LS513 细胞
一般信息
| 说明 | LS513细胞系是一种表征完善的结直肠癌模型,源自1985年对一名63岁白人男性患者原发肿瘤活检样本。该肿瘤被归类为杜氏分期C期黏液分泌型盲肠癌,位于鲍氏瓣处。 LS513细胞具有粘附特性,并表现出多药耐药性(MDR),使其成为研究结直肠癌耐药机制的宝贵模型。该细胞在甲基纤维素中的集落形成效率达30%,且能在裸鼠体内形成肿瘤,进一步验证了其在致癌研究中的应用价值。 在遗传学层面,LS513细胞具有若干显著特征:其表达野生型p53致癌基因,约50%细胞表面表达癌胚抗原(CEA)。 此外,LS513细胞表达主要组织相容性复合体(MHC)I类抗原(包括HLA和β2微球蛋白),但缺乏MHC II类抗原(HLA-DR、DQ和DP)。该细胞每10⁶个细胞每24小时可产生83皮克转化生长因子β1(TGF-β1)。 值得注意的是,TGF-β1可抑制LS513细胞增殖,而TGF-β2对其生长无显著影响。与LS1034细胞系相比,LS513细胞对TGF-β1的敏感性降低100倍,表明这两种结直肠癌模型对生长因子信号的反应存在显著差异。 LS513细胞展现出独特的抗原表达谱,对细胞间粘附分子1(ICAM-1)和HLA I类抗原呈强阳性反应。 值得特别关注的是其缺乏MHCⅡ类抗原表达,这暗示了可能与结直肠癌进展及转移相关的免疫逃逸机制。这些特征结合其多重耐药性及在免疫缺陷小鼠中形成肿瘤的能力,使LS513细胞成为研究结直肠癌分子与细胞机制的强大工具,尤其在免疫相互作用和治疗耐药性领域具有重要价值。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 结肠直肠癌 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 同义词 | LS513、LS 513 |
特点
| 年龄 | 63 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | LS513(Cytion 目录号 300457) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1386 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | CEA+(50%),p53+ |
|---|---|
| 抗原表达 | 癌胚抗原 (CEA)、ICAM-1、HLA I 类阳性 |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠体内形成肿瘤 |
| 产品 | 转化生长因子 beta-1(TGF beta-1,每 10 个 exp6 细胞 83 皮克/24 小时) |
| 核型 | 可以区分出两个干系。主干系有 65% 的细胞,模式数为 51xY,有 3 个标记:M1-der(1)t(1,15)、M2-der(2)t(2,3)der(3)t(2,3)、M3 和单体 15。第二个干系的染色体模数为 52xY,出现了 M2 和 M3 以及 1 号染色体长臂的同源染色体 M4。在分析的所有细胞中都出现了 5、7 三体、13 四体、2 和 3 单体,该品系没有出现 15 单体。 |
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每 3 天 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '32:01:01
B*: '51:01:01
C*: '01:02:01
DRB1*: '11:01:01
DQA1*: '05:05:01
DQB1*: '03:01:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300457-512 | 分析证书 | 15. Jan. 2026 | 300457 |
| 300457-201125 | 分析证书 | 15. Jan. 2026 | 300457 |