LS174T 细胞
一般信息
| 说明 | LS147T 细胞系是 LS-180 的变种,两者都来自一名 58 岁白人女性患者的杜克 B 型结肠腺癌。最初的 LS-180 细胞系是通过对切碎的肿瘤组织进行 10 个月的培养而建立的。LS-147T 及其母系的显著特点是表达多种癌基因,包括 myc、myb、ras 和 fos,而其他基因如 sis、abl 和 ros 则为阴性。该品系还表达高水平的癌胚抗原(CEA)、白细胞介素 6(IL-6)和白细胞介素 10(IL-10),这些都是结直肠癌研究的重要标志物和潜在靶点。 这些细胞表现出结肠上皮细胞的几个关键特征,包括丰富的微绒毛和胞浆内粘蛋白空泡,这些是结肠粘膜分泌细胞的典型特征。电子显微镜研究证实了这些结构细节,进一步证明了它们的起源和分化状态。重要的是,LS-147T 细胞在免疫缺陷小鼠体内具有致瘤性,在皮下接种高密度细胞时可持续产生肿瘤,从而证实了其恶性潜能。 此外,LS-147T 细胞系在研究结直肠癌的分子和免疫学方面特别有价值。据报道,与母系 LS-180 相比,该细胞系更容易进行亚培养,使其成为长期研究中更实用的选择。LS-147T细胞产生的CEA明显高于HT-29等其他已建立的品系,这使得LS-147T成为了解肿瘤标志物动态和探索结直肠癌靶向疗法的重要模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 结肠 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 同义词 | LS174T、LS174T、LS-174-T、LS-174-T、LS 174 T、LS174T、LS-174T、LS 174T、LS-174、LS174 |
特点
| 年龄 | 58 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | LS174T(Cytion 目录号 300392) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1384 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | 结肠抗原 3 +、CEA +、p53 -、GFAP -、mRNA 表达 + |
|---|---|
| 抗原表达 | HLA A2、B13、B50,O 型血 |
| 同工酶 | ADA,1:G6PD,B,PGM1,1,PGM3,2,PGD,A,ES-D,1,PEP-D,1 |
| 肿瘤基因 | Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src - |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠身上 |
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 产品 | 癌胚抗原 (CEA) 10 天内 1944 纳克/106 个细胞、粘蛋白、白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-6 (IL-6) |
| 突变概况 | LS-174T 细胞的 Kras 基因第 12 密码子发生突变:GGT(Wt Gly)>GAT(Asp) |
| 核型 | 45,x 有一条 x 染色体缺失,但无其他染色体畸变 |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 5至8×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: 02:xx, '30:01:01
B*: '13:xx,'35:01:01
C*: 04:01:01, '06:xx
DRB1*: '04:02:01, '07:01:01
DQA1*: '02:01:01, '03:01:01
DQB1*: '02:02:01, '03:02:01
DPB1*: '03:01:01G, '04:01:01
E: '01:01, '01:03
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300392-512 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300392 |
| 300392-070225 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300392 |
| 300392-410, -412, -414 | 分析证书 | 05. Dec. 2025 | 300392 |