Lec1 细胞
一般信息
| 说明 | Lec1细胞系是从亲本CHO克隆Pro-5中筛选出的、对小麦胚芽凝集素具有抗性的突变克隆。这一筛选过程产生了一种具有特定糖基化缺陷的细胞系,其特征在于存在N-连接糖链,且其中Man5-GlcNAc2-Asn中间体被阻断。 这种阻滞是由于缺乏 N-乙酰葡萄糖胺基转移酶 I(GlcNAc-TI)所致,该酶对于糖链合成向更复杂形式的发展至关重要。因此,Lec1 细胞中积累了具有截短型高半乳糖型寡糖的糖蛋白。 Lec1 细胞对于糖蛋白生物合成研究具有不可估量的价值,特别是在理解 N-连接糖基化改变如何影响细胞功能方面。 研究人员利用 Lec1 细胞探究糖基化对蛋白质折叠、稳定性、受体功能及细胞内转运的影响。此外,这些细胞还为研究病毒感染或外源 DNA 转染诱导的内源性糖蛋白的区室化提供了独特平台。Lec1 细胞中简化的糖链结构也使其成为生产糖蛋白的理想选择,这些糖蛋白在各种实验背景下更易于分析。 该细胞主要用于体外机制研究,以及涉及糖蛋白生产和分析的生物技术应用。 |
|---|---|
| 有机体 | 中国仓鼠 |
| 组织 | 卵巢 |
| 同义词 | CHO-Lec1、CHO Lec1、Pro-Lec1.3C、Pro-5 Lec1.3c、Pro-5WgaRI3C |
特点
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Lec1(Cytion 产品编号 305010) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_3440 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | 阿尔法 MEM,含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺:不含核糖核苷,不含脱氧核糖核苷:脱氧核苷,含 1.0 毫摩尔丙酮酸钠,含 2.2 克/升 NaHCO3 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 2至4×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305010-260326 | 分析证书 | 23. May. 2026 | 305010 |