L-WRN 细胞
一般信息
| 说明 | L-WRN细胞系是一种小鼠成纤维细胞系,来源于L细胞,L细胞是最初从结缔组织中分离出来的小鼠成纤维细胞。L-WRN 细胞系经改造后可稳定表达 Wnt3a、R-软骨素 3 和 Noggin。这些因子对肠器官组织和干细胞培养物的生长和维持至关重要。过量表达这些蛋白可促进肠干细胞的增殖和分化,使L-WRN细胞成为研究肠道生物学和疾病建模的重要工具。 除了在类器官培养中的应用外,L-WRN细胞还是研究Wnt信号通路的有力模型。Wnt 信号在调节发育过程中和成年组织中的细胞命运、增殖和迁移方面起着关键作用。L-WRN细胞提供了一致且可控的Wnt3a、R-软骨素3和Noggin来源,有助于研究这些过程的分子机制。研究人员可以利用这些细胞剖析这些信号分子在癌症、组织再生和发育生物学等各种生物环境中的作用。 总之,L-WRN 细胞系是生物医学研究的强大工具,因为它能够支持复杂的三维培养物的生长,并可用于研究关键信号通路。它在推动肠道干细胞研究方面的作用以及对我们了解 Wnt 信号转导的贡献,都凸显了它在细胞和分子生物学领域的重要性。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 结缔组织 |
| 应用 | 三维细胞培养 |
特点
| 品种/亚种 | C3H/An |
|---|---|
| 年龄 | 100 天 |
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | L-WRN(Cytion 目录号 300641) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_DA06 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该源自小鼠NIH-3T3细胞系(L-WRN)的细胞株含有Wnt3a、R-spondin-3和Noggin的表达载体,包含SV40 DNA序列及双抗生素标记(hph和Tn5-neo),可实现这些信号分子的分泌。 插入片段在NIH-3T3基底细胞中稳定存在。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能存在差异。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | Wnt-3A、R-软骨素、noggin |
|---|
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300641-020523 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300641 |
| 300641-260525 | 分析证书 | 21. Jul. 2025 | 300641 |