LLC-PK1 细胞
一般信息
| 说明 | LLC-PK1 细胞是一种在生物医学研究中得到广泛应用的成熟细胞系。这些细胞来源于健康雄性猪的肾脏,表现出典型的上皮形态。LLC-PK1 细胞系具有极化性,含有紧密连接,是上皮组织的理想模型。 LLC-PK1 细胞的关键特征之一是能够产生纤溶酶原激活剂,这是一种刺激纤维蛋白溶解的物质。这一特性使LLC-PK1细胞在血栓研究中尤为重要。 近年来,纤溶酶原激活剂已被纳入血栓治疗药物中,因为它能促进小血块的溶解。除了能产生纤溶酶原激活物外,LLC-PK1 细胞还能产生大量的细胞角蛋白。这一特性使它们在各种药理学和新陈代谢研究调查中很受欢迎。 LLC-PK1细胞系已被用于药物代谢、转运、毒性和相互作用研究。LLC-PK1细胞还经常用于渗透性试验。尿嘧啶的转运机制因细胞系而异,Caco-2 细胞的基底膜上有一个不依赖 Na+ 的系统,而 LLC-PK1 细胞的顶膜上既有依赖 Na+ 的系统,也有不依赖 Na+ 的系统。 与其他细胞系相比,LLC-PK1 细胞具有体内近端肾小管细胞的许多特征,包括顶膜微绒毛、高活性顶膜酶以及甲状旁腺激素受体和钠依赖性葡萄糖转运体的表达。这使得LLC-PK1细胞成为肾脏毒理学研究的重要工具。肾脏毒理学研究中常用的另一种细胞系是 MDCK 细胞系。与 LLC-PK1 细胞一样,MDCK 细胞也是上皮细胞,但具有更典型的远端肾小管细胞特征。 它们表达血管加压素、催产素和前列腺素受体,这些受体受到刺激后会激活腺苷酸环化酶。LLC-PK1 和 MDCK 细胞系增殖迅速,在单层培养中可轻松传代多代。LLC-PK1 细胞还能形成 "圆顶",这是由于水和溶质的运输、紧密连接以及细胞与基质的粘附而形成的充满液体的水泡。 总之,LLC-PK1 细胞系是生物医学研究中一种多用途的宝贵工具。它已被广泛应用于药物代谢、药物转运、药物毒性、药物相互作用、肾脏毒理学和渗透性测定等多项研究中。LLC-PK1 细胞具有完善的上皮形态,能产生纤溶酶原激活物和细胞角蛋白,是理想的上皮组织模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 苏鼠 |
| 组织 | 肾脏 |
| 应用 | 药物代谢、渗透性试验、毒性和相互作用研究。 |
| 同义词 | LLC-PK(1)、LLC-PK-1、LLC PK-1、LLc-PK1、LLC PK1、LLCPK1、礼来实验室细胞-猪肾 1 |
特点
| 品种/亚种 | 汉普郡 |
|---|---|
| 年龄 | 3-4 周 |
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | LLC-PK1(Cytion 目录编号 607264) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 该细胞系含有猪 C 型肿瘤病毒(PCOV)序列和转录本。感染方式尚不确定,不能排除病毒分泌的可能性。在德国,这些病毒对人类被列为 BSL 1 级,对动物被列为 BSL 2 级(TRBA 462)。不过,德国生物安全中央委员会(ZKBS)将这些病毒和受感染的细胞系列为 BSL 2 级,用于基因改造应用。 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0391 |
生物分子数据
| 病毒 | 包含猪 C 型肿瘤病毒 (PCOV) 序列和转录本。不能排除病毒表达的可能性。 |
|---|---|
| 产品 | 凝血酶原激活剂 |
处理
| 培养基 | 培养基 199,w:2.7 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820101a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 3% 的 FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 将悬浮细胞收集到 15 毫升试管中,用不含钙和镁的 PBS(T25 烧瓶用 3-5 毫升,T75 烧瓶用 5-10 毫升)轻轻清洗粘附的细胞。涂抹 Accutase(T25 烧瓶 1-2 毫升,T75 烧瓶 2.5 毫升),确保完全覆盖细胞层。让细胞在室温下孵育 10 分钟。孵育后,将悬浮细胞和粘附细胞混合并离心。离心后,小心重悬细胞团,并将细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1至3×10⁶个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每 3 天 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 607264-030725 | 分析证书 | 18. Aug. 2025 | 607264 |