LM/TK(LMTK-) 细胞
一般信息
| 说明 | LM/TK-(LMTK-)细胞系来源于小鼠成纤维细胞,其特点是缺乏胸苷激酶(TK)活性。这种细胞系在遗传学和分子生物学研究中特别有用,是研究基因功能、DNA 复制和重组的模型系统。由于这些细胞中缺乏 TK,因此可以筛选出重新获得 TK 活性的突变体或重组细胞,这使它们在涉及 TK 缺陷突变体的研究中以及在转染外源 DNA 后筛选 TK 阳性克隆方面具有重要价值。 这种细胞系来自对 BUdR 具有抗性的 L-M 小鼠成纤维细胞系的一个亚系,可用于基因转移和体细胞杂交等遗传和生化研究。LM/TK- 细胞通常用于涉及单纯疱疹病毒(HSV)胸苷激酶基因的研究,因为它们为选择 HSV-TK 基因转化子提供了重要背景。这对基因治疗研究具有重要意义,因为 HSV-TK 可用于自杀式基因治疗策略,选择性地杀死癌细胞。此外,这些细胞还可用于重组病毒的生产以及病毒基因表达和复制的分析。因此,LMTK-细胞系在促进我们对基因操作的理解和治疗策略的开发方面发挥着至关重要的作用。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 皮下结缔组织、乳晕和脂肪 |
| 同义词 | L-M[TK-], LM TK negative, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L cells (TK-), L(TK-), L(tk-) |
特点
| 品种/亚种 | C3H/An |
|---|---|
| 年龄 | 100 天 |
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 纤维母细胞样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | LM/TK(LMTK-)(Cytion 目录号 305176) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_4536 |
生物分子数据
| 抗原表达 | H-2k |
|---|---|
| 致肿瘤性 | 是的,在裸鼠中(皮下注射1×10⁷个细胞后,21天内100%频率(5/5)发生肿瘤)。 |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每周 2 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305176-100725 | 分析证书 | 18. Aug. 2025 | 305176 |