L-929-GFP 细胞
一般信息
| 说明 | L-929-GFP细胞是小鼠L-929成纤维细胞系的荧光标记衍生物,该细胞系最初是从成年小鼠的皮下结缔组织中建立的。亲本L-929细胞系是生物医学研究中最广泛使用的小鼠成纤维细胞模型之一,其特征在于贴壁生长、纺锤形形态以及强大的增殖能力。 L-929细胞广泛应用于细胞毒性、炎症、细胞外基质生物学以及宿主-病原体相互作用的研究,同时也常用于肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子的生产和生物测定。 L-929-GFP细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的稳定表达,使得能够实时直接观察和定量追踪成纤维细胞的行为。这些细胞特别适用于基于荧光的应用,包括迁移实验、共培养实验、组织工程研究以及活细胞成像。 L-929-GFP细胞在保留亲代成纤维细胞系核心生物学特性的同时,增强了监测细胞定位、增殖以及复杂细胞环境内相互作用的功能。因此,它们成为研究基质细胞动力学、伤口愈合过程、生物材料相容性以及免疫介导的细胞毒性反应的通用模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 结缔组织 |
| 同义词 | L929/GL50 |
特点
| 年龄 | 100 天 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 细胞类型 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | L929-GFP(Cytion 产品编号 305956) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_E2Z7 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该细胞系通过复制缺陷型慢病毒转导,稳定整合了ZsGreen1绿色荧光蛋白报告基因。 由此获得的多克隆细胞群在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选条件下维持。必须采用S1级生物安全防护措施。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 抗原表达 | ZsGreen1(绿色荧光蛋白) |
|---|
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |