Ku 80-/- 细胞
一般信息
| 说明 | Ku80-/- MEF(小鼠胚胎成纤维细胞)细胞是经过基因工程改造的成纤维细胞,来自缺乏 Ku80 基因(XRCC5)的小鼠。Ku80蛋白与Ku70共同组成Ku异源二聚体,对于DNA双链断裂(DSB)修复的非同源末端连接(NHEJ)途径至关重要。这些细胞中缺少Ku80会削弱它们有效修复DSB的能力,从而使它们成为研究NHEJ途径在基因组稳定性、DNA修复机制和癌症生物学中的作用的宝贵模型。 Ku80-/- MEF细胞由于DSB修复能力受损,对电离辐射和其他DNA损伤剂的敏感性增加。这些细胞还容易积累染色体畸变,表现出基因组不稳定性。缺少 Ku80 不仅会影响 DNA 修复,还会影响 V(D)J 重组等其他细胞过程,而 V(D)J 重组对免疫系统中抗体和 T 细胞受体的多样化发展至关重要。 使用 Ku80-/- MEF 细胞进行的研究为了解 NHEJ 的分子机制以及 DNA 修复缺陷的广泛影响提供了重要的启示。这些研究对于了解癌症和其他与基因组不稳定性有关的疾病的发展至关重要。此外,这些研究还有助于探索潜在的治疗靶点,以增强癌细胞的 DNA 修复能力,从而提高依赖诱导肿瘤细胞 DNA 损伤的癌症治疗效果。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 胚胎 |
| 疾病 | 正常小鼠胚胎成纤维细胞(Ku80/XRCC5敲除;SV40永生化;NHEJ缺陷) |
| 转移部位 | 不适用(永生化MEF细胞;非临床肿瘤样本) |
| 应用 | NHEJ DNA修复研究;Ku80/XRCC5功能;DNA双链断裂(DSB)修复;基因组不稳定性建模;辐射敏感性;V(D)J重组;癌症生物学;遗传毒性检测;DNA损伤应答 |
| 同义词 | Ku80-/- MEF |
特点
| 年龄 | 胎儿 12-13 天 |
|---|---|
| 性别 | 未说明 |
| 种族 | 不适用(小鼠细胞系) |
| 形态学 | 成纤维细胞 |
| 细胞类型 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Ku 80-/-(Cytion 目录编号 305258) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_UJ16 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该MEF细胞系携带Ku80(XRCC5)纯合敲除突变,并经SV40大T抗原永生化处理。SV40转基因已稳定整合。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 病毒 | 转化体: Simian virus 40 (SV40) |
|---|---|
| 突变概况 | 突变:Ku80-/- |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305258-250924 | 分析证书 | 21. Jul. 2025 | 305258 |