表征,M-1 细胞在可渗透的支持物上形成极化单层,并对激素刺激(如地塞米松和醛固酮)表现出适当的反应性,从而调节转运蛋白的表达和活性。这些特点使 M-1 细胞在研究肾上皮细胞的电解质处理和细胞信号传导机制方面具有特别重要的价值。 此外,M-1 细胞还在最近的研究中得到了验证,包括使用 STR 图谱对小鼠细胞系进行基因鉴定。这凸显了它们在当代肾脏生理学研究中的持续相关性和可靠性。它们能够在受控条件下再现类似活体的行为,这使它们成为上皮功能、肾毒性和肾脏疾病建模研究的标准。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 肾脏,皮质集合管 |
| 同义词 | M1-CCD |
特点
| 品种/亚种 | Tg(SV40E)Bri/7 转基因 |
|---|---|
| 年龄 | 未说明 |
| 性别 | 未说明 |
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | M-1(Cytion 目录编号 305261) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_8786 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:这种鼠集合管细胞系(M-1)含有转基因小鼠系(Tg(SV40E)Bri7)的 SV40 早期区,支持稳定的永生化。该构建体内源性整合于转基因背景中。此分类仅适用于德国国内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 病毒 | 人猿病毒 40(SV40) |
|---|
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 5% FBS 和 5 µM 地塞米松 |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305261-060924 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305261 |