洛沃-卢克
一般信息
| 说明 | LoVo-Luc 是人类 LoVo 结直肠腺癌细胞系的生物发光衍生物,经过基因工程改造,可稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因。 亲本 LoVo 细胞系源自一名 56 岁男性患者结直肠腺癌的左侧锁骨上淋巴结转移灶,是癌症研究中应用最广泛的结直肠癌细胞系之一。 LoVo 细胞表现出上皮样形态,其特征为微卫星不稳定性 (MSI)、错配修复缺陷 (dMMR) 以及表达包括 Myc、myb、ras、fos 和 p53 在内的致癌基因。 这些特征使LoVo成为研究错配修复缺陷型结直肠癌生物学特性及治疗反应(包括对免疫治疗的敏感性)的理想模型。 LoVo-Luc中稳定的荧光素酶整合,使得利用免疫缺陷宿主进行异种移植模型中的肿瘤负荷敏感、定量生物发光成像(BLI)成为可能。发光信号与存活肿瘤细胞数量相关,支持对肿瘤植入、生长动力学及治疗反应进行无创纵向监测。 LoVo-Luc 在针对 MMR 缺陷型结直肠癌评估免疫检查点抑制剂、化疗药物和靶向治疗的临床前研究中具有特别重要的价值,同时也适用于高通量药物筛选以及结直肠癌生物学机制的研究。 LoVo-Luc 保留了亲本 LoVo 细胞系的已知分子特征,包括其微卫星不稳定性(MSI)表型、致癌基因表达谱以及癌胚抗原(CEA)的产生。荧光素酶报告基因显著提高了实验通量,并能够对治疗疗效进行实时药效学评估。 研究人员在将其用于大规模临床前研究之前,应根据具体实验条件验证荧光素酶活性、MMR状态及细胞生长动力学。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 转移性 |
| 疾病 | 结肠腺癌 |
| 转移部位 | 左锁骨上淋巴结 |
特点
| 年龄 | 56 岁 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Lovo-Luc(Cytion 产品编号 305682) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_4Y03 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该细胞系含有通过复制缺陷型慢病毒转导引入的、稳定整合的萤火虫荧光素酶报告基因盒(Luc2,经密码子优化)。 由此获得的多克隆细胞群在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选条件下维持。需采用S1级生物安全防护措施。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 抗原表达 | HLA A11、B15、B17、Cw1、Cw3、B型血、Luc2(萤火虫,密码子优化) |
|---|---|
| 同工酶 | G6PD,B,PGM1,2,PGM3,1-2,6PGD,A,ES-D,1 |
| 肿瘤基因 | Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src - |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠身上 |
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 产品 | 癌胚抗原 (CEA) 908 纳克/106 个细胞/10 天 |
| 突变概况 | 突变:p.Lys437Argfs*5,杂合子;突变:p.Arg1114Ter,杂合子;突变:p.Met1431fs*42,杂合子; 突变:p.Arg2816Gln,杂合子;突变:p.Leu15Phefs*41,杂合子;突变:p.Arg505Cys,杂合子; 突变:p.Gly13Asp,杂合子;突变:p.Ala292Val,杂合子;突变:p.Lys128Serfs*35,纯合子 |
处理
| 培养基 | HAMSF12 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 24-48小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 转移部位: | 淋巴结 |
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